SILENCIAMENTO GÊNICO PÓS-TRANSCRICIONAL MEDIANTE ABORDAGENS DISTINTAS VISANDO A REDUÇÃO DA PATOGENICIDADE DE COLLETOTRICHUM GRAMINICOLA
Colletotrichum graminicola, Silenciamento gênico pós transcricional, VIGS, maquinaria de silenciamento
O fungo filamentoso Colletotrichum graminicola é um fitopatógeno agente causal da doença antracnose do milho. Responsável por afetar diretamente a produção de grãos, causando perdas de até 35%. Com o aumento das demandas pelo incremento da produtividade das culturas, as ferramentas biotecnológicas como o RNA de interferência tem alcançado sucesso na proteção de cultivos contra ataque de patógenos. Diversas metodologias e abordagens têm sido desenvolvidas para alcançar eficiência no silenciamento de genes alvo. Sendo parte destas, a síntese de dsRNA/siRNA in vitro, associada a entrega à organismos alvo, vem sendo muito utilizada e apresentado resultados promissores na indução do silenciamento genico. Abordagens baseadas na engenharia genética, como VIGS (“Virus induced Gene Silencing”) e cultivos transgênicos que expressam dsRNA (“Host induced gene silencig” –HIGS) também tem sido muito empregados. Neste estudo utilizamos a entrega de dsRNA e a ferramenta VIGS para induzir o silenciamento de genes associados a síntese de quitina, as quitina sintases (CHSV e CHSVII), importante componente estrutural e sitio alvo da produção de fungicidas. E também de genes associados a síntese de melanina (phosphopantetheinyl transferases- PPTases e polyketides - PKS’s), elemento diretamente associado a patogenicidade de C.graminicola. O presente estudo teve como objetivo conferir proteção contra fitopatógeno C. graminicola mediante a aplicação de dsRNA e siRNA de genes essenciais para o metabolismo e patogenicidade do fungo. Obteve-se sucesso na proteção de plantas de milho BRS1010 mediante aplicações de dsRNA. Enquanto para o crescimento in vitro, as aplicações de siRNA se mostraram mais eficientes na alteração do fenótipo do fungo e na redução dos transcritos.