PROSPECÇÃO DE MODULADORES ENZIMÁTICOS EM EXTRATOS DE FUNGOS ENDOFÍTICOS ISOLADOS DE CAFEEIRO
Muscodor coffeanum. Metabólitos secundários. Inibidores de proteases. Coagulação sanguínea.
Microrganismos endofíticos vivem ao menos parte do seu ciclo de vida no interior de tecidos vegetais, sem causar dano aparente ao hospedeiro. Espécies endofíticas do gênero Muscodor são relatados como endofíticos produtores de metabólitos bioativos com potencial para aplicação na indústria farmacêutica. No presente trabalho, extratos da cultura de fungos endofíticos, isolados de cafeeiro, pertencentes ao gênero Muscodor, M. coffeanum (CML 4009, CML 4010 e CML 4020) e M. yucatanensis (CML 4016), foram estudados quanto aos efeitos moduladores que exercem sobre a atividade de enzimas que atuam na hemostase. Os sobrenadantes foram obtidos após cultivo dos fungos em caldo ME (Extrato de Malte) e separação do micélio por filtração. Este, foi adicionado ao solvente acetato de etila na proporção de 1:0,5 (sobrenadante/acetato de etila) seguido de rotoevaporação para obtenção do extrato fúngico. Os extratos foram diluídos em dimetilsulfóxido P.A. 99,9% (DMSO) e utilizados para avaliar atividade fosfolipásica, coagulação sobre plasma humano citratado, trombolítica, citotóxica sobre eritrócito humanos e proteolítica utilizando a caseína como substrato. Como fonte de fosfolipases A2 e ferramenta indutora de coagulação foi utilizada peçonha de serpente da espécie Bothrops atrox nas proporções:1:0,01; 1:0,25; 1:0,5 e 1:1 (peçonha: extrato; massa:massa). Os fungos endofíticos M. coffeanum (CML 4009, CML 4010 e CML 4020) e M. yucatanensis (CML 4016) promoveram um aumento significativo no tempo de coagulação induzida pela peçonha, principalmente, quando incubados previamente com o plasma sanguíneo. A atividade de fosfolipases A2 não sofreu alterações significativas, quando avaliada após incubação das enzimas com os extratos fúngicos, sugerindo a presença de mecanismos de interação específicos entre moléculas presentes nos extratos e proteases da peçonha avaliada.