O nematoide das galhas, Meloidogyne incognita, causa grandes prejuízos a agricultura mundial. Dentre os métodos de controle desse fitopatógeno, o controle biológico com microrganismos antagonistas, como Bacillus spp. tem aumentado de forma expressiva nos últimos anos. Entretanto, os mecanismos de ação desses agentes de biocontrole contra o nematoide precisam ser melhor definidos. Desta forma, o presente estudo tem como objetivo avaliar os efeitos do produto comercial Auba^® e do seu ingrediente ativo Bacillus amyloliquefaciens isolado CN 307 sobre a quimiotaxia, colonização radicular, indução de resistência e reprodução de M. incognita em espécies vegetais de diferentes famílias botânicas. Os experimentos foram instalados em casa de vegetação e no Laboratório de Nematologia, da Universidade Federal de Lavras, Lavras, Minas Gerais, Brasil. Os tratamentos foram constituídos do produto comercial Auba^® ou de seu isolado B. amyloliquefaciens CN 307 que foram aplicadas em sementes de soja (Glycines max), cv. M 6410 IPRO, feijão (Phaseolus vulgaris), cv. 2051 e milho (Zea mays) hibrido P 3707VYH C1. No ensaio de quimiotaxia foram utilizadas placas de Petri preenchidas com meio ágar-água a 2%, onde na faixa central foram depositados 100 juvenis de segundo estádio (J2) de M. incognita. Nas extremidades da placa, sobre o meio de cultivo, foram colocadas raízes obtidas de sementes tratadas e não tratadas (controle). Decorridas 18 horas, o direcionamento dos J2 foi observado para determinação do índice de quimiotaxia (IC). Para os ensaios de colonização radicular, as sementes tratadas e não tratadas foram depositadas em placas de Petri por 5 dias para observação da presença de biofilme. O ensaio de indução de resistência foi feito utilizando a técnica das raízes separadas (split roots). Para isso, as raízes de soja e feijão foram divididas em duas partes iguais. Então, cada porção de raiz foi colocada em copos plásticos independentes. Os copos foram preenchidos com uma mistura (1:1) dos substratos (Carolina Soil^® e Tropstrato^®), sendo nomeados de lado indutor e lado respondedor. O sistema radicular do lado indutor recebeu os tratamentos e o sistema radicular do lado respondedor recebeu os 5000 ovos de M. incognita. Os copos ficaram em casa de vegetação por 60 dias. Após esse período, foram quantificados o número de galhas e ovos por grama de raiz. Para os ensaios de reprodução, os copos foram preenchidos com a mesma mistura mencionada e infestados com 5000 ovos de M. incognita. Em seguida, as sementes tratadas e não tratadas das diferentes espécies vegetais foram semeadas nos copos. Estes foram mantidos em casa de vegetação por 60 dias e então foi quantificado o número de galhas e ovos por grama de raiz.

Espécies do complexo Fusarium oxysporum (FOSC) são patógenos distribuídos em todo o mundo que causam murcha e podridão em plantas ornamentais, hortaliças, frutíferas e leguminosas de importância agrícola em regiões de clima tropical e temperado. Embora os isolados de F. oxysporum obtidos a partir de plantas com sintomas de murcha e podridão sejam agrupados em formae speciales com base na patogenicidade em relação a um hospedeiro, bioensaios e estudos de genômica evidenciam a fragilidade dessa designação e seu impacto no manejo inadequado das culturas agrícolas. Esta tese reúne cinco capítulos que investigam a etiologia e a patogenicidade de espécies do FOSC associadas a culturas relevantes no Brasil: maracujá, tabaco, feijão-comum, feijão-caupi, tomate e banana. Por meio de análises de filogenia molecular, bioensaios com inoculação cruzada e avaliação de caracteres morfológicos, foram identificadas as espécies de FOSC presentes no Brasil, e demonstrado que podem induzir sintomas típicos de murcha em diferentes hospedeiros, independente da planta da qual o isolado foi obtido. Os resultados desafiam o conceito de forma specialis, ao demonstrarem que a virulência não é específica em relação à planta hospedeira e não se relaciona com a espécie de FOSC, mas sim com a população. Este estudo contribui para o conhecimento sobre a etiologia da murcha de Fusarium no agroecossistema brasileiro, oferecendo subsídios para estratégias de manejo, diagnóstico e melhoramento genético voltados à resistência.

A crescente geração de resíduos orgânicos, como o lodo de estações de tratamento de água (lodo de ETA), demanda soluções sustentáveis de reaproveitamento, alinhadas aos princípios da economia circular. Esta tese teve como objetivo avaliar o potencial do lodo de ETA, com foco no manejo biológico da murcha de Fusarium da bananeira (Fusarium oxysporum f. sp. cubense – Foc). A abordagem incluiu uma revisão cienciométrica para caracterizar as tendências globais de uso do lodo de ETA e identificar lacunas no seu aproveitamento agrícola. Também foram conduzidos ensaios para avaliar o potencial fitotóxico do lodo em plantas bioindicadoras (alface, milho e feijão), e a influência na acumulação de metais. Foi testado o efeito inibitório do lodo de ETA sobre a germinação de macro e microconídios de Foc, bem como sua compatibilidade com diferentes agentes de biocontrole em condições in vitro.  Posteriormente, foram testadas diferentes concentrações (1% a 5%) de lodo incorporadas ao solo isoladamente e em combinação com Trichoderma asperelloides, visando induzir a supressividade do solo ao Foc e modular a comunidade microbiana da rizosfera. Os resultados mostraram que o lodo, nas concentrações de 3% e 5%, alteraram significativamente a composição microbiana do solo, aumentando a diversidade e abundância de gêneros como Bradyrhizobium spp., Candidatus spp., Paenibacillus spp., Clonostachys spp., Chaetomium spp. e Chloridium spp. Foram observadas melhorias nos atributos físico-químicos do solo (pH e condutividade elétrica), respiração microbiana, atividade enzimática  e no desenvolvimento vegetativo das plantas (altura, diâmetro do pseudocaule e índice SPAD). A combinação do lodo com T. asperelloides reduziu a diversidade microbiana em vários táxons, embora tenha favorecido gêneros funcionais como Bacillus spp. e diminuído a abundância de Fusarium spp. no solo. Apesar disso, a severidade da doença, avaliada pela área abaixo da curva do progresso da doença, permaneceu elevada. A pesquisa demonstrou que o lodo de ETA tem potencial como fonte de matéria orgânica no manejo biológico de doenças, desde que seu uso considere as condições do solo, o histórico fitossanitário e os impactos na microbiota.

Em razão da grande importância econômica da soja na economia global, torna-se essencial o estudo do desempenho de suas sementes na presença do patógeno Cercospora kikuchii, amplamente distribuído nas principais regiões produtoras dessa cultura. Considerando a escassez de informações mais precisas sobre essa associação, além da crescente relevância desse patossistema, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da presença de C. kikuchii sobre o desempenho inicial da cultura, bem como compreender os mecanismos de transmissão a partir de sementes inoculadas. Para isso, sementes de uma cultivar 96R10IPRO foram inoculadas com dois isolados de C. kikuchii (CMLAPS251 e CMLAPS255) durante períodos de 36, 72, 108 e 144 horas, originando quatro níveis de inóculo, NI36, NI72, NI108 e NI144, respectivamente. Os efeitos do patógeno sobre o desempenho das sementes foram avaliados por meio de testes de sanidade, germinação, condutividade elétrica e cultivo inicial em câmara de crescimento. A incidência de C. kikuchii nas sementes aumentou progressivamente de acordo com os níveis de inóculo, atingindo 74% para o isolado CMLAPS251 e 89% para CMLAPS255 no NI144. Para germinação, observou-se redução significativa nas médias alcançadas, com 59% para CMLAPS251 e 49% para CMLAPS255, ambos no NI144. A condutividade elétrica aumentou com a presença do patógeno, refletindo maior liberação de exsudatos pelas sementes no NI144, com médias de 160,1 µS cm⁻¹ g⁻¹ (CMLAPS251) e 151 µS cm⁻¹ g⁻¹ (CMLAPS255). As variáveis relacionadas ao desempenho inicial da cultura, como índice de velocidade de emergência, estande inicial e final, altura de plântulas, peso de parte aérea de planta fresca e seca, e índice de doença, também foram negativamente impactadas com o aumento dos níveis de inóculo. Esses efeitos foram mais pronunciados no cultivo sob temperatura de 27 °C, principalmente para o isolado CMLAPS255, que apresentou médias superiores em relação ao isolado CMLAPS251 na maioria dos testes. Além disso, verificou-se que a porcentagem de morte em pré-emergência aumentou proporcionalmente ao incremento dos níveis de inóculo nas sementes. A temperatura de cultivo de 27°C favoreceu maiores taxas de mortalidade, chegando a 42%, para o isolado CMLAPS255 com NI144, em comparação a temperatura de 23°C, que chegou a 34% no mesmo nível de inóculo. A maior taxa de transmissão total do patógeno da semente para a planta foi de 48%, observada no maior nível de inóculo (NI144) sob a temperatura de 27 °C.

Alguns fungos fitopatogênicos habitantes do solo podem sobreviver saprofíticamente ou por meio de estruturas de resistência, como os escleródios, dificultando o manejo da doença causada por esses agentes. Nesse contexto, o controle biológico tem sido amplamente estudado e utilizado, sendo o gênero Trichoderma um dos agentes mais utilizados no controle de patógenos de solo. Este estudo teve como objetivo avaliar a especificidade de Trichoderma spp. no parasitismo de escleródios de Rhizoctonia solani, Sclerotinia sclerotiorum e Agroathelia rolfsii. Foram realizados isolamentos a partir de plantas, serrapilheira e solos de diferentes regiões de Minas Gerais. A análise por BOX-PCR revelou que os 98 isolados estavam distribuídos em 58 grupos, sendo 58,51% compostos por grupos com mais de um isolado e 41,4% por grupos de um único isolado. Desses, 20 isolados foram selecionados para identificação molecular, e 10 deles foram avaliados quanto ao potencial de controle. Foi identificada uma possível nova espécie de Trichoderma. Em ensaio in vivo, 4 isolados de T. pseudoasperelloides apresentaram os melhores e piores desempenhos: CC32 e CB56 promoveram maior desenvolvimento de raíz e da parte aérea, respectivamente, sendo que CB56 também reduziu em 65% a incidência da doença em relação ao controle. Por outro lado, os isolados CC108 e ES28 apresentaram menor comprimento de raiz e parte aérea, com destaque para CC108, cujo índice de doença foi apenas 5% inferior ao controle. No teste de parasitismo de escleródios, o isolado R14 (T. zelobreve) destacou-se por parasitar simultaneamente os três fitopatógenos, com 80%, 100% e 30% de parasitismo e 60%, 42,5% e 52,5% de inviabilização dos escleródios de R. solani, S. sclerotiorum e A. rolfsii, respectivamente. Os resultados indicam variações no potencial de controle entre os isolados de T. pseudoasperelloides, reforçando a necessidade de estudos complementares para confirmar sua eficácia e selecionar os candidatos mais promissores para uso no controle biológico.

Nos últimos anos, os produtos biológicos têm ganhado destaque, principalmente por proporcionarem menor impacto ambiental no controle de doenças. Entre os agentes de biocontrole disponíveis no mercado, as bactérias do gênero Bacillus se destacam por seus diversos mecanismos de ação, podendo ser utilizadas no manejo de resistência a doenças em várias culturas. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de inibição de produtos comerciais, à base de bactérias do gênero Bacillus sobre o estabelecimento das raças 65 e 73 de C. lindemuthianum, causador da antracnose no feijão-comum. Para isso, foram realizados quatro testes de triagem em laboratório com o propósito de selecionar produtos com potencial fungicida: teste de metabólitos voláteis e líquidos, pareamento e inibição de germinação. Em seguida, os produtos selecionados foram testados em casa de vegetação, em 15 tratamentos com cinco repetições no delineamento de blocos casualizados (DBC), utilizando o inóculo misto das raças, em três cultivares de feijão-comum com diferentes níveis de suscetibilidade ao patógeno. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5 % de probabilidade, por meio do programa estatístico R-Studio. Os resultados obtidos demonstraram o potencial de inibição in vitro das raças 65 e 73 de C. lindemuthianum, por produtos biológicos à base de Bacillus, apresentando resultados superiores ou semelhantes ao fungicida químico fox xpro, O produto bombardeiro demonstrou maior desempenho de inibição para ambas as raças, com valores de inibição de até 63.11% para a raça 65 e 76.54% para a raça 73. Constatou-se que são necessários mais estudos relacionados a eficiência destes agentes de biocontrole em condições in vivo contra o agente causal da antracnose em feijão-comum.

A doença conhecida como “raiz rosada” do alho e da cebola causa prejuízos consideráveis nessas culturas, principalmente em área de cultivo contínuo. Essa doença provavelmente é uma síndrome cuja etiologia ainda é pouco compreendida e os agentes etiológicos persistem no solo como saprófitos, dificultando o seu manejo. Sintomas de coloração rosada das raízes progridem para a podridão do sistema radicular, levando à clorose da parte aérea, comprometem o desenvolvimento da planta e reduz o rendimento de produção. O principal agente etiológico da doença é conhecido como Setophoma terrestris, porém, a associação de Fusarium oxysporum com plantas com sintomas típicos da doença já foi documentada em plantas de cebola. O objetivo desse estudo foi esclarecer a etiologia da raiz rosada do alho no Brasil e documentar sintomas característicos. Fragmentos dos genes nrSSU e nrLSU foram utilizados na análise filogenética de isolados de Setophoma enquanto fragmentos dos genes TEF e RPB2 foram utilizados na análise filogenética de isolados de Fusarium oxysporum. O teste de patogenicidade foi realizado em casa de vegetação com isolados representantes de S. terrestris e F. oxysporum. A inoculação foi feita de forma individual e em conjunto dos isolados via imersão de sementes em suspensão de esporos e por substrato infestado. As avaliações realizadas permitiram diferenciar os sintomas causados por Setophoma terrestris e Fusarium oxyporum. O sintoma de raiz rosada não é causado por Fusarium oxysporum, mas esse patógeno causa necroses nas raízes de alho.

Os plantios clonais de eucalipto no Brasil apresentaram nos últimos anos, um grande crescimento para novas regiões propicias a ocorrência de diferentes espécies de Calonectria, destacando-se como um dos grandes causadores de prejuízos nas florestas de eucalipto. Os objetivos deste trabalho foram identificar qual a espécie do gênero Calonectria relacionado aos sintomas de mancha-foliar e desfolha, em três plantios clonais de eucalipto no noroeste da Bahia e provar a patogenicidade dos isolados identificados. As amostras foram coletadas em agosto de 2023 e, posteriormente, o fungo foi isolado no Laboratório de Patologia Florestal da UFLA. Posteriormente, foi realizada ade extração de DNA, amplificação e sequenciamento de quatro regiões genômicas. As análises filogenéticas das regiões genéticas cmdA, his3, tef1 e tub2 confirmaram que os isolados pertencem ao complexo Calonectria cylindrospora. Os testes de patogenicidade confirmaram a que os isolados foram patogênicos três diferentes clones de eucalipto. A combinação de análises filogenéticas e morfológicas mostrou-se eficaz na identificação de C. variabilis. Os resultados obtidos contribuem para o entendimento da diversidade e impacto das espécies do gênero Calonectria em plantios clonais de Eucalyptus sp. no Brasil, oferecendo informações valiosas para programas de melhoramento genético e manejo de doenças florestais.

