BIOSSÍNTESE DE ARBUTINA EM BROTOS DE Origanum majorana SUPLEMENTADOS COM FONTES EXÓGENAS DE CARBOIDRATO, HIDROQUINONA E LUZ
manjerona, cultivo in vitro, biotransformação, hidroquinona
Origanum majorana L. (Lamiaceae) conhecida popularmente como manjerona, é uma erva condimentar e medicinal. A planta biossintetiza α-arbutina, um polifenol muito explorado na indústria fitocosmética em produtos para o tratamento de diversas desordens de hiperpigmentação. Apesar de haver outras fontes de produção, o cultivo de brotos in vitro pode ser uma alternativa para a sua obtenção. Objetiva-se avaliar o período de maior produção in vitro de arbutina, determinar o melhor tipo e concentração de carboidrato e avaliar o potencial dos brotos suplementados com hidroquinona na biotransformação da arbutina. Para a realização dos experimentos, explantes nodais e apicais (1,0 cm) de plantas cultivadas em casa de vegetação serão excisados para utilização nos experimentos e cultivados em meio MS sólido. Experimento 1 - Efeito da fonte e concentração de carboidrato no meio de cultura: Após obtenção de plântulas estabelecidas in vitro, será feita a repicagem para novo meio de cultura MS líquido suplementado com 1mg/L BAP e 0,5 mg/L ANA. Serão avaliadas duas fontes de carboidratos (sacarose e glicose) nas concentrações (7,5; 15,0; 30,0 e 45,0 g). As culturas ficarão sob agitação de 140 rpm sob fotoperíodo de 16/8 horas luz/escuro. Experimento 2 - Curva de Crescimento: Será construída uma curva de crescimento com a melhor fonte e concentração de carboidrato no mesmo meio de cultura. Brotos serão cultivados por 50 dias, sendo que de 10 em 10 dias, 3 frascos serão recolhidos para as avaliações experimentais. Serão avaliados 6 pontos na curva x 3 frascos, cada frasco contendo de 5 a 10 segmentos. As avaliações serão a matéria fresca e seca; determinação quantitativa da arbutina por CLAE-FR nos brotos e porcentagem do índice de crescimento. Experimento 3 - Biotransformação de hidroquinona em arbutina: Após avaliar as melhores respostas de fonte, concentração exógena de carboidrato e período de maior produção de arbutina, será avaliada a elicitação de uma dose de 144 mg/L de hidroquinona ao meio de cultura sob diferentes luzes monocromáticas. A avaliação deste experimento será o doseamento por CLAE-FR da arbutina. O delineamento experimental dos experimentos será inteiramente casualizado (DIC). As médias serão avaliadas de acordo com análise de variância ANOVA 5% e comparadas de acordo com o teste de Scott-Knott 5%.