EFEITOS DA ADIÇÃO DE MELATONINA NA QUALIDADE DO SÊMEN CANINO DESCONGELADO
biotecnologia da reprodução, estresse oxidativo, antioxidantes.
Este trabalho tem como objetivo apresentar um projeto de mestrado que avalia a adição
de melatonina no congelamento de sêmen canino em diferentes concentrações. O
propósito é reduzir o estresse oxidativo, já que a melatonina tem um importante papel
antioxidante, trazendo uma provável melhoria na qualidade do sêmen descongelado.
Serão utilizados sêmen de seis cães machos, adultos, com idade entre dois e cinco anos,
realizando-se três coletas de sêmen a cada 15 dias. A cada coleta 1ml de sêmen será
utilizado, subdividido em duas alíquotas de 0,5ml, sendo que cada alíquota será
submetida a um tratamento, totalizando o congelamento de dois tratamentos por coleta.
O diluidor a ser utilizado é composto por 0,328g de Tris (hidroximetil) aminometano,
0,178g de ácido cítrico e 0,125g frutose em 100ml de água deionizada, em uma diluição
1:1. O crioprotetor a ser utilizado é o etilenoglicol 5%, totalizando 0,025ml, uma vez
que a quantidade de diluidor a ser utilizada em cada amostra é de 0,5ml. A melatonina
será acrescentada ao sêmen juntamente com o crioprotetor etilenoglicol, em cinco
concentrações diferentes, sendo o grupo controle sem adição de melatonina (T0), e os
demais grupos com adição de 1 mM (T1), 1,5 mM (T2), 2 mM (T3), 2,5 mM (T4) e 3
mM (T5). Após diluição e adição de melatonina juntamente com etilenoglicol, o sêmen
passará por refrigeração a 4ºC por 1h, depois será envasado em palhetas de 0,25ml, e
mantido a 4cm do vapor de nitrogênio líquido por 10min até que por fim seja imergido
no nitrogênio para criopreservação. O sêmen será descongelado em banho-maria a 37ºC
por 1 munuto para poder ser avaliado quanto aos seus parâmetros cinéticos, morfologia,
integridade de acrossoma e parâmetros que revelam o estresse oxidativo como SOD,
CAT e MDA. As análises serão realizadas comparativamente entre os tratamentos, a fim
de se determinar qual concentração ideal de melatonina deve ser acrescentada ao sêmen
canino para reduzir o estresse oxidativo causado pelo congelamento.
biotecnologia da reprodução, estresse oxidativo, antioxidantes.