RESUMO:

O Brasil é o maior produtor de café do mundo tendo produzido 2.993.780 t em 1.836.741 ha, no ano de 2021. A produção vem oscilando nos últimos anos, em função de diversos problemas fitossanitários como nematoide de galhas Meloidogyne paranaensis. O microbioma de um solo supressivo atua diretamente contra infecções de patógenos radiculares. Os diversos herbicidas que são utilizados no cultivo do cafeeiro podem impactar a microbiota nativa do solo. Deste modo, o objetivo da dissertação foi avaliar o potencial efeito de cinco herbicidas na funcionalidade do microbiana de um solo proveniente de uma área com café em relação ao nematoide formador de galhas Meloidogyne paranaensis. O solo foi coletado  de uma Agrofloresta de café sem historico de aplicação de herbicidas. Os herbicidas foram Saflufenacil 100g/ha; Pyroxasulfone 400ml/ha; Glifosato 3kg/ha; Flumioxazin  180ml/ha e Cletodim 0,9l/ha. As mudas foram inoculadas com 4000 ovos de Meloidogyne paranaensis e após 35 dias as plantas de tomate foram coletadas e contados o número de galhas, g-1, e ovos, g-1. Outro experimento para avaliar a quimiotaxia de Meloidogyne paranaensis em resposta a exposição do microbioma do solo aos herbicidas. Além disso, relaizou-se o isolamento e quantificação de bacterias totais, endosporogenicas e fungos totais provenientes do solo em diferentes tempos de exposição aos herbicidas ( 0 dias, 1 dia, 5 dias, 15 dias e 35 dias). O DNA total do solo foi extraido ao fim do experimento in-vivo and the bacterial community was evaluated. No experimento in-vivo verificamos que Saflufenacil e Pyroxasulfone aumentaram significativamente o número de ovos e galhas (P < 0.05) em comparação ao controle. Já o Glifosato, Cletodim e Flumioxazin não reduziram a supressividade do solo, não houve diferença estatística entre estes tratamentos e o controle inoculado. No experimento de quimiotaxia o microbioma exposto ao Glifosato foi repelente ao nematoide assim como o tratamento controle. Já o microbioma exposto ao Saflufenacil e Pyroxasulfone foi altamente atrativo ao J2 e diferenciaram do controle. Apenas Flumioxazin afetou a comunidade de fungos 15 dias após aplicação.  O Saflufenacil reduziu a comunidade de bactérias totais 5 e 15 dias após aplicação, porém em 35 dias observou-se um aumento significativo em comparação ao controle. Clethodim, Piroxasulfona, Saflufenacil e Glifosato começaram a inibir as bactérias endosporogênicas 1 dia após a exposição.  A análise de microbioma revelou a modulação do microbioma quando exposto aos diferentes herbicidas. Pela alfa diversidade, foi possível observar que a diversidade bacteriana foi menor no tratamento controle e maior nos solos expostos aos herbicidas. Proteobacteria, Bacteriodetes, Actinobacteria, Acidobacteria and Gemmatimonadetes foram os filos mais predominantes no solo. Ressalta-se a importância de entender o impacto dos herbicidas no microbioma supressivo a doenças radiculares.

O Brasil é o maior produtor mundial de soja, Apesar da alta produção, essa fabácea sofre com perdas de até 90% devido a Ferrugem Asiática da Soja (FAS). Dentre as formas de manejo da FAS destaca-se o controle químico com o uso da mistura de moléculas de triazóis com estrobilurinas, chamadas “Strobimix”, porém, é necessário conhecer os mecanismos de sua sistemicidade. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a translocação de triazóis e estrobilurinas via raiz, sua sistemicidade nos terços superior e inferior de folíolos, pulverizados somente na região central e quantificar os níveis da enzima fenilalanina amônia-liase (PAL), compostos fenólicos solúveis totais e lignina solúvel de plantas de soja inoculadas com ferrugem antes e após a aplicação desses fungicidas. Em todos os ensaios foram utilizadas sementes de soja da cultivar Olimpo IPRO® e avaliados um princípio ativo do grupo dos triazóis e estrobilurinas. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, composto por seis tratamentos e quatro repetições. No ensaio (I), foi utilizada a solução nutritiva de Hoagland e Arnon (1950) com duas plantas em cada vaso. Foram empregadas 4 doses dos fungicidas, quais sejam 15, 25, 50 e 100% da dose de bula, sendo 100% a dose de bula do ingrediente ativo (ia) A cada três dias foram feitas avaliações de severidade em todos os trifólios, com a escala diagramática de Franceschi et al. (2020), totalizando dez avaliações. Os valores de severidade foram integralizados em Área Abaixo da Curva de Progresso da Doença (AACPD), segundo a equação proposta por Shaner &amp; Finney (1977). A eficiência de controle foi calculada com a equação de Abbott (1925). Ao final do experimento foi obtido o peso da parte aérea (PPAS) e das raizes secas (PRS) de todas as plantas. No segundo ensaio, a aplicação dos fungicidas foi realizada na face adaxial das folhas do terço médio do folíolo central do 3° trifólio, no estádio V4, sem possibilidade de escorrimento, para averiguar a sistemicidade para os terços superior (acropetal) e inferior (basipetal) . Após os primeiros sinais do patógeno, foram feitas avaliações de severidade no trifólio central a cada três dias, com a escala diagramática usada no ensaio anterior, totalizando seis avaliações. Os folíolos centrais foram coletados e escaneados no software ImageJ® v. 1.54g; (III). No terceiro ensaio, foram utilizadas cinco plantas para coleta em cinco tempos para análise bioquímica. Os fungicidas foram aplicados no estádio fenológico V4, em toda a planta, em ambas as superfícies da folha, com os mesmos IA’s e as mesmas doses do ensaio II. Em todos os ensaios, as plantas foram inoculadas com suspensão de 1,0 x 10 5 urediniósporos de Phakopsora pachyrhizi/mL em água + tween 2 0 a 0,05% sete dias após a aplicação dos produtos. As análises estatísticas foram realizadas no software R Studio em teste de Scott-Knott (p&amp;lt;0,05). No ensaio I, a menor fitotoxidez foi observada para as estrobilurinas, na menor dose, ou seja, a de 15% da dose de campo. Sendo assim, o patógeno foi inoculado cinco dias após os IA’s serem adicionados em solução nutritiva. Nessa dose, todos os fungicidas apresentaram sistemicidade a partir das raízes e reduziram a severidade da doença (p&amp;lt;0,05). No ensaio II, quando avaliada a translocação por meio da redução da intensidade da doença, observou-se eficiência de controle em todos os tratamentos. As estrobilurinas apresentaram sistemicidade nas duas direções, tanto acropetal quanto basipetal, porém o triazol também obteve essa eficiência. Antes de tranlocar via xilema, esse produto também transloca via mesostêmica, possibilitando o controle também de forma baispetal. No ensaio III, houve picos das atividades da enzima PAL às 24 horas e 72 horas após a inoculação. Para os compostos fenólicos solúveis totais houve alteração apenas às 72 horas após a inoculação.

Eucalyptus é um dos gêneros de plantas mais cultivados do mundo. Estima-se que a área plantada com Eucalyptus spp. supere 20 milhões de hectares estabelecidos, principalmente, devido à grande diversidade dessas espécies, adequação para diferentes climas e solos, taxas de crescimento rápido e utilização para múltiplos produtos como madeira, celulose, forragem, biocombustíveis, óleo essencial e produtos químicos bioativos. A produtividade desses plantios tem sido limitada pela ocorrência de alguns fitopatógenos, uma vez que, as principais áreas plantadas comercialmente no Brasil estão em locais úmidos e quentes, com clima ideal para o surgimento de doenças fúngicas, como, por exemplo, a mancha de folhas e desfolha causada por Calonectria spp. uma das doenças mais importantes do eucalipto em regiões tropicais. Atualmente, 45 espécies de Calonectria ocorrem no Brasil, sendo 14 destas associadas ao eucalipto, destacando-se a espécie C. pteridis com maior predominância a campo nos estados do Pará e Maranhão. O patógeno causa desfolha intensa nas plantas durante períodos chuvosos, reduzindo drasticamente a profundidade de copa. O controle desta enfermidade se dá mediante o plantio de genótipos resistentes. Portanto, o presente trabalho tem por objetivo avaliar o nível de resistência de 380 clones de Eucalyptus spp. quanto à desfolha e mancha foliar causadas por Calonectria spp. utilizando técnicas estatísticas multivariadas para a seleção e avaliação. No primeiro estudo, foi utilizado dois métodos hierárquicos distintos: Método de Pares-Grupos Não Ponderados Utilizando Médias Aritméticas (UPGMA) e Otimização de Tocher para seleção dos clones. Os resultados obtidos oferecem subsídios importantes para programas de melhoramento, com essas informações poderão ser instalados novos testes para seleção de clones para diferentes locais de ocorrência do patógeno. O segundo estudo teve como objetivo sequenciar três genomas de espécies de Calonectria encontradas no Brasil pelo método Illumina com o intuito de facilitar pesquisas futuras sobre taxonomia, genética/diversidade populacional e genes associados à patogenicidade. Ambos os estudos demonstram a importância que este patógeno tem sobre a cultura do eucalipto, o conhecimento do genoma fornece subsídios para detecção de genes relacionados a patogenecidade, que consequentemente podem ser aplicados ao programas de seleção de clones resistentes.

Agricultural crop quality and productivity can be severely affected by the occurrence of plant diseases. Two of the important soybean diseases are sudden death syndrome and red root rot. The causal agents of those diseases varies but they are all members of the Fusarium solani species complex (FSSC), a diverse group with important pathogenic species to several crops. The objectives of this work were: (i) to define through molecular phylogeny the FSSC species associated with soybean in Brazil, (ii) to confirm their pathogenicity to soybean and (iii) to evaluate if there are differences in disease symptomatology induced by the species. Samples were obtained from different soybean producing areas of 5 Brazilian states. The phylogenetic analysis was performed using the second largest subunit of RNA polymerase (RPB2) and the intergenic region of anonymous loci 44 (L44) gene fragments. Pathogenicity tests were conducted in greenhouse conditions using one representative isolate for each species and the disease evaluation was performed 35 days after the inoculation. We obtained a collection of 36 isolates from all the major soybean producing regions of Brazil. With the molecular phylogeny analysis, we defined five distinct species within the FSSC. All inoculated isolates were pathogenic to soybean plants and were able to induce the typical interveinal foliar chlorosis and necrosis and also root rot symptoms. However, there were no statistical difference among them. This result confirms the diversity of SDS causal agents in Brazil which should raise the attention of the community to expand their research of SDS genetic resistance and disease control focusing on the interaction of soybean with the different F. solani species present in Brazil.

A mancha aureolada do cafeeiro, causada pela bactéria Pseudomonas coronafaciens pv. garcae (Pcg), tem provocado sérios danos às plantações em várias regiões do Brasil. Os produtores têm usado intensivamente cúpricos e o antibiótico casugamicina, o que pode levar à pressão de seleção bacteriana. Esse cenário destaca a necessidade de opções de manejo alternativas, como o uso de nanopartículas (NPs), que têm demonstrado excelentes resultados devido às suas propriedades físicas e químicas. Este estudo objetivou avaliar o efeito de diferentes NPs - AlO, B, CeO2, CuO, S, MgF2, MnO2, SiO2, Ag, TiO2 e ZnO - na inibição do crescimento bacteriano in vitro de Pcg em doses variadas (0, 50, 100, 250 e 500 mg L -1 ); comparar os efeitos das NPs mais eficazes in vitro com Kasumin®, Recop®, Biobac® e óleo essencial de Melaleuca no controle da mancha aureolada e na indução de respostas de defesa em mudas de cafeeiro; testar a eficácia de NPs de cobre sintetizadas com método químico e verde, tanto in vitro quanto em casa de vegetação. Para o primeiro objetivo, o experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado (DIC) com doze tratamentos, incluindo onze NPs e o Kasumin®, com quatro repetições e duas placas de Petri por repetição. As NPs foram diluídas em meio de cultura King B em cinco doses, e uma diluiçãqo seriada da suspensão bacteriana (A600 = 0,2; 1 x 108 UFC mL-1 ) foi adicionada. A análise de variância foi realizada em esquema fatorial 11 x 5, mais um tratamento adicional, e o número de unidades formadoras de colônias (UFC mL-1 ) foi quantificado utilizando o software ‘APS Assess’. Para o segundo objetivo, o experimento foi conduzido em delineamento de blocos casualizados (DBC) com oito tratamentos (Ag, ZnO e CuO NPs, Kasumin®, Recop®, Biobac® e óleo essencial de Melaleuca), com cinco repetições e quinze mudas por unidade experimental. Foram usadas mudas da cv. Catuaí Vermelho 144, inoculadas com suspensão bacteriana (A600 = 0,4; 1 x 108 UFC mL-1 ) dez dias após a aplicação dos tratamentos. Avaliaram-se a incidência e severidade da doença, teor de clorofila, análises bioquímicas, além das características morfológicas e nutricionais das plantas. Para o terceiro objetivo, foram utilizados dois protocolos para síntese química das NPs, o CuAc2.2H2O e o CuSO4·5H2O. A síntese verde utilizou CuSO4·5H2O e extrato de Moringa oleifera (MO). As NPs foram caracterizadas, depois avaliou-se MIC, MBC e as propriedades anti-biofilme. Em mudas Catuaí Vermelho 144, foram avaliados os efeitos na redução da incidência e severidade da doença. O experimento foi conduzido em DBC com cinco tratamentos (três NPs de cobre sintetizadas, CuO NP, e extrato de MO) nas doses de 0, 250, 500, 1000 e 2000 mg L -1 , com quatro repetições, além do Recop como adicional. Os resultados indicaram que as NPs de ZnO apresentaram 100% de inibição do crescimento bacteriano nas doses de 250 e 500 mg L -1 , e as NPs de Ag mostraram uma redução de 94% na dose de 500 mg L -1 . No segundo experimento, as NPs de CuO demonstraram a maior redução na AACPD com 63,67%. Além disso, houve aumento na atividade das enzimas PAL, PPO e GLU quando as mudas foram tratadas com NPs de CuO e ZnO. No terceiro experimento, a CuMO NP apresentou os menores valores de MIC (62,5 mg L - 1) e MBC (125 mg L -1 ), além da maior redução na AACPI e AACPS da doença, com 60% e 74,3%, respectivamente, em relação ao controle.

O Brasil é o maior produtor e exportador mundial de café, com destaque
para o estado de Minas Gerais. A espécie mais cultivada é a Coffea arabica
(alotetraploide), oriunda do cruzamento natural entre duas espécies diploides, Coffea
canephora e Coffea eugenioides. A produção de café movimenta a economia brasileira,
entretanto, além de outros patógenos, os fitonematoides geram perdas significativas e
uma vez presentes no solo sua erradicação é praticamente impossível. Uma maneira de
encontrar alternativas para o controle de doenças é a compreensão dos mecanismos
vegetais para ativação da defesa. Sabe-se as plantas reconhecem padrões moleculares
associados a patógenos (PAMPs- Pathogen-associated molecular pattern). Esses
PAMPs são reconhecidos por receptores de reconhecimento de padrões (PRRs- pattern-
recognition receptors), gerando uma cascata de sinalizações até a ativação da imunidade
desencadeada por PAMP (PTI – PAMP Triggered immunity). Dessa forma, a
identificação de PRRs para NAMPs (nematode-associated molecular patterns) seus
correceptores, além de proteínas chaves para a resposta do tipo PTI, são importantes
para buscar estratégias de controle contra nematoides. Diante disso, objetivou-se
identificar e caracterizar o PRR NILR1, específico para nematoide, seu correceptor
BAK1 e os genes/proteínas chaves da explosão oxidativa, as RBOHs, nos genomas de
C. arabica, C. canephora e C. eugenioides. Além disso, desenhar primers específicos
para esses genes em C. arabica. Para isso, foram realizadas análises de comparação de
sequências (BLASTp) utilizando como base proteínas de referência descritas em
Arabidopsis thaliana, análises filogenéticas, incluindo proteínas ortólogas descritas em
outras espécies de plantas, caracterização de domínios proteicos, localização subcelular,
distribuição cromossômica e caracterização dos genes, além do desenho de primers.
Após as análises BLASTp e filogenética, foram identificadas duas sequências
candidatas a NILR1 em C. arabica, cada uma delas oriunda de um subgenoma. Já para
as espécies diploides apenas um NILR1 foi selecionado. Para BAK1, três sequências
foram selecionadas em C. arabica, sendo uma delas isoforma. Assim como para
NILR1, as proteínas BAK1 são codificadas por genes oriundos de cada um dos
subgenomas. Para as espécies diploides apenas uma sequência foi selecionada. Quando
se analisou as RBOHs, observou-se que C. arabica apresenta nove proteínas desta
família, sendo uma delas isoforma. Duas RBOHs não apresentaram correspondentes nos
dois subgenomas, indicando perca de dois membros desta família para esta espécie. Já
C. canephora e C. eugenioides apresentam cinco proteínas candidatas cada. Observou-
se que as sequências mais próximas de AtRBOHD e AtRBOHF, caracterizados como
mais atuantes na explosão oxidativa contra fitopatógenos, são anotadas como RBOHC e
RBOHA nos genomas de café, respectivamente. As sequências selecionadas como
candidatas a NILR1, BAK1 e RBOHs apresentam domínios característicos das
proteínas de referência, indicando que possivelmente exercem as mesmas funções.
Além disso, todas elas foram preditas por atuarem na membrana plasmáticas. Os
primers desenhados são específicos para as sequências alvos, o que dar suporte para
estudos moleculares, a exemplo da análise de expressão gênica, o que pode contribuir
substancialmente para compreender o papel destas proteínas chaves da PTI para

interação café-nematoide. Em suma, os resultados encontrados podem dar suporte a
estratégia biotecnológicas para o controle de fitonematoides no café.

