Análise de micovíroses em Pseudocercospora griseola, agente causal da mancha-angular do feijoeiro
Micovírus. Hipovirulência. Hipervirulência. Phaseolus vulgaris. dsRNA
A mancha angular, causada pelo fungo Pseudocercospora griseola (Sacc.) Crous & U. Braun, é uma das doenças mais importantes do feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.). A presença de micovírus de RNA de fita dupla (dsRNA) tem sido observada neste patógeno. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi detectar a presença de micovirus em isolados frescos do campo e aramzenados de P. griseola e realizar a caracterização quanto à capacidade de esporulação e virulência no feijoeiro. Além disso, foi realizada a cura de quatro isolados, isto é, foram obtidas linhagens isogênicas sem a presença do vírus. Foram utilizados 29 isolados de P. griseola, sendo nove armazenados em micoteca e 20 coletados em campo experimental de feijoeiro. Os isolados foram cultivados em meio BDA e posteriormente, em meio líquido GPYE para obter a massa micelial. A extração de RNA total seguiu conforme o protocolo do TRIzol Reagent, e posteriormente seguida pelo tratamento com a enzima endonuclease S1 para obtenção dos dsRNA e submetidos à eletroforese em gel de agarose para identificar a presença ou ausência dos dsRNA.. As, linhagens isogênicos, isentos de vírus, de quatro isolados foram obtidas por meio cultura monospórica crescida em meio de cultura BDA com cicloheximida. A cura completa foi obtida em três isolados. Em 69% dos isolados avaliados foi observada a presnça de dsRNA. De acordo com o peso molecular os micovírus foram classificados nas famílias Totiviridae, Partiviridae e Chrysoviridae. Houve diferença significativa para a esporulação dos isolados avaliados. Os isolados apresentaram diferentes níveis de virulência quando inoculados nas cultivares de feijoeiro Rosinha, BRSHorizonte e na linhagem MAIII-16159.