Banca de DEFESA: LISSETH BIBIANA PUENTES FIGUEROA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: LISSETH BIBIANA PUENTES FIGUEROA
DATA: 16/07/2024
HORA: 14:00
LOCAL: Anfiteatro do Prédio de Coleções
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DO POTENCIAL BIOPESTICIDA DAS ENZIMAS EXTRACELULARES DE Beauveria bassiana

PALAVRAS-CHAVES:

Quitinases, Proteases, Fungo entomopatogênico, Spodoptera frugiperda, Meloidogyne incognita, Eurytrema pancreaticum e Haemonchus spp.

PÁGINAS: 130
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Bioquímica
SUBÁREA: Enzimologia
RESUMO:

Fungos entomopatogênicos têm mostrado grande potencial no controle microbiano de insetos. Durante os processos de infecção do hospedeiro, Beauveria bassiana produz diversas enzimas extracelulares hidrolíticas, incluindo proteases e quitinases. Nesse contexto, o objetivo deste projeto foi avaliar o potencial biopesticida in vitro das enzimas extracelulares (proteases e quitinases) produzidas por Beauveria bassiana contra insetos-
pragas e parasitas de animais e plantas, além da caracterização in silico das proteases produzidas pelo fungo a partir de análises filogenéticos e da predição da estrutura tridimensional (3D). A primeira etapa foi encaminhada na produção de diferentes meios de cultura para produção de proteases e quitinases utilizando como inóculo os isolados comerciais de B. bassiana: IBCB 66 e ESALQ PL63, além do isolado IP 361. A ação do extrato bruto e precipitado no controle in vitro de nematoides e trematódeos parasitas de animais e vegetais foi determinado, assim como o efeito do precipitado nas pupas de Spodoptera frugiperda. A segunda etapa foi realizada a partir do estúdio in silico das proteases de B. bassiana em relação a evolução filogenética com outros gêneros de fungos entomopatogênicos. Para atingir esse objetivo, as enzimas foram produzidas em condições de fermentação sólida e líquida, para determinar a maior atividade quitinolítica e proteolítica de isolados comerciais de B. bassiana. Os resultados demonstram que o melhor meio de cultura (‹ 0.01) para protease foi o meio sólido de arroz com soro de leite e para quitinase, o caldo SDY. Com relação à atividade nematicida do extrato bruto, o percentual de redução foi de 58% no caso dos nematoides parasitos de animais e para os parasitos de
plantas, a porcentagem foi de 19% onde houve diferença significativa com respeito ao tratamento controle. Assim mesmo, o ensaio in vitro com o extrato precipitado de B. bassiana IP 361 sobre os ovos de Eurytrema pancreaticum, teve uma redução de 47% em relação ao extrato desnaturado (p<0,01). O efeito do extrato precipitado ativo na mortalidade das pupas de S. frugiperda foi de 100% em comparação aos tratamentos
controle e não houve diferença significativa (<0,01) entre o ativo com o controle com o inseticida. As proteases precipitadas revelaram no zimograma cinco bandas com pesos moleculares de 25,6 a 66,9 kDa. A análise in silico identificou a linhagem das proteases Pr1 e Pr2 e modelou sua estrutura tridimensional. Estes resultados sugerem que as proteases e quitinases de B. bassiana podem ser úteis para o controle de doenças parasitarias e de pragas, sendo uma alternativa sustentável. 

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - TIAGO FACURY MOREIRA - UFMG (Membro)
Externo à Instituição - RAFAELA ARAÚJO GUIMARÃES - UFLA (Suplente)
Interno - KALYNKA GABRIELLA DO LIVRAMENTO (Suplente)
Externo ao Programa - GERALDO ANDRADE DE CARVALHO - DEN/ESAL (Membro)
Presidente - FILIPPE ELIAS DE FREITAS SOARES (Membro)