Atrelado à abrangência de cultivo do cafeeiro, está a ocorrência de diversas espécies de Ceratocystis. Muitas dessas espécies têm potencial destrutivo suficiente para inviabilizar, ao menos economicamente, o cultivo do cafeeiro. Dessa forma, o presente trabalho objetivou comparar a eficiência com e sem ferimentos de métodos de inoculação de C. manginecans, na expressão de sintomas em mudas de cultivares de café arábica. Utilizou-se delineamento em blocos ao acaso, com quatro repetições, em esquema fatorial duplo 4 x 4, com um tratamento adicional. O fator A corresponde aos métodos de inoculação (aspersão de suspensão de esporos, deposição de gota de suspensão de esporos  e inserção de disco micelial (com ferimento) e aspersão de suspensão de esporos (sem ferimento)), e o fator B as cultivares de café arábica (Catuaí Vermelho IAC 144, Catuaí Vermelho IAC 99, Catucaí Amarelo 24/137 e Mundo Novo IAC 379/19). O tratamento adicional, constitui-se da cultivar IAC 144 com a deposição de 500 μL de água destilada esterilizada. Cada tratamento foi composto de quatro mudas de cafeeiro, com um ano de idade. Nos métodos de inoculação com ferimento, realizou-se uma incisão longitudinal de 1 cm no caule da planta, a 4 cm acima da área do coleto, utilizando-se estilete esterilizado. No método de deposição de gota, utilizando-se uma pipeta automática, aplicou-se 500 μL de suspensão de esporos (2,5 x 10⁶ esporos/mL^-1), no local da incisão. No método por aspersão de suspensão de esporos, utilizando-se pulverizador de alta pressão, aplicou-se 500 μL de suspensão de esporos (2,5 x 10⁶ esporos/mL^-1). No método de inserção de disco micelial, utilizou-se discos de 3 mm de diâmetro. No procedimento de inoculação de aspersão de suspensão de esporos (sem ferimento), aplicou-se 500 μL de suspensão de esporos (2,5 x 10⁶ esporos/mL^-1), sobre o (caule e folhas). A severidade da doença foi calculada dividindo-se o comprimento da lesão nos tecidos internos do caule (cm) pela altura da planta (cm) e multiplicando-se por 100. As variáveis analisadas em cada experimento foram submetidas aos testes de Shapiro Wilk e Bartlett (p>0,05) para verificar os pressupostos da análise de variância. Como os pressupostos foram atendidos, os dados foram submetidos à análise de variância (Teste F p≤0,05) e quando significativo, as variáveis qualitativas foram comparadas por Teste de Scott-Knott (p<0,05) e por contraste ortogonal com o tratamento adicional. Realizou-se a análise conjunta dos experimentos repetidos no tempo para verificar se havia diferença entre os mesmos. As análises estatísticas foram realizadas no software R v. 4.2.2. Não houve diferença significativa entre os experimentos repetidos no tempo para as variáveis analisadas (p<0,05). Houve interação significativa (p<0,001) entre os métodos de inoculação e cultivares de café arábica quando avaliado a porcentagem de severidade. Observou-se a menor porcentagem de severidade da doença na cultivar Mundo Novo IAC 379/19. Concomitantemente os maiores parâmetros de altura, diâmetro do caule, número de folhas e peso de planta seca foram observados na respectiva cultivar. Portanto, os métodos de inoculação com ferimento são eficientes para expressão de sintomas nas cultivares de café arábica avaliadas.

O café arábica está amplamente cultivado no mundo, atrelado a sua abrangência de cultivo, está a ocorrência de uma série de fitopatógenos emergentes do gênero Ceratocystis, com potencial destrutivo suficiente para inviabilizar, ao menos economicamente, o cultivo do cafeeiro. Desta forma, o presente estudo buscou comparar a eficiência de métodos artificias de inoculação de Ceratocystis manginecans na expressão de sintomas em cultivares de café arábica. Utilizou-se delineamento em blocos ao acaso, em esquema fatorial duplo 4 x 4, onde, o fator A correspondeu aos métodos de inoculação (deposição de gota de suspensão de esporos, inserção de disco micelial, aspersão de suspensão de esporos (com ferimento) e aspersão de suspensão de esporos (sem ferimento)) e o fator B as cultivares de café arábica  (Catuaí Vermelho IAC 144, Catuaí Vermelho IAC 99, Catucaí Amarelo 24/137 e Mundo Novo IAC 379/19). Cada tratamento foi composto por quatro repetições, sendo cada repetição constituída de quatro mudas, de um ano de idade, cultivadas em sacos de polietileno, com substrato de terra, esterco bovino e areia (2:1:1). No procedimento de inoculação com ferimento, realizou-se uma incisão longitudinal de 1 cm no caule da planta, a 3 cm acima da área do coleto, utilizando-se estilete esterilizado. Posteriormente, no local da incisão, utilizando-se pipeta automática, aplicou-se 500 μL de suspensão de esporos (2,5 x 106 esporos/mL-1). No procedimento de inoculação por aspersão de suspensão de esporos (2,5 x 106 esporos/mL-1), utilizou-se pulverizador de alta pressão. No método de inserção de disco micelial, utilizou-se disco micelial de 3 mm de diâmetro, provenientes dos bordos de placas de Petri, mantidas em câmara de crescimento, do tipo BOD, a 25 ± 1 °C, sob fotoperíodo alternado de 12 horas, durante 20 dias. No procedimento de inoculação de aspersão de suspensão de esporos (sem ferimento), aplicou-se 500 μL de suspensão de esporos (2,5 x 106 esporos/mL-1), sobre o (caule e folhas). No tratamento testemunha, aplicou-se 500 μL água destilada esterilizada no lugar da suspensão de inóculo. Após 30 dias em casa de vegetação, o caule de cada planta foi seccionado verticalmente e o comprimento da descoloração do xilema acima e abaixo do ponto de inoculação foram medidos. A severidade da doença foi calculado dividindo-se o comprimento da lesão nos tecidos internos do caule (cm) pela altura da planta (cm) e multiplicando-se por 100. Os experimentos foram realizados duas vezes sob as mesmas condições. Observou-se a formação de sintomas em todas as cultivares avaliadas. Os sintomas iniciaram-se após 20 dias do procedimento de inoculação. Observou-se inicialmente o amarelecimento de folhas, seguindo-se de murcha e seca de plantas. Em cortes transversais na planta, verificou-se a descoloração da parte interna de ramos, os sintomas progridem até a morte da região afetada. Utilizando-se a metodologia de isca biológica de cenoura, a espécie C. manginecans foi consistentemente isolada dos tecidos utilizados como iscas. Portanto, todas as cultivares de café arábica avaliadas, apresentaram suscetibilidade a ocorrência de C. manginecans

O milheto granífero é uma planta bem adaptada a regiões áridas e semiáridas por ser uma planta rústica, com resistência à seca e tolerância a solos com baixa fertilidade. A cultura destina-se tanto à alimentação animal como humana, e é frequentemente utilizada como cobertura no sistema plantio direto brasileiro. Entre os fungos que podem causar doença na cultura, ocorrem espécies do gênero Fusarium, que podem não somente comprometer o rendimento da cultura, mas também constituir risco para a segurança por meio da produção de micotoxinas. A literatura primária sobre a associação milheto – Fusarium é escassa, ao passo que ocorreu considerável expansão da cultura no Brasil em tempo recente. Nesse estudo, foi investigado quais espécies do complexo Fusarium fujikuroi FFSC podem ser encontradas em associação ao colmo de milheto granífero no Brasil e quais induzem sintomas de doença. Em uma coleção de 18 isolados com características morfológicas de Fusarium fujikuroi, obtidos de colmos sintomáticos, provenientes de diferentes regiões produtoras, foram avaliados marcadores morfológicos, e realizadas uma análise de filogenia molecular de sequências da região gênica tef1 e testes de patogenicidade. Foi possível identificar seis diferentes espécies do FFSC. Todas as espécies induzem podridão do colmo no milheto quando inoculadas em plantas jovens. Os resultados obtidos apontam sobre a possibilidade que várias gramíneas servirem como fonte de inóculo de patógenos de importantes culturas. A partir do conhecimento obtido é possível identificar e monitorar os agentes etiológicos, desenvolver estratégias para mitigar o possível dano e contribuir para o manejo fitossanitário. Será possível, ainda, subsidiar programas de melhoramento que visam a seleção de híbridos resistentes.

Beneficial microbes play crucial role in modern agriculture, serving as biopesticides, biostimulants/biofertilizers, and mitigating abiotic stress in crops. Their multifaceted functions contribute significantly to crop health and sustainability, aligning with the principles of regenerative agriculture by minimizing carbon footprints and reducing dependence on agrichemical inputs. The concept of ‘microbial consortia’, involving the combination of multiple fungal and bacterial species or strains, has gained recognition for its potential advantages over single species/strains applications. This method aims to employ a spectrum of ecological functions, encouraging biological equilibrium within agricultural systems. Recent research highlights how microbial consortia can directly and indirectly enhance plant health, through various mechanisms and interactions with their host plants. This review presents examples demonstrating the efficacy of microbial consortia as biopesticides and biostimulants/biofertilizers. These consortia exhibit potential in managing plant diseases and pests, while also promoting plant growth and mitigating specific abiotic and biotic stresses in crops. This review examines real-world examples considering instances of success and failure, discusses methodologies employed for evaluating interactions, and also addresses challenges in the selection, production, and application of optimal microbial consortia for agricultural use providing valuable insights in the current and future prospects of microbial consortia in modern agriculture.

Corynespora cassiicola is the causal agent of target spots in cotton and soybeans and can be transmitted via seeds. This work was carried out to evaluate the relationship between C. cassiicola and cotton and soybean seeds, focusing on the transmission of these organisms from seed to plant and the effects resulting from this interaction. Two isolates of C. cassiicola were used to determine the transmission rate and assess the effects of the pathogens on the performance of cotton and soybean seeds/seedlings. Inoculation was carried out using the water conditioning method on the seeds of one cotton cultivar and one soybean cultivar, and their resistance or susceptibility to the pathogen in question was not reported. For cotton, the seeds were kept in the fungal colonies for periods of 36, 72, 108, and 144 hours, equivalent to the pathogen inoculum levels established for this study, with denominations: NI36, NI72, NI108, and NI144 respectively. In the case of soybean seeds, the seeds were in physical contact with the fungal colony for 36, 72, and 108 hours, equivalent to inoculum levels: NI36, NI72, and NI108, and a chemical treatment of the seeds with the product (Metalaxyl-M + Fludioxonil) was added to the experiment at the two inoculum levels: NI72 and NI108. The experiments were carried out in plant growth chambers at temperatures of 20 °C and 25 °C, and the effects were evaluated daily. The total transmission rate of each pathogen was calculated by adding up the pre-emergence death rate and the transmission rates with symptomatic and asymptomatic infection. The total transmission rates of C. cassiicola were directly proportional to the increase in inoculum levels, for both isolates and cultivation temperatures. About the physiological effects, germination and vigor (emergence speed index), initial and final stand, height and weight of fresh and dry plants, electrical conductivity and disease/damage index were evaluated, as well as the health test on seeds inoculated at the same inoculum levels used to evaluate pathogen transmission rates. It was observed that, for the two crops under study, the higher the level of initial inoculum in the seeds, the greater the negative effects on the quality of the inoculated seeds and the plants that came from them. Plants from seeds with NI144 inoculum level for cotton and NI108 for soybeans had the lowest values of ESI, plant stands, weights, and heights. The seed quality tests showed that the higher the inoculum levels, the lower the percentages of normal seedlings and germination, with the highest percentages of pathogen incidence in the seeds. Infected seeds also showed advanced degradation by electrical conductivity analysis. In evaluations of soybean seed performance, when chemically treated and untreated seeds were compared, seed treatment proved to be effective in reducing the level of inoculum and consequently produced better results. The use of the conventional PCR technique showed that asymptomatic plants carry the pathogen, which can manifest itself during the crop cycle.

A produção de uvas (Vitis vinifera) para a elaboração de vinhos finos na região do Sul de Minas Gerais têm se tornado relevante nos últimos anos. A adesão de produtores ao plantio dessa cultura tem aumentado a cada ano na região e consequentemente a demanda por mudas de qualidade segue o mesmo padrão. Para os produtores de mudas, alguns fatores tem limitado a produção como a baixa taxa de enraizamento das mudas nos viveiros. Nesse sentido, apesar das pesquisas com a cultura da videira nessa etapa do sistema produtivo ainda serem escassas, a utilização de microrganismos com ações benéficas têm demonstrado resultados positivos em diversos outros sistemas de cultivo similares à videira. Bactérias do gênero Bacillus spp. estão entre os microrganismos mais utilizados na agricultura atualmente, sendo bastante estudados e usados como base para bioprodutos. Esses microrganismos são encontrados naturalmente em solos e associados à rizosfera de plantas. O objetivo desse trabalho foi selecionar isolados de Bacillus spp. de solos rizosféricos e “Bulk soil” capazes de auxiliar na emissão primária de raízes e no pegamento das mudas de videira (Vitis vinifera). Os isolados foram obtidos através de amostras de solos coletados próximas às raízes e da região da rizosfera de mudas de videira. Foram realizados screenings para selecionar os isolados mais promissores. Estacas de porta-enxerto IAC572 foram mergulhadas por 24h em suspensões bacterianas preparadas previamente com cada isolado. Posteriormente as estacas inoculadas foram plantadas em recipientes plásticos, com uma mistura de areia e substrato, e mantidas sob condições controladas em casa de vegetação. Como controle positivo foi utilizado hormônio vegetal (ácido 1-naftaleno- acético – ANA) e negativo apenas água estéril. As avaliações consistiram em análisesquantitativas de pegamento, massa seca de raíz e parte aérea, comprimento do ramo e taxa de clorofila. Os isolados mais promissores seguiram para testes in vitro de solubilização de nutrientes (P, K) e hidrolisação de proteínas (caseína). Nenhum isolado selecionado nos experimentos in vivo foi capaz de solubilizar P (FePO4) e K. A maioria dos isolados que alcançaram resultados promissores nos testes in vivo foram capazes de hidrolisar caseína, liberando nitrogênio. Os isolados que se destacaram nas principais variáveis observadas foram SY01, SY30 e INV, obtendo índices de pegamento semelhantes ao hormônio. Os resultados desse trabalho disponibilizam mais uma ferramenta promissora para a produção de mudas de videira. Além disso, a utilização desse tipo de ferramenta contribui com a sustentabilidade do processo, aumentando o leque de alternativas no mercado. Por fim, é necessário realizar mais estudos, a fim de investigar os mecanismos genéticos utilizados por esses isolados e se suas combinações, ou até mesmo a utilização em conjunto com o hormônio vegetal (ANA), pode incrementar o pegamento das mudas nos viveiros.

