Nanopartículas para encapsulamento e entrega de dsRNA no controle de pragas baseado em RNA de Interferência: estudo aplicado a formigas cortadeiras.
Nanocarreadores; Biotecnologia; RNAi
Este projeto tem por objetivo o desenvolvimento de um sistema nanobiotecnológico para o controle de formigas cortadeiras, praga de grande impacto na silvicultura. Considerando que a sulfuramida e o fipronil, alternativas altamente eficazes de controle, atualmente se encontram em derrogação pois são compostos químicos com efeito acumulativo ao longo da cadeia trófica, poluentes orgânicos persistentes e possuem efeito sobre organismos não-alvo, inclusive polinizadores, propõe-se o uso da tecnologia de RNA de interferência (RNAi). Neste mecanismo, cuja elucidação foi laureada com o Prêmio Nobel de Medicina no ano de 2006, o fornecimento de sequências de RNA de dupla fita (dsRNA) complementares a um gene específico, são utilizadas para seu silenciamento pós transcricional e, a depender do gene selecionado, possibilitar o controle de um inseto praga. Além da seleção do gene, um outro obstáculo é a degradação do dsRNA por efeitos ambientais e por RNases existentes no trato digestivo dos insetos. Para proteger o dsRNA, o projeto propõe a utilização nanocarreadores compatíveis com as características das formigas cortadeiras - alternativa já validada para outras espécies de pragas agrícolas em laboratório, porém ainda inédita para formigas cortadeiras. Resultados preliminares validaram a produção do dsRNA de GFP, utilizado para validar a plataforma nanobiotecnológica por não ter complementariedade com os genes da formiga, através de expressão heteróloga em E. coli HT115 (DE3) e sua marcação com o fluoróforo Cy3, etapa crucial para avaliar o efeito protetivo das nanopartículas e a distribuição das moléculas de dsRNA pelo corpo do inseto, através de bioensaios de biodistribuição e análises por microscopia confocal.