Banca de DEFESA: KARLA CARVALHO DE AZEVEDO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: KARLA CARVALHO DE AZEVEDO
DATA: 21/02/2024
HORA: 08:00
LOCAL: https://meet.google.com/dcu-jmmx-xac
TÍTULO:

Mapeamento físico de sequências satélite de espécies silvestres de Solanum L.

PALAVRAS-CHAVES:

DNA repetitivo, FISH, cromossomo, batata

PÁGINAS: 35
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Agronomia
SUBÁREA: Fitotecnia
ESPECIALIDADE: Melhoramento Vegetal
RESUMO:

A batata cultivada (Solanum tuberosum L.) atualmente é a terceira cultura alimentar de maior peso do mundo, depois do arroz e do trigo em termos de consumo humano. No melhoramento genético da batata, as espécies silvestres podem ser fonte de alelos de interesse, tais como os de tolerância a estresses abióticos, como é o caso da espécie triploide nativa do Brasil, Solanum calvescens.  Para contribuir com a elucidação da controvérsia sobre a origem e sobre o status taxonômico dessa espécie triploide, a caracterização da fração repetitiva do seu genoma e de espécies relacionadas revelou variação na composição e abundância de sequências satélite. Este trabalho teve como objetivo localizar estas sequências nos cromossomos das espécies silvestres para melhor entendimento da dinâmica e inferir sobre a evolução cariotípica nesse grupo. As espécies avaliadas foram S. calvescens (2n=3x=36), Solanum chacoense (2n=2x=24) e Solanum commersonii (2n=2x=24). Para montagem das lâminas foram utilizadas células do meristema radicular. As regiões apicais das raízes foram tratadas em solução de 8-hidroxiquinolina (2mM), e fixadas em solução Carnoy (3:1). As raízes foram submetidas ao tratamento enzimático (4% celulase + 2% pectinase) e fixadas em Carnoy (3:1) até o uso. As lâminas foram preparadas pelo método de secagem à chama. Foram utilizadas três sondas de DNA satélite (CA8, CH11, CO1), DNA telomérico e de DNA ribossomal 5S, amplificadas por PCR e marcadas por nick translation com biotina-14-dATP (Roche Biochemicals®, UK) ou digoxigenina-11-dUTP.  A hibridização das sondas foi feita em câmara úmida a 37°C por 16 horas, após desnaturação dos cromossomos com formamida 70%. Após lavagens (82% estringência) foi feita a detecção das sondas com anti-digoxigenina conjugada com rodamina, e anti-biotina conjugada com fluoresceína, em tampão 1x TNB.  A montagem das lâminas será em meio Vectashield^® contendo DAPI (15µL). As lâminas foram avaliadas em microscópio de fluorescência Olympus BX60 utilizando filtros específicos e as imagens foram capturadas por meio de câmera digital refrigerada. Para o satélite CA8, foram encontrados sinais nas regiões subteloméricas das espécies S. calvescens e S. commersonni, e nenhum sinal foi visualizado em S. chacoense. Para o satélite CH11, sinais de maior ou menor intensidade foram observados em todas as espécies, embora em S. commersonni o padrão tenha sido diferente das demais. O satélite CO1 foi localizado apenas em S. chacoense e S. commersonii. Para as marcações com rDNA5s, em S. calvescens foram visualizados três sinais, nas regiões pericentroméricas dos braços curtos dos cromossomos, enquanto nas espécies diploides apenas dois sinais foram visualizados seguindo o mesmo padrão de localização. Para a sonda telomérica além dos sinais terminais, foram observados sinais intersticiais nas três espécies, como já descrito em outras espécies de Solanum. Os resultados indicam que S. calvescens difere das demais espécies com relação ao padrão de localização das sequências satélites avaliadas, o que corrobora a hipótese de que ser trata de uma espécie.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - MARCO TULIO MENDES FERREIRA - ND (Suplente)
Externo à Instituição - LÍVIA DO VALE MARTINS - UFPI (Suplente)
Externo à Instituição - GUILHERME TOMAZ BRAZ - UNICAMP (Membro)
Presidente - GIOVANA AUGUSTA TORRES (Membro)
Externo à Instituição - ANDREA PEDROSA-HARAND - UFPE (Membro)