FWheat blast, caused by Pyricularia oryzae pathotype Triticum (PoTl), is one of the most important and devastating fungal diseases affecting wheat crops in South America, Southeast Asia, Southern Africa and now in Germany and in central Europe. In Brazil, PoTl populations have been associated with resistance to three different chemical groups, including quinone outside inhibitor fungicides (QoIs), demethylation inhibitor fungicides (DMIs), and succinate dehydrogenase inhibitors fungicides (SDHIs). In the first chapter, we discuss a review of the mechanisms underlying fungicide resistance in crop pathogens, with a specific emphasis on point mutations and non-target site mechanisms associated with different fungicide classes. With the increasing use of fungicides in agriculture, the rapid emergence and evolution of fungicide resistance have become a critical issue, posing significant challenges to sustainable crop production. Our review sheds light on non-synonymous mutations in the target genes of fungicides, target gene overexpression, and efflux pump upregulation, and how these mechanisms affect the QoI fungicides, methyl-benzimidazole (MBCs), DMI and SDHI fungicides. In the second chapter, we present the result of that QoI-R PoTl isolate maintaining an adaptive advantage in disease severity on leaves and heads over time. For the QoI-R PoTl isolate, the nonlinear logistic model exhibits a better fit to the progress curves of wheat blast over the course of five successive infection cycles. In the third chapter, the results of this study demonstrate that the QoI-R PoTl isolate maintains higher fitness and competitive advantages over time. Based on molecular studies, the G143A mutation was found in 100% of the QoI-resistant isolates, indicating that the G143A mutation of the QoI-R PoTl isolates remains stable. These findings can have significant implications for the integrated management of the wheat blast pathosystem since fitness advantages stability can contribute to fixing and increasing the proportion of resistant isolates in field populations of the pathogen. Hence, resistant genotypes of the PoTl populations with fitness advantages may prevail on wheat fields, even after successive infection cycles in the absence of selection pressure, and QoIs may lose their efficacy permanently. We discuss the ecological importance of populations of pathogens that have evolutionary advantages, higher fitness, and resistance to QoIs stable. We hope our results can help insights into the integrated management of wheat blast in Brazilian wheat fields.

Com o objetivo em desenvolver uma plataforma de alerta de incidência da ferrugem do cafeeiro, com 15 dias de antecedência, validar e regionalizar modelos de regressão linear múltipla a partir de variáveis meteorológicas. Foram validados os modelos desenvolvidos por Pinto et al. 2002 em cinco municípios. Experimentos foram
implantados no delineamento experimental em blocos casualizados com cinco tratamentos e cinco repetições. A parcela experimental teve seis linhas com 20 plantas cada, totalizando 120 plantas, foram descartadas duas linhas de cada lado, sendo 20 plantas centrais a área útil. As avaliações da incidência da ferrugem do cafeeiro, foram
realizadas quinzenalmente. A partir das informações coletadas nas estações automáticas foram ajustados modelos de regressão linear múltiplos (MRLM) para cinco municípios. As variáveis meteorológicas foram defasadas em relação às datas de avaliação da doença. Após o ajuste de modelos, dois modelos foram selecionados e, calculados nos cinco municípios, posteriormente expandidos para mais 10 municípios e, paralelamente a expansão dos modelos foram incluídas 35 propriedades para a validação. O resultado mostrou os modelos 15-30 dias anteriores à incidência ajustado para Carmo do Rio Claro e Nova Resende promissores. Esses modelos foram os melhores para prever a doença com 15 dias de antecedência.

A mancha foliar de Ramularia (MFR), causada por Ramulariopsis pseudoglycines, é uma das doenças que acometem o algodoeiro no Brasil. A doença é amplamente disseminada na região produtora de algodão brasileira. O objetivo deste estudo é identificar o estágio crítico na folha do algodoeiro em que a doença se desenvolve pelo uso de diferentes técnicas de microscopia. A caracterização histopatológica comparativa está entre os estudos realizados na avaliação de cultivares resistentes a doenças. Três cultivares de algodão com diferentes níveis de resistência, IMA 5801 (altamente resistente) (I), DP1746 (alta susceptibilidade) (D), TMG44 (moderadamente resistente) (T) e dois isolados de R. pseudoglicynes (FAL F3 (A) e FAL FICC (B)) foram utilizadas neste estudo. Técnicas de microscopia (Microscopia de Luz) (LM) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) foram utilizadas para caracterizar a interação de R. pseudoglycines com tecidos foliares de genótipos de algodoeiro com diferentes níveis de resistência a MFR. Usando delineamento de blocos completamente casualizados, um total de 60 vasos de plástico foram usados no cultivo das três cultivares de algodão. Para o teste de severidade foram utilizados 30 (trinta) potes plásticos com plantas de algodão das três cultivares. Os outros 30 foram usados para as análises microscópicas. As plantas foram inoculadas com os isolados após trinta dias de germinação em casa de vegetação. A planta inoculada foi então transferida para câmara de crescimento e mantidas no escuro para realização do experimento sob temperatura de 25 a 30^oC e umidade relativa de 100% por 24 horas sendo depois  colocadas em regime de 12 horas de luz. Os dados da severidade foram submetidos à análise pelo programa R para determinação da Área Abaixo da Curva de Progresso da Doença (AACPD). As amostras para análises microscópicas foram coletadas às 12, 24, 48, 72 e 96 horas após a inoculação (hai). A análise histopatológica mostrou maior acúmulo de compostos fenólicos na cultivar IMA 5801 (altamente resistente), seguida das cultivares TMG44 (moderadamente resistente) e DP1746 (alta suscetibilidade). Na análise em MEV, observou-se alta taxa de germinação e infecção no início do processo infeccioso da cultivar DP1746 (alta suscetibilidade), enquanto para as demais cultivares com maiores níveis de resistência, alta taxa de conídios não germinados foi observada em fases avançadas do processo infeccioso. A maior AACPD foi observada na cultivar DP1746 inoculada com o isolado B, e as demais cultivares, tanto inoculadas com o isolado A, quanto B não diferiram estatisticamente.

Entre as frutas, a uva é destaque mundial quanto a sua comercialização, importância social e produção, superando 79 milhões de toneladas (FAOSTAT, 2022). Além do consumo in natura, pode ser utilizada para produzir vinhos, bebidas destiladas, passas, sucos, óleos e processados para uso farmacêutico (OLIVEIRA et al., 2017). O Brasil detém 1,8% da produção mundial de uvas com 1,59 milhões de toneladas (FAOSTAT, 2022). Essa produção está concentrada nas regiões Sul (60,5 %) e Nordeste (17%) do país, representando a principal atividade agrícola na geração de empregos por área cultivada (LEÃO e POSSÍDIO, 2000; ARRUDA et al., 2021). No Nordeste, especificamente no vale do rio São Francisco, representa uma das principais fontes de empregabilidade e sustentabilidade social. O crescimento sustentável e a competitividade da viticultura brasileira nas atuais e potenciais zonas de produção dependem do uso de cultivares adaptadas, cuja produção atenda a demanda do mercado. Entretanto, as doenças da videira constituem fator limitante para cultivar novas áreas e para manter a produção atual no campo. Algumas dessas doenças, causadas por fungos, bactérias, vírus e nematoides, são responsáveis por perdas de aproximadamente 85% da produção (ANGELOTTI et al., 2017). Dentre as doenças, as de etiologia fúngica são as de maior importância para a cultura da uva, destacando-se o oídio (Erysiphe necator Schw), o míldio (Plasmopara vitícola (Berk. & Curt) Berl. & Toni), as podridões de cachos (Glomerella cingulata (Stonem) Spauld e Schrenk), (Botrytis cinérea Pers. Fr.), a antracnose (Elsinoe ampelina (de Bary) Shear) e a ferrugem (Phakopsora euvitis Ono) (LIMA et al., 2009). O oídio da videira (Erysiphe necator Schw) é considerada uma das mais relevantes à cultura, devido aos danos ocasionarem perdas de até 100% da produção, devido à seca de inflorescências, bagas, brotações e folhas (ALMANÇA; LERIN; CAVALCANTI, 2015; ANGELOTTI et al., 2017). Segundo Almança, Lerin e Cavalcanti (2015), no Brasil, as regiões produtoras de uvas estão inseridas em locais onde as condições de ambiente são favoráveis ao oídio. Porém, no Nordeste, a severidade da doença é intensificada, devido ao período seco prolongado, com baixa umidade relativa do ar, na maioria dos meses do ano, favorecendo o patógeno (LIMA et al., 2009). Essas condições se intensificam ainda mais na região do Vale do São Francisco, localizado no sertão pernambucano, próprio ao crescimento vegetativo das plantas de videira, tornando-o contínuo, não paralisando a atividade fotossintética. Essa região situa-se entre 9 e 10º de latitude sul, sendo a mais próxima do equador em todo o mundo. Além disso, é caracterizado por clima tropical semiárido, com médias de precipitação anual de 505 mm, umidade relativa de 60,7% e temperatura de 26,7°C (RIZZZON; MANFROI, 2006; SANTOS et al., 2007). Sendo assim, devido a importância do patossistema videira/oídio nessas condições edafoclimáticas torna-se necessário o melhor entendimento sobre sua epidemiologia e danos causados. Para isso é fundamental elaborar, planejar, implementar e avaliar estratégias de manejo, de modo a verificar a eficácia e aceitação das medidas de controle recomendadas (FERNANDES et al., 2006). Tanto no mercado interno, quanto do agronegócio globalizado, a sociedade solicita o emprego de métodos de controle de doenças e pragas de maneira a interferir o menos possível no ambiente e de forma a manter a cultura, a estabilidade social e a financeira dos envolvidos na produção agrícola. Atualmente, os métodos mais utilizados no controle do oídio são o genético, o químico e o cultural (PRAJONGJAI et al., 2014; TOFFOLATTI et al., 2016). No manejo de alta produtividade, o os fungicidas são utilizados como medida de controle (NEFIT, 2019). Entretanto, o emprego dessas moléculas de forma contínua favorece a seleção de raças, estirpes ou isolados resistentes. Além disso, o mercado global solicita cada vez mais o emprego desses produtos baseado em monitoramento de condições favoráveis e do nível de controle no campo, integrado com novos métodos de controle, para aumentar a segurança alimentar e reduzir os resíduos de fungicidas de acordo com os novos limites de resíduos solicitados por países importadores. Sendo assim, os métodos culturais compõem boa opção para complementar o controle químico, entre eles está a nutrição equilibrada dos nutrientes minerais, por influenciarem a anatomia e a composição química das células vegetais, as quais podem aumentar ou reduzir a resistência das plantas aos patógenos bem como constituir barreiras de resistência horizontais, físicas e/ou químicas (PÉREZ et al., 2020; PÉREZ et al., 2019; DORNELAS et al., 2015; PINHEIRO et al., 2011). Existem relatos na literatura sobre o uso da adubação com macro e micronutrientes reduzindo a intensidade de doenças em diversas culturas, entre elas, a cultura do milho (CARVALHO et al., 2013), do café (PÉREZ et al., 2020; CATARINO et al., 2016; GARCIA JÚNIOR et al., 2003; POZZA et al., 2001), da soja (PINHEIRO et al., 2011) e do feijão (GONTIJO NETO et al., 2016). De outro lado, BALDWIN (1966) e GIOVANINI (2008) observaram plantas de videira menos suscetíveis ao míldio e cancro bacteriano por apresentarem boa nutrição com N, P, K, Ca e Mg, embora não tenham estudado especificamente o efeito da nutrição mineral no controle dessas doenças. Recentemente a literatura tem descrito a aplicação de nanopartículas (NPs) como inovação na nutrição mineral, bem como alternativa de métodos ambientalmente corretos e sustentáveis fornecendo benefícios aos órgãos de plantas por proporcionar maior eficácia no controle de patógenos. Algumas características descritas para essas novas fontes são a alta relação superfície/volume reduzindo as doses necessárias de nutrientes, além de aumentar a expressão de compostos de defesa do hospedeiro (AUFFAN et al., 2009; SURYAVANSHI et al., 2017; SUN et al., 2018). Estudos com algumas NPs de elementos essenciais ou não, em diversos patossistemas, demonstraram eficácia no manejo de diversos patógenos, entre elas o Cu (ELMER e WHITE, 2016; SERVIN et al., 2015; GIANNOUSI et al., 2013; WANG et al., 2012), o Si (SURIYAPRABHA et al., 2014), o Mn (ELMER e WHITE, 2016) e o Zn (GRAHAM et al., 2016). Diante do exposto, o objetivo desse estudo foi avaliar NPs de óxidos metálicos e metaloides de micronutrientes em ensaios in vitro e in vivo para o patossistema de Erysiphe necator.

Os fungos causadores de murchas vasculares como as espécies do complexo Fusarium oxysporum e os fitonematoides causadores de galhas radiculares Meloidogyne spp. estão entre os patógenos de importância à agricultura brasileira e mundial. Esses patógenos causam significativa redução na produtividade da maioria das culturas agrícolas de importância econômica ou de subsistência. Em condições de altas populações na área de cultivo podem acarretar o abandono da atividade agrícola. A incorporação de resíduos orgânicos no solo apresenta vários efeitos benéficos em longo prazo. Dentre esses efeitos incluem: sequestro de carbono, incremento da população microbiana, capacidade de retenção de água, redução da densidade do solo, maior oferta de nutrientes, maior quantidade de nitrogênio orgânico, e menor taxa de degradação e lixiviação de nitrogênio. Os resíduos orgânicos podem atuar sobre patógenos diretamente por meio da liberação de compostos tóxicos produzidos durante a decomposição, e/ou indiretamente pelo estímulo de populações de microrganismos antagonistas do solo e indução de resistência sistêmica nas plantas. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a eficiência do resíduo da larva de Tenebrio molitor sobre sobre Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici raça 3 e Meloidogyne incognita raça 1. Avaliou-se a fitotoxicidade do resíduo em condições controladas na produção de mudas de tomateiro e seu efeito na promoção de crescimento de plantas. O efeito do extrato aquoso foi avaliado in vitro sobre o crescimento micelial e a germinação de microconídios de Fol 3, e sobre a eclosão, mobilidade e mortalidade de J2 de M. incognita. Também, avaliou-se o efeito in vitro de compostos voláteis emitidos pelo resíduo sobre o crescimento micelial de Fol 3, e sobre a eclosão, mobilidade e mortalidade de J2 de M. incognita. A supressividade do resíduo foi avaliada sobre Fol 3 em condições controladas e sobre M. incognita em condições de campo, em tomateiro. Não houve toxicidade às mudas de tomateiro quando se incorporou o resíduo ao solo por 20 dias. Nesse período o peso das plantas foi diretamente proporcional com as concentrações crescentes do resíduo. A menor concentração do extrato aquoso (10%) reduziu em 84,32% a germinação de microconídios de Fol 3 após 6 horas de incubação. O crescimento micelial do fungo foi incrementado com as concentrações crescentes do extrato aquoso. A mobilidade de J2 de M. incognita foi reduzida em 93,0% com a menor concentração do extrato (10%) após 24 horas de incubação. A concentração de 10% do extrato apresentou eficiência de 79,8% sobre a mortalidade de J2 após 96 horas de incubação. A eclosão de J2 foi reduzida em 86,3% com a concentração de 10% do extrato após 10 dias de incubação. Sobre os compostos voláteis emitidos pelo resíduo, a menor concentração (1%) reduziu o crescimento micelial de Fol 3 em 18,2% após 5 dias de exposição. A mobilidade de J2 foi reduzida em 90,9% com a concentração de 1% do resíduo após 24 horas de exposição. Na concentração de 1% do resíduo houve efeito nematicida sobre os J2 de 85,5% após 48 horas de exposição. A eclosão de J2 foi reduzida em 97,3% com a concentração de 1% do resíduo após 10 dias de exposição. Sobre a avaliação de supressividade em condições controladas, a concentração de 5% do resíduo reduziu em 17,8% a severidade externa da murcha-de-fusarium no tomateiro, representada pela área abaixo da curva de progresso da doença (AUDPC). Houve incremento sobre a fotossíntese (69,3%), a eficiência do uso da água (252,3%) e a biomassa aérea e radicular (328,5%) com a concentração de 5% do resíduo. Na avaliação de supressividade em condições de campo, a maior redução da população de J2 do fitonematoide no solo (87,6%) foi apresentada pela concentração de 5% do resíduo. Houve maior redução de galhas (24,0%) e de ovos + J2 (57,0%) no sistema radicular do tomateiro utilizando a concentração de 5% do resíduo. Observou-se incremento de biomassa aérea e radicular com as concentrações crescentes do resíduo, com redução dos danos fisiológicos desencadeados pelo fitonematoide. A produtividade do tomateiro foi incrementada em até 136,1% com a concentração de 5% do resíduo. Este é o primeiro estudo relacionando o resíduo da larva e T. molitor e seu efeito supressivo a fitopatógenos, Fol 3 e M. incognita. A incorporação e incubação do resíduo ao solo disponibiliza maior quantidade de nutrientes disponíveis às plantas, promovendo seu crescimento e desenvolvimento, sem ocasionar fitotoxidez. Além disso, o resíduo contém uma microbiota que pode desempenhar vários papéis ecológicos para o crescimento de plantas quando está é incorporada ao solo, como a produção de sideróforos, do fitohormônio auxina e a fixação de nitrogênio. No resíduo, também é encontrado a quitina, importante polímero que desempenha várias funções na agricultura. Oligômeros de quitina provenientes da degradação enzimática da quitina pelos microrganismos possivelmente estão contidos no extrato aquoso do resíduo. Esses oligômeros e outros compostos tóxicos, voláteis ou não, estão envolvidos na redução da mobilidade, aumento da mortalidade e redução da eclosão de J2 de M. incognita, além da redução do crescimento micelial e da germinação de microconídios de Fol 3. Combinações de vários mecanismos provavelmente estão envolvidos na supressividade aos patógenos pelo resíduo da larva de T. molitor.

