Bacillus thuringiensis E RNA INTERFERENTE COMO FERRAMENTAS DE CONTROLE DAS FORMIGAS CORTADEIRAS Atta sexdens (SAÚVA-LIMÃO)
Formigas cortadeiras. Maquinaria do RNAi. Bactéria entomopatogênica.
O setor da silvicultura vem enfrentando grandes perdas econômicas e em produtividade devido ao ataque de formigas cortadeiras do gênero Atta. Estas formigas causam danos que podem ser diretos ou indiretos, cortando grande quantidade de material vegetal para a manutenção da colônia e para alimentar seu fungo simbionte Leucoagaricus gongylophorus. Atualmente, o controle químico é o método mais utilizado dentre os disponíveis para o controle de formigas cortadeiras, entretanto, os inseticidas formicidas mais eficientes no controle pertencem a classe dos POPs (poluentes orgânicos persistentes) que podem causar riscos tanto para o meio ambiente quanto para a saúde humana. A busca por métodos alternativos ao controle químico encontra-se sob intensa pesquisa, e estas alternativas devem ser menos agressivas ao meio ambiente e também devem atender os padrões de eficiência para o controle de formigas cortadeiras. O objetivo deste trabalho foi utilizar o mecanismo de RNA interferente e a bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis (Bt) como alternativas para o controle de formigas cortadeiras Atta sexdens. Bioensaios realizados com oito cepas de Bacillus thuringiensis demonstraram que cinco cepas induziram mortalidade entre 45% a 59% nas formigas operárias forrageadoras e, após o postulado de Koch para confirmação do agente causal, verificou-se que a mortalidade foi similar ao primeiro bioensaio. Em relação às concentraçõesde B. thuringiensis, que variaram de 106 a 1010 esporos por mL, a concentração de 108 esporos por mL induziu uma maior mortalidade 61% comparada com as demais .. Nas análises de microscopia eletrônica de varredura observou-se a presença de cristais de até 2,0 µm longitudinalmente e de formatos variados, mas não foi possível verificar nenhuma correlação entre a mortalidade e o formato dos cristais. Nos bioensaios envolvendo o uso da interferência mediada por RNA, moléculas de dsRNA homólogas ao gene da V-ATPase A foram sintetizadas na bactéria Escherichia coli HT115 (DE3) e fornecidas sobre dietas às formigas forrageadoras. Duas colônias produtoras de dsV-ATPase A exibiram mortalidade de 69%, com início da mortalidade no 7° dia de avaliação. Acredita-se que as bactérias HT115 (DE3) estão sendo capazes de sintetizar dsRNA homólogo ao gene da V-ATPase A, e que este gene seja de importância vital à sobrevivência destas formigas. O presente trabalho traz informações relevantes acerca da capacidade tanto do B. thuringiensis quanto do RNA interferente de induzirem a mortalidade das formigas em bioensaios in vitro, colocando essas duas estratégias como potenciais ferramentas para auxiliar no controle de formigas cortadeiras.