Bactérias endofíticas são microrganismos que vivem nos tecidos internos das plantas sem causar sintomas aparentes de doença. Essas bactérias podem ser isoladas de sementes, raízes, folhas e frutos de diversas espécies de plantas. Em geral, elas têm origem na rizosfera ou filosfera, bem como nas sementes, podendo ainda, penetrar na planta por ferimentos e aberturas naturais. Diversos benefícios são gerados por essas bactérias, incluindo a promoção de crescimento das plantas, a supressão de fitopatógenos e o aumento da resistência a doenças. A mandioca é uma cultura de grande importância para a agricultura brasileira e mundial, entretanto, o seu cultivo vem enfrentando graves problemas com doenças, como a bacteriose (Xanthomonas axonopodis pv. manihotis) e a podridão radicular (Lasiodiplodia spp., Neoscytalidium sp., Phytopythium sp. e Fusarium sp.). Nesse sentido, objetivou-se com o presente trabalho, isolar, caracterizar e selecionar bactérias endofíticas de raízes de mandioca para o controle biológico da bacteriose e da podridão radicular. Verificou-se que os isolados de bactérias endofíticas selecionados apresentaram potencial como agentes de controle biológico e podem representar um componente importante no manejo integrado de doenças e no crescimento de plantas da mandioca.

O manejo do nematoide das lesões radiculares na soja (Glycine max), Pratylenchus brachyurus, é baseado na integração de fatores culturais, químicos e biológicos, sendo o manejo cultural e o controle biológico considerados ferramentas indispensáveis no manejo deste fitonematoide. Na primeira parte deste estudo é apresentada uma revisão de literatura abordando o patossistema do P. brachyurus-soja (), bem como as principais práticas de manejo. Além disso, faz-se uma abordagem de agentes de biocontrole, com ênfase no gênero Bacillus e os possíveis benefícios da adoção desse agente de controle biológico dentro do manejo integrado de nematóides em campo. Na segunda parte do estudo foi realizado um levantamento da qualidade dos produtos que estavam sendo produzidos por fermentação on farm em diferentes regiões do estado do Mato Grosso, durante o período de 2ª safra  de 2019/20 e safra 2020/21, totalizando 125 amostras coletadas. Essas amostras foram utilizadas para quantificação de células bacterianas endosporogênicas e para avaliar o desempenho deste fermentados na redução da penetração do P. brachyurus em raízes da soja. Foi feita análise do microbioma entre as amostras dos melhores produtos comerciais, onix e nemacontrol, sendo obtidos fermentações de diferentes realidades. Para o sequenciamento foi utilizado a região 16S rRNA utilizando os primers 515F e 806R com o sistema Ion OneTouch™ 2. Foi obtida a alfa diversidade e beta-diversidade microbiana das amostras avaliadas. Em um segundo momento, foi feita a validação das condições de fermentação e eficiência em campo de cinco ensaios realizados junto aos produtores em áreas com histórico de perdas pelo nematoide das lesões radiculares. Para as células endosporogênicas, apenas 3 produtos se mantiveram com quantificação satisfatória (10⁸ UFC mL^-1), tanto no produto comercial, quanto no fermentado, sendo que todos eles apresentavam Bacillus amyloliquefaciens como base. Dentre as variáveis analisadas para o teste de eficiência, apenas a penetração de nematóides nas raízes apresentou diferença entre as amostras, com destaque para 4 produtos distintos. Observou-se que a utilização de produtos resultantes da fermentação on farm em condições otimizadas pode permitir a redução de nematóides. A análise microbiana revelou abundância relativa foi de 100% nas amostras comerciais, enquanto as fermentadas tiveram uma grande variação na sua composição de gêneros de diferentes bactérias, sem nenhum padrão entre elas. Pela alfa diversidade, foi possível observar separação entre composição de produtos comerciais e on farm. Enquanto a beta diversidade mostrou um agrupamento entre as amostras fermentadas e entre as comerciais. Vemos a importância de entender a composição e eficiência do sistema de fermentação, sendo o on farm uma ferramenta para aumentar a produtividade, e as áreas devem ser manejadas com foco na integração do controle biológico com outras práticas de manejo.

O cultivo da pitaia, fruta pertencente ao gênero Selenicereus sp, tem aumentado ininterruptamente nos últimos anos, devido às suas propriedades nutracêuticas e organolépticas. Além disso, tem se mostrado bastante rentável para os pequenos produtores no Brasil. Entretanto, devido à sua recente introdução no país, são raros os estudos envolvendo a ocorrência e controle das doenças e pragas, sendo a maioria deles focando nos seus compostos bioquímicos e bioativos. Entre as doenças, as viroses se destacam pela ausência de métodos de controle curativos e por serem subnotificadas, pois os sintomas podem ser confundidos com distúrbios nutricionais. Como a propagação vegetativa predomina na cultura da pitaia e o seu cultivo envolve diversas operações manuais, a disseminação dos vírus é bastante favorecida, de modo que plantas com suspeita de viroses têm sido frequentemente relatadas pelos produtores. Neste trabalho foram coletadas e analisadas 212 amostra de cladódios com sintomas suspeitos de viroses, com a finalidade de se fazer a diagnose e a caracterização biológica e molecular dos vírus encontrados. Além disso, foi feito um levantamento em lavouras comerciais de cinco municípios localizados no sul de minas para determinar a incidência e a distribuição espacial de plantas com suspeita de viroses, empregando-se os modelos Run, Doublet e o índice de dispersão. Quando o extrato das plantas infectadas foi inoculado em plantas de Chenopodium quinoa e C. amaranticolor, estas reagiram com sintomas de lesões cloróticas e necróticas. Entre as 212 amostras coletadas, 181 encontravam-se infectadas com uma ou mais das seguintes espécies de Potexvirus: Cactus virus (CVX); Pitaya virus X (PiVX); Zygocactus virus X (ZyVX) e Schlumbergera virus X (SchVX), em infecções simples e mistas com dois a quatro espécies de vírus na mesma amostra. Na análise da capa proteica dos vírus, os isolados de CVX apresentaram dois grupos distintos, sendo que um deles apresentou uma deleção de 9 nucleotídeos na região inicial do gene CP, na posição 42 a 50, na direção 5’→3’. No levantamento realizado a maioria dos pomares apresentou um padrão agregado para Run e Doublet, enquanto que no índice de dispersão prevaleceu o padrão regular. Este foi o primeiro trabalho mais abrangente envolvendo a detecção e identificação de viroses em pitaia, bem como a incidência e distribuição espacial em lavouras comerciais de pitaia.

O café destaca-se como importante ‘commodity’ produzida no país. Sendo o Brasil o maior produtor e exportador mundial. Porém está sujeito a várias doenças capazes de reduzir a sua produtividade. Entre elas, as causadas por patógenos necrotróficos. Destacando-se os fungos do gênero Colletotrichum spp, Phoma e Cercospora. No seu controle, podem ser empregadas variedades resistentes, todavia cultivadas proporcionalmente em pequena área, mas com incremento de plantio nos últimos anos. Emprega-se também princípios de controle cultural, químico e biológico. Entre os fungicidas, os mais empregados no campo, são a mistura de Triazóis com Estrobilurinas. No entanto, testes laboratoriais são essenciais para estudar doses dos fungicidas capazes de reduzir o crescimento micelial ou a germinação dos patógenos. Assim, o objetivo do presente estudo é determinar, ‘in vitro’, a dose-resposta de fungicidas inibidores da demetilação (DMI), da quinona oxidase (QoI) e da succinato desidrogenase na inibição de crescimento micelial dos fungos Cercospora coffeicola, Phoma tarda e Colletotrichum gloeosporioides e avaliar, em casa de vegetação, o incremento fisiológico das plantas do cafeeiro mediante a aplicação dos fungicidas. Foram avaliados oito princípios ativos do grupo das Estrobilurinas, Triazóis, Carboxamidas e Anilida nas concentrações de 5,0, 25,0, 50,0 e 100,0 mg. L - ¹ na inibição micelial dos fungos em estudo. A avaliação foi realizada mensurando-se o diâmetro das colônias de forma perpendicular, até o fungo atingir a borda da placa. Foi calculado o índice de velocidade de crescimento micelial (IVCM) para obter a dose resposta. Os efeitos fisiológicos dos fungicidas usados para controlar patógenos necrotróficos do cafeeiro em mudas foi implantado em casa de vegetação. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, compostos por sete tratamentos, a testemunha, Difenoconazol + Pydiflumetofen, Azoxistrobina + Difenoconazol, Boscalida, Trifloxistrobina + Tebuconazol, Azoxistrobina + Tebuconazol e Piraclostrobina + Fluxapiroxade e cinco repetições. Foram realizadas as avaliações de altura, diâmetro, área foliar, teor de clorofila, peso seco, fenóis totais, teores de lignina e camada de cera das plantas, incidência e severidade da doença, área abaixo da curva de progresso da doença, a eficácia e crescimento em relação à testemunha. Para Colletotrichum gloeosporioides os tratamentos com os fungicidas, exceto Cantus e Orkestra, foram eficientes no controle ‘in vitro’ do crescimento micelial em relação à testemunha. Para Phoma tarda todos os fungicidas inibiram o índice de velocidade de crescimento micelial. Para Cercospora coffeicola os tratamentos com fungicidas, exceto Cantus, foram eficientes no controle do crescimento micelial em relação à testemunha. Na avaliação dos efeitos morfológicos e fisiológicos dos fungicidas em mudas, os maiores pesos da parte aérea seca das mudas foram do Priori top e Orkestra. Os tratamentos Miravis Duo, Priori top e Orkestra apresentaram menores diâmetros e maiores áreas foliares. Na análise de compostos fenólicos totais, o tratamento com Miravis Duo apresentou resultados superiores nas avaliações após 72 horas e 30 dias da segunda aplicação. O tratamento Miravis Duo aumentou a quantidade de lignina. Em todos os fungicidas foi observada presença de camada de cera e não foram observados sintomas de fitotoxidez.

A doença do topo em leque da bananeira é a doença viral mais devastadora das bananas em todo o mundo e é causada pelo Banana bunchy top virus (BBTV). Esse vírus já foi encontrado em 36 países ao redor do mundo e no momento se encontra ausente na América Central e América do Sul. Com base na sequência do DNA-R  os isolados de BBTV que ocorrem ao redor do mundo foram classificados em dois grupos: o grupo do Oceano Pacífico Índico (PIO) e o do Sudoeste Asiático (SEA). Esses dados auxiliam a inferir sobre a origem geográfica dos isolados, embasando medidas preventivas de controle. Em 2016, o vírus foi detectado pela primeira vez no perímetro irrigado do distrito Chókwè, localizado na primeira zona na região sul de Moçambique, mas não
existe nenhum estudo para determinar a sua incidência e as suas características genéticas. O objetivo deste estudo foi realizar inicialmente um levantamento para determinar a incidência e distribuição dos isolados e determinar as suas caracteristicas genômicas. Uma amostragem foi feita nessa região afetada, coletando-se 175 amostras de plantas com suspeita de infecção em 23 campos de 11 fazendas  comerciais e de famílias rurais nos quatro postos administrativos do distrito. Os resultados do levantamento indicaram que o vírus estava presente em 19 das 23 fazendas amostradas. A porcentagem média de incidência foi de 54,3% com uma porcentagem mínima de 20% na fazenda 9 e um máximo de 100% na fazenda 2. Na fazenda 6 não foram encontradas amostras infectadas.As sequencias de nucleotídeos do DNA-S dos isolados analisados se mostraram bastante conservadas, variando de 97% a 100%. O mesmo foi observado para as sequências do DNA-R que apresentaram a grande maioria das identidades variando entre 98% e 100% entre os isolados de Chókwè, e acima de 90% quando comparadas com os isolados do GenBank. A análise filogenética mostrou que
esses isolados se comportaram como isolados PIO, apresentando maior proximidade com o isolado JQ820453 do Malawi em relação aos isolados dos países subsaarianos, que se agruparam num subclado distinto. Esse é o primeiro relato de estudos realizados a respeito da incidência e caractristicas moleculares dos isola dos de Banana bunchy top virus em Moçambique e alerta para a necessidade de se tomar medidas urgentes para o
controle do BBTV neste país.

O Brasil é o maior produtor mundial de cana-de-açúcar. Entre as doenças fúngicas que podem trazer prejuízos no setor canavieiro, observa-se a podridão vermelha, que tem como principal agente causal Colletotrichum falcatum, um ascomiceto que induz uma podridão avermelhada no colmo. A infecção resulta também na perda da qualidade e quantidade de açúcares por uma inversão da sacarose e redução do açúcar total recuperável (ATR). Outra doença, conhecida como ‘’pokkah boeng’’, é induzida por espécies do complexo Fusarium fujikuroi. Resultados publicados recentemente evidenciam que C. falcatum e espécies de Fusarium estão associadas a plantas com sintomas da podridão vermelha e que os sintomas, às vezes, podem se sobrepor aos da pokkah boeng. Os objetivos desse trabalho são (i.) esclarecer quais espécies de Colletotrichum e Fusarium causam podridão vermelha em cana-de-açúcar; (ii.) se as espécies de Fusarium causam sintomas de vermelhidão na nervura central de folhas de cana-de-açúcar; e (iii.) estudar a interação entre espécies dos dois gêneros na indução de sintomas da podridão vermelha e pokkah boeng. Foi coletado material vegetal sintomático de diversas regiões canavieiras e os isolados obtidos foram caracterizados por meio de avaliação de seus marcadores morfológicos, análises de filogenia molecular utilizando os genes barcode TEF, ITS, ACT e GAPGH e testes de patogenicidade na variedade de cana-de-açúcar RB867515. Este é o primeiro relato no Brasil das espécies F. madaense, F. sacchari e F. verticillioides ocorrendo em folhas com sintomas de podridão vermelha. Nas análises filogenéticas foram identificadas uma nova espécie de Fusarium e de Colletotrichum ocorrendo na cana-de-açúcar. Colmos inoculados com F. sacchari, C. falcatum e a combinação de ambos desenvolveram sintomas mais severos. Quando inoculados em folhas, F. madaense e C. falcatum induziram sintomas mais extensos na nervura central. Essas informações permitirão a elucidação dos agentes etiológicos da doença podridão vermelha, a formulação de estratégias de manejo, como a correta recomendação de produtos biológicos e fungicidas, garantindo a sustentabilidade, alta produtividade e qualidade do produto, visando promover a maximização do lucro do setor canavieiro do país, principalmente devido a mudança no procedimento de colheita da cultura.

Simplicillium lanosoniveum é um microrganismo considerado de multiação, com efeito parasítico em ferrugens, atividade antibacteriana, antifúngica, antivirais, além do controle de doenças de plantas. Para que haja viabilidade de produção é essencial obter um elevado número de propágulos. A busca por meios de cultura alternativos na fermentação líquida, bem como métodos de produção, é uma necessidade para viabilizar o seu uso em larga escala. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo otimizar o processo produtivo de propágulos Simplicillium lanosoniveum através da composição nutricional na fermentação líquida submersa e validar o potencial dos propágulos produzidos no controle do vetor de fitoviroses Bemisia tabaci. Para avaliar o efeito da relação C:N e o tempo ideal da fermentação em função do tempo na produção de propágulos de Simplicillium foi utilizado o meio basal proposto por (JACKSON et al., 1997), com diferentes proporções C:N (50:1; 30:1 e 10:1), glicose mono-hidratada e o extrato de levedura como respectivas fontes, os quais foram avaliados (48; 72; 96 horas após inoculação). A inoculação foi realizada de pré-cultura na concentração de 1x107 c.mL-1 no meio, com pH inicial ajustado para 6.0. Para avaliar a influência da aeração o isolado foi ajustado na concentração de 5 x 107 c.mL-1, em volumes finais diferentes (100 mL e 60 ml) e a partir desta etapa durante todo o experimento toda a produção foram avaliadas no 3º dia e contabilizados a produção de conídios submersos, microescleródios, (UFC) e biomassa. Diferentes fontes de nitrogênio foram avaliadas (extrato de levedura; o farelo de algodão; farelo de milho; levedura autolizada; Hy-Yest 101®; Hy-Yest 412®; Star-yest; Brewer’s Exl e levedura hidrolisada) e glicose mono-hidratada como principal fonte de carbono. Após seleção das fontes, foram avaliados o efeito das fontes de carbono (glicose mono-hidratada; maltodextrina; melaço de cana; sorbitol; maltose e sacarose). O efeito do pH inicial e densidade de pré-cultura foram avaliados, para o pH inicial foram ajustados para 3.5; 6.0; 8.5, com pré-cultura ajustada para 5 x 107 c.mL-1. Para densidade de pré-cultura o pH foi ajustado para 6.0 seguidos da adição da suspensão nas concentrações iniciais de 1x104; 1x105; 1x106 e contabilizados. O isolado de Simplicillium lanosoniveum foi submetido a analises de solubilização de fosfato e degradação de quitina via meio solido e avaliado a formação de halo na presença das atividades avaliadas. Após a seleção dos melhores meios foi avaliado a cinética de crescimento dos propágulos produzidos e medição do pH durante 6 dias.  A eficiência dos propágulos de Simplicillium lanosoniveum produzidos em fermentação foram testadas no controle de ninfas 2º instar de mosca branca, criada em feijão (Phaseolus vulgaris, cv. Pérola). As folhas provenientes da infestação foram excisadas e colocadas com a superfície abaxial para cima em 15 mL de ágar água (2% p/v), onde 20 ninfas foram avaliadas no período de oito dias, com duas avaliações no tempo (3º e 8º dia) após inoculação das suspensões (H2O+solução salina; H20+ tween 80; morte natural; esporos direto de placa 1x107; conídios da fermentação 1x107). Para cada tratamento foram aplicadas uma alíquota de 1 mL de cada suspensão na superfície da folha. Após processos fermentativos a proporção 50:1, brewer’s exl + glicose foram indicadas para produção de conídios submersos 2.37 x 109 c.mL-1 e protenose + maltodextrina para produção de microesclerodios 1.64 x 104 m.mL-1, o pH 8,5 favoreceu a formação de microescleródios. Não houve solubilização de fosfato pelo isolado e na detecção de degradação de quitina foi formado um halo de 40.43 mm. A aeração e a densidade de pré-cultura não apresentaram resultados significativos no teste de Tukey a 5%. Para controle de ninfas 2º instar de mosca branca houve o índice de mortalidade médio de 65%, tanto para conídios provenientes direto de placa, quanto para conídios submersos provenientes da fermentação liquida.

O Brasil é o maior produtor mundial de cana-de-açúcar. Entre as doenças fúngicas que podem trazer prejuízos no setor canavieiro, observa-se a podridão vermelha, que tem como principal agente causal Colletotrichum falcatum, um ascomiceto que induz uma podridão avermelhada no colmo. A infecção resulta também na perda da qualidade e quantidade de açúcares por uma inversão da sacarose e redução do açúcar total recuperável (ATR). Outra doença, conhecida como ‘’pokkah boeng’’, é induzida por espécies do complexo Fusarium fujikuroi. Resultados publicados recentemente evidenciam que C. falcatum e espécies de Fusarium estão associadas a plantas com sintomas da podridão vermelha e que os sintomas, às vezes, podem se sobrepor aos da pokkah boeng. Os objetivos desse trabalho são (i.) esclarecer quais espécies de Colletotrichum e Fusarium causam podridão vermelha em cana-de-açúcar; (ii.) se as espécies de Fusarium causam sintomas de vermelhidão na nervura central de folhas de cana-de-açúcar; e (iii.) estudar a interação entre espécies dos dois gêneros na indução de sintomas da podridão vermelha e pokkah boeng. Foi coletado material vegetal sintomático de diversas regiões canavieiras e os isolados obtidos foram caracterizados por meio de avaliação de seus marcadores morfológicos, análises de filogenia molecular utilizando os genes barcode TEF, ITS, ACT e GAPGH e testes de patogenicidade na variedade de cana-de-açúcar RB867515. Este é o primeiro relato no Brasil das espécies F. madaense, F. sacchari e F. verticillioides ocorrendo em folhas com sintomas de podridão vermelha. Nas análises filogenéticas foram identificadas uma nova espécie de Fusarium e de Colletotrichum ocorrendo na cana-de-açúcar. Colmos inoculados com F. sacchari, C. falcatum e a combinação de ambos desenvolveram sintomas mais severos. Quando inoculados em folhas, F. madaense e C. falcatum induziram sintomas mais extensos na nervura central. Essas informações permitirão a elucidação dos agentes etiológicos da doença podridão vermelha, a formulação de estratégias de manejo, como a correta recomendação de produtos biológicos e fungicidas, garantindo a sustentabilidade, alta produtividade e qualidade do produto, visando promover a maximização do lucro do setor canavieiro do país, principalmente devido a mudança no procedimento de colheita da cultura.

O milheto granífero é uma cultura importante nas regiões áridas e semiáridas pois é uma planta rústica, que possui resistência a seca e desenvolve em solos com baixa fertilidade. O destino do cereal é para alimentação animal e humana. Entre os fungos que ocorrem em associação com a cultura, são espécies de Fusarium que podem causar podridão do colmo ou comprometer a qualidade e segurança dos grãos. A literatura primária sobre a associação milheto – Fusarium é escassa, enquanto ocorreu considerável expansão da cultura no Brasil em tempo recente. Nesse estudo, foi investigado quais espécies de Fusarium estão associadas ao milheto granífero no Brasil, quais espécies induzem o mofo da panícula e a podridão do colmo. Mais de 100 isolados, obtidos de panículas e colmos de milheto com e sem sintomas ou sinais, provenientes de diferentes regiões produtoras do Brasil, foram caracterizados por meio análise de filogenia molecular de sequências da região gênica tef1, avaliação de seus marcadores morfológicos, e testes de patogenicidade. Até o momento, 15 diferentes espécies foram identificadas, que pertencem a quatro complexos distintos. Nos testes de patogenicidade três espécies induzem mofo da panícula, quatro espécies induzem podridão do colmo. A partir do conhecimento obtido é possível identificar e monitorar os agentes etiológicos, desenvolver estratégias para mitigar o possível dano e contribuir para o manejo fitossanitário. Será possível, ainda, subsidiar programas de melhoramento que visam a seleção de híbridos resistentes.

O potencial dos fungos nematófagos como agentes de controle biológico dos nematoides parasitas de plantas (NPPs) foi amplamente estudado. No entanto, há poucas informações sobre o papel dos compostos orgânicos voláteis (COVs) produzidos por fungos nematófagos na interação com os NPPs. Sendo assim, esse trabalho teve como objetivo avaliar o efeito dos COVs emitidos por fungos nematófagos na interação trófica com as diferentes fases do ciclo de vida (ovos, juvenis e fêmeas) de Meloidogyne sp. (nematoide de galhas). No primeiro artigo, foi desvendado pela primeira vez o papel dos COVs emitidos pelo fungo nematófago Pochonia chlamydosporia (Pc-10) na interação trófica com M. incognita. Os COVs emitidos por P. chlamydosporia reduziram a eclosão de ovos de M. incognita e também atraíram os juvenis de segundo estágio (J2) de M. incognita. O composto 1,4-dimetoxibenzeno é o componente majoritário do volatiloma do isolado Pc-10 de P. chlamydosporia. 1,4-dimetoxibenzeno apresentou atividade nematicida fumigante e não fumigante contra M. incognita, além de atrair os J2 de M. incognita. No segundo artigo, foi demonstrado que os COVs produzidos pelos fungos nematófagos (P. chlamydosporia, Purpureocillium lilacinum, Arthrobotrys conoides e Duddingtonia flagrans) reduziram a eclosão dos J2 de M. javanica. Além disso, os COVs emitidos por P. chlamydosporia, P. lilacinum e A. conoides atraíram os J2 de M. javanica e os COVs de D. flagrans repeliram o nematoide. Foram identificados 22 COVs a partir do valotiloma desses fungos. Os fungos foram separados em três conjuntos diferentes por meio da análise de componentes principais (PCA). Um conjunto englobando P. lilacinum e A. conoides e outros dois conjuntos com D. flagrans e P. chlamydosporia, respectivamente. No ensaio em casa de vegetação, os COVs emitidos por P. lilacinum e o composto 1,4-dimetoxibenzeno controlaram M. javanica e não foram tóxicos para as plantas de jiló.

O tombamento, causado pelo fungo Rhizoctonia solani, é uma das doenças de solo mais importantes que afetam a produção de feijoeiro comum. Esta pesquisa objetivou verificar o desempenho agronômico de microrganismos, metabólitos de formas isoladas e em combinação via formulação comercial na eficiência para cultura e controle de R. solani na cultura do feijoeiro comum. Os experimentos em condições de campo, foram conduzidos na Estação Experimental da Agroteste Pesquisa e Desenvolvimento, no município de Lavras, Minas Gerais, comunidade Mato Dentro, sob as coordenadas 21º 12' 51.87" S, 45º 03' 26.3" O e 898 m de altitude, na safra 2020/2021. As seguintes determinações foram feitas para a cultura do feijoeiro comum com ação de condicionador de solo e promotor de crescimento, à campo, altura de plantas, massa fresca e seca de plantas, massa fresca de raiz, massa seca de raiz, análise de nutrientes foliar e componentes de produção e produtividade da cultura. Os ensaios de controle do patógeno Rhizoctonia solani, in vitro, foram conduzidos no Laboratório de Controle Biológico e os ensaios in vivo em casa de vegetação, pertencente ao Departamento de Fitopatologia (DFP) da Universidade Federal de Lavras, no ano de 2022. Desta forma, foram estabelecidos os experimentos de desempenho de biocontrole in vitro de microrganismos, metabólitos, isolados e em combinação sobre o crescimento micelial, número e peso de escleródios de R. solani; Desempenho de biocontrole in vivo de microrganismos, metabólitos, isolados e em combinação sobre o tombamento e severidade de R. solani. Os dados obtidos das avaliações foram submetidos à análise de variância (Teste F), com o teste de homogeneidade, e as médias dos tratamentos, quando significativas, foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade no software estatístico R Studio. Os resultados dos estudos indicam que: O uso agronômico dos produtos SPA (Bacillus spp.), SPR (Bacillus + Trichoderma spp.) e SPT (Trichoderma spp.), é favorável ao desenvolvimento normal da cultura em estudo. Bacillus spp.; Trichoderma spp. e a combinação destes agentes de controle biológico são eficientes no controle in vitro de R. solani, Bacillus spp. proporciona maior altura de plantas, massa fresca e seca de raiz e influência positivamente a produtividade da cultura do feijoeiro comum. Através dos dados obtidos pode indicar alta capacidade de controle dos metabólitos, microrganismo, isolados ou em combinação, com elevado potencial para utilização em sistema de manejo integrado de doenças de plantas cultivadas. Os microrganismos antagonistas aplicados via sulco de semeadura, com metabólitos, microrganismos isolados e em combinação interferiu em parâmetros vegetativos de plantas de feijoeiro comum sem a presença de inóculo em condições de campo. Os tratamentos com Bacillus, Trichoderma, isolados e em combinação via aplicação de metabólitos e microrganismos, interferiu significativamente no aumento de produtividade da cultura do feijoeiro. Evidencia para futuros programas de controle a utilização de metabólitos isolados, microrganismos isolados ou em combinação de Trichoderma e/ ou Bacillus, com características promissoras.

A agricultura tem buscado métodos alternativos de controle, como a utilização de derivados vegetais como extratos, óleos essenciais e hidrolatos dentre outros que podem levar a descoberta de agentes de biocontrole com possíveis novos mecanismos de ação contra fitopatógenos. A produção do tomate é prejudicado pela pinta preta, causada pelo fungo Alternaria linariae. Óleos essenciais (OE), hidrolatos (HT) e decoctos (DC) apresentam atividade antifúngica e tem potencial no controle alternativo aos fungicidas químico sintéticos para o controle de doenças. Neste estudo foi investigada a atividade antifúngica dos óleos essenciais, decoctos e hidrolatos de Cochlospermum regium, Piper aduncum, Protium ovatum, Hymenaea courbaril e Eugenia dysenterica sobre o desenvolvimento in vitro e in vivo de Alternaria linariae. Foram avaliados a atividade antifúngica sobre o crescimento micelial, índice de velocidade do crescimento micelial e germinação dos conídios de Alternaria linariae in vitro e área abaixo da curva do progresso da doença in vivo, além de verificar a ação dos óleos essenciais, decoctos e hidrolatos usando uma abordagem de ultraestrutura através da microscopia eletrônica de varredura. O óleo essencial de P. aduncum (2,5%) inibiu em 76,42%, o crescimento micelial de A. linariae, os demais óleos essenciais testados apresentaram percentual de redução superior a 50%. O hidrolato de Cochlospermum regium (5%) inibiu em 63,46% o crescimento micelial de A. linariae. O decocto de Eugenia dysenterica inibiu 88,98% do crescimento micelial do patógeno. O óleo essencial, hidrolato e decocto de P. aduncum demonstrou a menor porcentagem de germinação dos conídios de A. linariae, os demais óleos essenciais, decoctos e hidrolatos testados apresentaram percentual de redução superior a 20%. Os ensaios in vivo demonstraram o potencial dos óleos essenciais, decoctos e hidrolatos de Cochlospermum regium, Piper aduncum e Eugenia dysenterica, através da redução da área abaixo da curva de progresso da doença de quatro cultivares de tomate (Cereja, San Marzano, Santa Clara e Super Marmande) em condições de casa de vegetação em relação ao tratamento controle. A análise ultraestrutural mostrou que a aplicação dos OE de pimenta de macaco a 5%, HT de algodãozinho do cerrado e DC de cagaita levaram a deformações morfológicas, extravasamento celular e inibição da germinação dos conídios. Os óleos essenciais, hidrolatos e decoctos testados neste estudo podem inibir significativamente A. linariae in vitro e in vivo e tem potencial como um produto natural promissor para o controle da pinta preta em plantas de tomate.

O Brasil é o maior produtor mundial e exportador mundial de café (Coffea spp.). Minas Gerais é o principal estado produtor de café e a produção de café arábica representa mais de 70% da produção estadual. A produção cafeeira pode ser prejudicada por meio de perdas devido a diversos fatores, mas o principal é a presença de doenças. Sendo a ferrugem do café (Hemileia vastatrix) a principal doença geradora de perdas na produção tanto em café arábica, quanto em café conilon. O progresso da doença deve ser acompanhado para obtenção do melhor manejo e época de aplicação de fungicidas. Um dos métodos utilizados para avaliar de forma prática a quantificação de doenças no campo é o uso de escalas diagramáticas. Com isso, o primeiro experimento teve o objetivo de desenvolver uma nova escala diagramática para café arábica com fotografias coloridas e sete níveis de doença, baseado em outras três escalas existentes. Primeiramente, confeccionou-se a nova escala diagramática, a partir de 221 folhas coletadas de forma casualizada e posterior foi obtida a distribuição de frequência da doença. Posteriormente foi realizada três avaliações com 10 avaliadores diferentes para a validação da nova escala e comparação com as escalas diagramáticas existentes. A validação foi realizada por meio de regressão linear e análise de correlação concordante de Lin, realizadas no software R. Os avaliadores utilizando a escala proposta melhoraram a acurácia, precisão e reprodutibilidade das avaliações e reduziu a distribuição dos resíduos. O objetivo do segundo experimento foi de avaliar a taxa de progresso da ferrugem no café arábica com diferentes fungicidas e suas misturas. Os dados analisados foram realizados entre 2014 a 2021, obtidos a partir de 23 experimentos de lavouras de café arábica, cultivar Catuaí Vermelho IAC 99, suscetível à ferrugem. As avaliações foram realizadas em lavouras com idade entre cinco e oito anos, espaçamento de 3,8 x 0,6m entre plantas e conduzidos segundo as recomendações técnicas para a cultura. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com quatro repetições e a parcela experimental composta por 10 plantas. Foi avaliada a incidência de ferrugem, a taxa de progresso da doença, linearização dos dados e ajustados modelos lineares e não lineares para todos os dados de tratamentos obtidos, utilizando o software R. O melhor modelo ajustado foi escolhido a partir dos critérios de maior coeficiente de determinação (R2) e menor Critério de Informação de Akaike (AIC). O modelo integral não linear exponencial foi o de melhor ajuste para descrever a taxa de progresso da ferrugem em função do tempo.

A mancha aureolada, cujo agente etiológico é a bactéria Pseudomonas syringae pv. garcae tem ocorrido em viveiros e lavouras de Coffea arabica, causando danos a cultura. Os objetivos dessa tese foram comparar a eficiência de métodos de inoculação, com e sem ferimento, e sua interação com diferentes concentrações de Psg na intensidade da mancha aureolada do cafeeiro, verificar a interação de diferentes temperaturas e fotoperíodos na concentração de inóculo de P. syringae pv. garcae e na expressão dos sintomas da mancha aureolada em folhas de cafeeiro e, além disso, caracterizar o progresso espaço-temporal da mancha aureolada (P. syringae pv. garcae) em mudas de cafeeiro (C. arabica) no viveiro a partir de inóculo inicial pré-definido. De acordo com os resultados, os métodos de inoculação por ferimento no limbo foliar de cafeeiro para inocular P. syringae pv garcae proporcionaram maiores incidência e severidade da mancha aureolada. Dentre esses, os métodos de inoculação de maiores incidência e severidade da doença são via injeção de inóculo, ferimento com conjunto multiagulhas e jato-de-areia. Para esses métodos, as concentrações de inóculo 1,3x109, 1,6x109 e 8,5x108 UFC mL-1, respectivamente proporcionaram máxima severidade da doença. A maior concentração média de inóculo de foi de 1,22x109 UFC/ml obtida no fotoperíodo de 12 horas. Nessas condições à 23,3°C houve a maior produção de inóculo de 2,40x109 e 2,11x109 UFC/ml. Embora ocorreu diferença quanto ao fotoperíodo na produção de inóculo, apenas a temperatura influenciou na AACPS sendo maior a 23,7°C. A correlação positiva da temperatura com a concentração de inóculo e dessa última com a AACPS comprovou a importância das variáveis ambientais, principalmente a temperatura, na obtenção do maior número de células bacterianas para a expressão dos sintomas. Maiores dimensões das células bacterianas ocorreram quando a incubação foi realizada nas condições de fotoperíodo de luz contínua e temperatura de 28°C ou escuro contínuo e temperatura de 26°C. No viveiro de mudas de cafeeiro, houve epidemia da mancha aureolada. O início foi 15 dias após a introdução no viveiro do inóculo inicial, com duração de oito semanas. Houve dependência espacial das mudas doentes em relação ao inóculo inicial, ou seja, o progresso espaço temporal da doença teve relação com a introdução das plantas infectadas. A partir dessas plantas infectadas, o patógeno foi disseminado a mais de 40 cm de raio da fonte de inóculo, em menos de 40 dias, com dependência espacial. Essa distância aumentou com o incremento do número de plantas doentes no foco principal e/ou focos secundários.

Atualmente, o uso de ferramentas alternativas ao controle químico tem se tornado uma das opções mais sustentáveis e ambientalmente amigáveis na proteção de culturas contra fitopatógenos. A produção do tomateiro é frequentemente restrita pela pinta preta (PP), uma doença altamente destrutiva causada pelo fungo fitopatógeno Alternaria spp. Com base nesse problema, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de óleos essenciais (OEs) e o agente de controle biológico (ACB) Bacillus amyloliquefaciens MBI600 no controle da PP. Foram testados os efeitos da atividade antifúngica, indução de resistência, promoção do crescimento e produtividade dos OEs de tomilho (Thymus vulgaris), capim-limão (Cymbopogon citratus), melaleuca (Melaleuca alternifolia) e o ACB MBI600 no controle de A. linariae no tomateiro. Sob condições in vitro, os OEs de tomilho (2000 ppm), capim-limão (2000 ppm), e ACB MBI600 (500 ppm) inibiram o crescimento micelial de A. linariae em 100, 100 e 87.47 %, respectivamente. Entretanto, a menor porcentagem de germinação de conídios foi apresentada no tratamento com OE de tomilho (0.89 %) e OE de capim-limão (1.11 %). No entanto, o OE de melaleuca mostrou reduzida atividade antifúngica sobre A. linariae. A porcentagem de área foliar infectada aos 8 dias após a inoculação (DAI) foi 46.78 e 66.29 % menor com pulverizações foliares do OE de tomilho e o ACB BMI600, respectivamente, comparada com plantas apenas inoculadas. A severidade final da doença (70 DAI) no tratamento com o ACB MBI600 (36.74 %) e OE de tomilho (42.00 %) foram significativamente superior ao tratamento controle (68.81 %) (P ≤ 0.05). As pulverizações foliares do ACB MBI600 e o OE de tomilho induziram a resistência em plantas de tomate, com o incremento da atividade das enzimas relacionadas à defesa; peroxidase, polifenol oxidase e β-1,3-glucanase, e em menor magnitude a fenilalanina amônia-liase, além de elicitar a deposição de calose, acumulação de lignina e fenóis em resposta à infecção por A. linariae. Por outro lado, o ACB MBI600 promoveu um incremento nos parâmetros de crescimento vegetativo e produtividade. Neste estudo, foi demostrado que o ACB MBI600 e o OE de tomilho mostraram alta atividade antifúngica em condições in vitro e na redução da severidade da PP do tomateiro através da indução de resistência. Estes resultados indicam que o OE de tomilho e o ACB MBI600 podem ser consideradas potenciais ferramentas no manejo da PP do tomateiro.

A aplicação de fungicidas em sementes e na parte aérea de plantas é atualmente uma estratégia de manejo sanitário amplamente utilizada na cultura da soja, visando ao combate de doenças que podem causar danos significativos nesta cultura. Apesar da eficácia comprovada no controle de doenças, o uso de defensivos químicos pode resultar em consequências negativas ao meio ambiente, além de onerar o custo de produção da lavoura, sendo assim desejável que haja uma redução na quantidade de produtos utilizados no campo. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia do tratamento químico de sementes em combinação com aplicações pós-plantio de fungicidas como uma alternativa viável para o controle de Colletotrichum truncatum associado às sementes e a obtenção de produtividades mais elevadas, visando a redução da necessidade de utilização de maiores números de pulverizações de fungicidas em soja no campo e consequente decréscimo no custo de produção da cultura. Para o ensaio foram utilizados oito tratamentos, todos compostos de sementes contaminadas com C. truncatum, em esquema de 2 x 4 (2 tratamentos de sementes e 4 pulverizações). Os ensaios foram conduzidos até a época de colheita, avaliando-se estandes, altura e peso de plantas, número de vagens, peso de mil grãos, rendimento de grãos, índice de doença, sanidade de sementes colhidas e viabilidade econômica do sistema. O tratamento químico de sementes foi eficaz na redução da incidência de C. truncatum nas sementes de soja e promoveu aumento nos valores de estandes, altura e peso de plantas, e rendimento de grãos, provocando queda sobre o índice de doença e sobre a incidência do patógeno em sementes colhidas. O tratamento de sementes resultou em maior receita para os sistemas avaliados, se mostrando uma alternativa econômica e eficaz a um número maior de pulverizações de fungicidas sobre as plantas no campo.

A soja (Glycine max (L.) Merril), pertencente a família Fabaceae, é a principal cultura de grãos produzida no Brasil. Dentre os fatores que limitam o rendimento da soja destaca-se a ocorrência de doenças, como a antracnose, cujo agente etiológico é o fungo Colletotrichum truncatum. Essa doença causa perdas econômicas significativas em lavouras, podendo se manifestar desde o plantio até o final do ciclo da cultura. Dentre as medidas de controle mais utilizadas, o controle químico se destaca em sua eficiência no manejo de doenças da soja, sendo o uso de fungicidas cúpricos uma alternativa de estratégia anti-resistência. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do tetraaminoetanol de cobre no manejo da antracnose em soja e nos mecanismos de defesa da planta ao patógeno. O produto foi avaliado em diferentes doses com aplicações isoladas e em associação com os fungicidas fluxapiroxade + piraclostrobina nas plantas em estádio V7. Os experimentos foram conduzidos em condições in vitro e casa de vegetação. No experimento in vitro foi avaliada a eficiência do tetraaminoetanol em diferentes doses na redução do crescimento micelial de C. truncatum, na produção de esporos e na viabilidade dos mesmos. No experimento em casa de vegetação foi inoculado o patógeno 3 dias após a aplicação do cobre na soja. A severidade da doença nas folhas foi avaliada semanalmente após o aparecimento dos primeiros sintomas. Após as aplicações dos tratamentos foram realizadas coletas de folhas em diferentes tempos (após a aplicação do produto e após a inoculação do patógeno) para quantificação da atividade das enzimas fenilalanina amônia-liase (PAL), peroxidase (POX) e polifenol oxidase (PPO) e dos teores de compostos fenólicos solúveis totais e lignina solúvel. O delineamento utilizado no experimento in vitro foi inteiramente casualizado com 6 repetições e em casa de vegetação, blocos casualizados com 4 repetições. Tetraaminoetanol de cobre em doses isoladas inibiram a esporulação do C. truncatum em placas de Petri, porém não inibiram o crescimento micelial. O produto nas doses de 2 mL e 3 mL L-1 controlou a severidade da antracnose em casa de vegetação, aumentou a atividade das enzimas PAL e PPO e a produção de lignina solúvel nas plantas. Sugere-se que o tetraaminoetanol de cobre agiu de forma protetiva nas folhas, inibindo a esporulação e colonização, e apresentou efeito sistêmico nas plantas contribuindo para a ativação de mecanismos de defesa constitutiva.

Os nematoides são responsáveis por perdas na produção de tomate, e a espécie que mais destaca é Meloidogyne javanica. Para solucionar essas perdas, uma alternativa é o uso de fungos nematófagos, microrganismos com grande capacidade de adaptação e importantes agentes no controle biológico devido a modificação do seu comportamento saprofítico para carnívoro em condições nutricionais desfavoráveis. Além disso, estes fungos produzem enzimas extracelulares, dentre as quais, proteases e quitinases, que apresentam grande potencial no controle bioquímico de nematoides e de uso no campo como biopesticidas. Existem várias pesquisas internacionais e nacionais que mostram o uso bem-sucedido de enzimas fúngicas no controle de nematoides. Entretanto, ainda existem estudos insuficientes no campo e/ou in vivo. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a ação das proteases e quitinases de Pochonia chlamysdosporia no controle de Meloidogyne javanica em tomateiro. No experimento 1 e 2, os resultados de porcentagem de mortalidade de juvenis de segundo estádio (J2) foram significativos (P ≤ 0,05), e MS e MSQ com atividades especifica de proteases (MS 23 U/mg, MSQ 0,71 U/mg), quitinases (MS 0,06 U/mL MSQ 0,10 U/mL) e protease VCP1 (MS 45.10-3 µg/min, MSQ 35.10-3 µg/min) apresentaram maior mortalidade de juvenis (MS 91,83, 93,63%; MSQ 55,73, 79,15%) do que os demais tratamentos (Água 5,79, 3,62%; MLQ 22,48, 21,50%; ML 40,93, 62,85%), e a concentração que destacou pela alta capacidade de causar a mortalidade de J2 de M. javanica foi o MSQ com concentração 0,5% (100%) e atividade especifica de proteases (0,71 U/mg), e nos dois ensaios in vitro as concentrações de 0,12 (33,33, 17,34%), 0,25 (26,73, 2,27%) e 0,50% (9,67, 2,52%) de MSQ reduziram drasticamente o percentual de eclosão dos J2 de Meloidogyne javanica. O número de galhas de M. javanica dos tratamentos (experimento 01 e 02) diferiram estatisticamente (P ≤ 0,05) e foram menores do que o controle (MSQ 0% 113,43, 115,43). O número de ovos de M. javanica foram iguais estatisticamente, e os tratamentos de MSQ (0,5, 1, 4%) não foram reduzidos. O estudo in vivo com aplicação de proteases e quitinases de MSQ sob condições de casa de vegetação não confirmou os resultados in vitro em tomateiros. Portanto, é necessários novos estudos in vivo com uso de mais aplicações do MSQ para obter melhores resultados na redução da multiplicação de M. javanica.

O feijoeiro-comum (Phaseolus vulgaris L.) é cultivado em várias regiões do Brasil sob condições edafoclimáticas distintas. As doenças são as principais causas de redução na produtividade dessa cultura. Xanthomonas phaseoli pv. phaseoli (Xpp) e X. citri pv. fuscans (Xcf) são agentes etiológicos do crestamento bacteriano comum - CBC principal bacteriose que acomete essa cultura. Dentre as estratégias do manejo integrado de doenças, a resistência genética sobressai, na busca por materiais resistentes é necessário conhecer a diversidade genética desses patógenos. Nessa ótica, o presente trabalho teve como objetivos: obter isolados de Xanthomonas spp. de plantas com sintomas de CBC do feijoeiro; identificar os isolados empregando primers específicos; caracterizar os isolados quanto a produção de pigmento; avaliar a diversidade genética de Xanthomonas spp. por rep-PCR e avaliar a virulência dos isolados de Xanthomonas phaseoli pv. phaseoli ao feijoeiro. Foram empregados 12 isolados de Xpp e duas cultivares de feijoeiro Rudá e BRS Esplendor, suscetível e resistente, respectivamente. Os primers X4c e X4e foram suficientes na identificação das espécies de Xpp. Nove isolados produziram pigmentação marrom no meio avaliado e os outros três não produziram pigmento. Há pelo menos três linhagens genéticas dentro de X. phaseoli pv. phaseoli. Observou-se diferença na virulência dos isolados sendo isolado M 354 o mais virulento. Esses resultados evidenciam a existência de variabilidade na virulência nos isolados estudados.

The public interest in sustainable agriculture reinvigorated scientific research on beneficial microorganisms. These microorganisms may improve plant growth by exerting essential functions in soil fertility, plant nutrition and health. The increase in the number of biological products in the world market depicts the importance of beneficial microorganisms in biotechnology. However, the development of new and more specific products demands further research. In the first part of this study, six strains of the endophytic fungus Induratia sp. were isolated and identified by using molecular phylogenetic analyses. These Induratia strains were able to produce volatile organic compounds (VOCs) with antimicrobial activity against Phytophthora sp., Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea, Colletotrichum lindemuthianum, Sclerotinia sclerotiorum and Fusarium verticilioides. The Induratia strains produced 17 different VOCs as determined by solid-phase microextraction followed by gas chromatography-mass spectrometry (SPME-GCMS). Strain FTB, identified as I. coffeana has shown the highest inhibition against most pathogens. In a subsequent part of the research, strain FTB was further developed into a product to control B. cinerea in hermetically closed boxes of strawberry, where it was shown to increase the shelf life of the fruits by at least 5 days. A patent filing application for a formulated product containing strain FTB on millet grains was submitted to the National Institute of Industrial Property (INPI) and it was registered under number BR 10 2021 001666 3. In the final part of this work, we exploited the functional diversity of the bacteria from the rhizosphere of faba bean, oat, oilseed rape, wheat, and also from bare fallow soil. A total of 138 bacterial strains were obtained and identified by sequencing a fragment of the16S rDNA gene. A total of 12 genera were identified: Pseudomonas sp., Stenotrophomonas sp., Comamonas sp., Arthrobacter sp., Agromyces sp., Rhodococcus sp., Streptomyces sp., Serratia sp., Lelliotia sp., Paenisporosarcina sp. The most common were Pseudomonas (44.2%) and Stenotrophomonas (23.2%). Their capacity to solubilise phosphorus (P) from aluminium phosphate, tricalcium phosphate and iron phosphate, to mineralise phytate, solubilise potassium (K), to produce siderophores, hydrolise nitrate and inhibit Fusarium graminearum was assayed in vitro. The most common plant growth promotion (PGP) activity was represented by P solubilisation from aluminium phosphate, followed by K solubilisation. Bacterial isolates displaying iron phosphate phosphate solubilisation and mineral P solubilisation from phytate were found only in the rhizospheres of oilseed rape and beans. Approximately 68% of the bacterial strains displayed two or more PGP activities. Four selected strains were applied singly or combined on wheat seeds and were shown to significantly increase root and shoot weight in relation to the control in all single applications. However, their performance in combinations was never superior to single strain applications. Several strains have shown potential to be applied as biofertilizers and biocontrol agents and therefore contribute to increase the sustainability of agriculture.

A cultura do café está entre as principais commodities do Brasil. As doenças de plantas são uns dos principais fatores que afetam diretamente a produtividade do cafeeiro acarretando a perdas significativas, entre essas, se destaca a ferrugem do cafeeiro. O principal método de controle dessa doença é o tratamento químico, porém, existe uma demanda por um café isento de resíduos de moléculas nocivas ao homem e ao ambiente. Uma opção a esses produtos é o uso dos indutores de resistência, uma medida de manejo de doenças que envolve a ativação de mecanismos de defesa latentes da planta. Com o presente trabalho, objetivou-se avaliar o efeito de fosfito de potássio (K-Phi) em cultivares de cafeeiro com genótipos contrastantes quanto à ferrugem. Visando elucidar o mecanismo pelo qual K-Phi ativa as defesas das plantas de cafeeiro, estudamos a expressão de genes e atividade de enzimas envolvidos desde a sinalização célula a célula até a biossíntese de metabólitos secundários, comparado ao indutor padrão acibenzolar-S-metil (ASM). Também foi feita a quantificação de metabólitos. Observou-se que a aplicação foliar de K-Phi aumentou a transcrição de genes relacionados a via de respostas de defesa do hormônio vegetal ácido salicílico e a biossíntese de metabólitos secundários (PAL, EDS1, NPR1, GLU e POX), além disso, aumentou a atividade de enzimas de defesa relacionadas a explosão oxidativa e a formação dos metabólitos (SOD, APX e PPO). Todas essas variáveis quantificadas, após tratamento com K-Phi apresentaram resultados semelhantes ao indutor padrão ASM em várias situações avaliadas (cultivares e tempos de coleta). Então, possivelmente, o mecanismo de ação do K-Phi na indução de resistência do cafeeiro, envolva a mesma via induzida pelo ASM. Os resultados obtidos demonstram que K-Phi pode ser considerado um potente indutor de resistência do cafeeiro, pois o tratamento prévio das plantas com esse indutor foi capaz de induzir o aumento de respostas de defesa em cultivares de cafeeiro resistentes e suscetíveis a ferrugem, mesmo na ausência do patógeno.

Atualmente Brasil ocupa a posição de maior produtor de soja no mundo, se estima são   39,91 milhões de hectares destinadas na produção. Um dos problemas da produção de soja é o impacto das doenças, as quais pode variar anualmente, dependendo das condições climáticas de cada região, pois, em condições favoráveis, estes patógenos podem se desenvolver e causar grandes perdas de 10%-15% dos rendimentos anuais. No Brasil uma das maiores perdas é por causa das doenças do final de ciclo, Septoria glycines junto com Cercospora kikuchii T. Matsumoto e Tomoyasu, Cercospora sojina Hara e Cercospora sp. forman o complexo. Há poucas informações sobre S. glycines e sua associação com as sementes, bem como sua capacidade sobreviver interna ou externamente e seus efeitos nas sementes de soja. Em vista disso, o objetivo neste trabalho foi avaliar o grau de parasitismo e transmissibilidade de Septoria glycines em associação com sementes de soja (Glycine max) em condições controladas de cultivo. Foram avaliados efeitos do isolado na germinação e vigor das sementes de soja e a sua transmissão de plantas para sementes em cultivo realizado em casa de vegetação e outro experimento de transmissão de sementes a plantas sob condições controladas. Pelas avaliações realizadas observou-se diferenças significativas nas variáveis analisadas, observou-se que houve transmissão de Septoria glycines de planta para sementes, variando esta transmissão de 40% a 80%. Na transmissão de sementes para plantas houve uma influência da temperatura e do nível de inóculo utilizados em estudo, afetando o desempenho das plantas oriundas das sementes inoculadas.. Por este estudo foi possível verificar diferenças de agressividade de S. glycines e a  transmissão de sementes a plantas em variáveis taxas, observando danos crescentes e proporcionais aos aumentos dos níveis de inoculo inicial nas sementes.

O tomate é a olerícola mais produzida e consumida no mundo, devido à possibilidade de ser cultivada em diversas condições edafoclimáticas e pela versatilidade de consumo, in natura ou processado. Com o objetivo de avaliar os efeitos das fontes de silício, cálcio e magnésio e doses, no controle da mancha bacteriana do tomateiro, foi conduzido um experimento em casa de vegetação e laboratório. Os tratamentos para o experimento consistiram de acibenzolar-S-metil 0,2 g. L-1, Surround (37,5 g.L-1; 75 g.L-1; 150 g.L-1 ), Geox HD (37,5 g.L-1; 75 g.L-1; 150 g.L-1 ), Geox 60/30 (37,5 g.L-1; 75 g.L-1; 150 g.L-1 ), em 4 repetições. O delineamento experimental foi em blocos casualizados. No experimento em casa de vegetação avaliou a eficiência das diferentes fontes de silício, cálcio e magnésio e as doses aplicadas no controle da mancha bacteriana do tomateiro. No laboratório foram avaliadas as enzimas de defesa da planta. As avalições da doença foram avaliadas de três em três dias, contabilizando cinco avaliações, a severidade foi realizada com escala diagramática. As variáveis foram analisadas estatisticamente, aplicando-se o teste de Tukey a 5% de significância. No experimento onde foi inoculado a bactéria houve diferença significativa para as enzimas PAL e POX entre os tratamentos aplicados. Já para a enzima PPO não houve diferença significativa entre os tratamentos aplicados. Os tratamentos T2, T6, T8, T10, respectivamente foram os que obtiveram os menores valores de área abaixo da curva da severidade (AACPS). Não houve diferença significativa (p<0,05) entre os tratamentos para fenol e lignina. Quando quantificado os teores de clorofila a, b, total e carotenoides, observou-se diferença estatística entre os tratamentos não inoculados e inoculados. Dos tratamentos não inoculados, o T3 se destacou para clorofila a e os T3, T6, T7 para clorofila b, e para clorofila total destacou-se o T3. Dentre os tratamentos inoculados, para clorofila a o T6 se destacou dos demais, para clorofila b, os melhores tratamentos foram os T6 e T8, já para clorofila total, o tratamento que melhor obteve resultado foi o T6. Não houve diferença estatística para os tratamentos quando quantificado carotenoides

O tomate é a olerícola mais produzida e consumida no mundo, devido à possibilidade de ser cultivada em diversas condições edafoclimáticas e pela versatilidade de consumo, in natura ou processado. Com o objetivo de avaliar os efeitos das fontes de silício, cálcio e magnésio e doses, no controle da mancha bacteriana do tomateiro, foi conduzido um experimento em casa de vegetação e laboratório. Os tratamentos para o experimento consistiram de acibenzolar-S-metil 0,2 g. L-1, Surround (37,5 g.L-1; 75 g.L-1; 150 g.L-1 ), Geox HD (37,5 g.L-1; 75 g.L-1; 150 g.L-1 ), Geox 60/30 (37,5 g.L-1; 75 g.L-1; 150 g.L-1 ), em 4 repetições. O delineamento experimental foi em blocos casualizados. No experimento em casa de vegetação avaliou a eficiência das diferentes fontes de silício, cálcio e magnésio e as doses aplicadas no controle da mancha bacteriana do tomateiro. No laboratório foram avaliadas as enzimas de defesa da planta. As avalições da doença foram avaliadas de três em três dias, contabilizando cinco avaliações, a severidade foi realizada com escala diagramática. As variáveis foram analisadas estatisticamente, aplicando-se o teste de Tukey a 5% de significância. No experimento onde foi inoculado a bactéria houve diferença significativa para as enzimas PAL e POX entre os tratamentos aplicados. Já para a enzima PPO não houve diferença significativa entre os tratamentos aplicados. Os tratamentos T2, T6, T8, T10, respectivamente foram os que obtiveram os menores valores de área abaixo da curva da severidade (AACPS). Não houve diferença significativa (p<0,05) entre os tratamentos para fenol e lignina. Quando quantificado os teores de clorofila a, b, total e carotenoides, observou-se diferença estatística entre os tratamentos não inoculados e inoculados. Dos tratamentos não inoculados, o T3 se destacou para clorofila a e os T3, T6, T7 para clorofila b, e para clorofila total destacou-se o T3. Dentre os tratamentos inoculados, para clorofila a o T6 se destacou dos demais, para clorofila b, os melhores tratamentos foram os T6 e T8, já para clorofila total, o tratamento que melhor obteve resultado foi o T6. Não houve diferença estatística para os tratamentos quando quantificado carotenoides

A Mancha Aureolada (Pseudomonas syringae pv. garcae - Psg) é a principal bacteriose que afeta o cafeeiro. Em condições favoráveis, clima ameno e lavouras expostas a ventos e umidade, a doença ocasiona prejuízos em viveiros e plantas adultas. Em áreas que contêm o patógeno, os métodos de controle recomendados se limitam ao uso de preventivos (cúpricos) e curativos (antibióticos), porém a utilização sucessiva desses produtos pode acarretar contaminação ao meio ambiente a longo prazo e também levar à seleção de isolados de Psg resistentes. Desta forma, pesquisas estão sendo realizadas afim de encontrar formulações mais eficientes quanto a atividade antimicrobiana, como as nanopartículas de cobre. Assim, objetivou-se com este trabalho
testar a eficiência da nanopartícula de óxido de cobre (CuO NP) no controle da Mancha Aureolada do Cafeeiro em comparação aos produtos convencionais. Foram realizados dois experimentos: no primeiro foi avaliado o efeito antibacteriano in vitro de diferentes concentrações de CuO NP (0, 25, 50, 100, 200, 400 mg.L -1 ) a isolados de Psg resistentes e sensíveis ao CuSO 4 . No segundo experimento, os isolados UFLA 52 e UFLA 103,
respectivamente com maior e menor sensibilidade a nanopartícula de cobre in vitro, foram inoculados em mudas de cafeeiro previamente tratadas com a dose mais eficaz obtida no ensaio in vitro e com três produtos comerciais (Casumin ® , Big Red ® e Supera ® ). Exposições a partir das concentrações de 25 mg.L -1 apresentaram efeito inibitório no crescimento dos isolados, sendo a dose próxima de 200 mg.L -1 a mais
eficiente, com redução de 38.04% e 4.73% para o UFLA 52 e UFLA 103 respectivamente. O efeito da CuO NP na eficiência de redução da severidade da doença foi de 27.82%, para as mudas inoculadas com o isolado sensível, e 24.21% para as mudas inoculadas com o isolado resistente CuO NP, portanto semelhante estatisticamente aos produtos comerciais. Esses resultados sugerem a necessidade de aprofundamento nos estudos de diferentes nanopartículas, bem como nas avaliações biológicas para viabilizar a utilização destas como formulações antibacterianas para proteção do cafeeiro contra a Mancha Aureolada.

Pythium root rot is one of the most severe diseases in hydroponic lettuce worldwide.
Several species of Pythium may cause the disease, which is characterized mainly by
root browning and poor plant growth. Application of chemical fungicides and
disinfectants is the most common method used to manage these pathogens.
Hydroponic systems offer an interesting opportunity to apply biological control agents or
biologically derived products to control waterborne pathogens due to the controlled
environment and the absence of soil. Despite the advantages of biological agents,
products specifically developed to control Pythium in hydroponics are not common. Our
goals in this study were to select, characterize and apply surfactant-producing bacteria
to control Pythium on hydroponically grown lettuce. From six bacterial strains initially
known to produce surfactants, strain 88A secreted compounds with the highest activity.
Genome sequencing of strain 88A and analyses of genomic indices revealed that it is a
Pseudomonas areruginosa. A comparative genomic analysis of 303 genomes of this
species showed that 302 genomes harbored genes rhlA and rhlB in one operon, which
encode enzymes responsible for the synthesis of mono-rhamnolipids. An additional
gene, rhlC located in another locus encodes for the conversion of mono- into di-
rhamnolipids. Only one of these genomes had two copies of rhlAB and rhlC genes and
one genome did not contain any of the rhamnolipid-encoding genes. The precipitated
dry crude surfactants produced by strain 88A had properties that were similar to that of
a mixture containing rhamnolipids, such as surface activity, foaming and capacity to lyse
Pythium zoospores at concentrations higher than 1 mg/ml. The identity of the
rhamnolipid-encoding genes among the 302 genomes varied from 92 to 99.9% for rhlA,
from 91 to 100% for rhlB and from 97% to 100% for rhlC. The 303 sequenced strains
were isolated from animals (84.5%), plants (3.6%), soil (2.6%) and from other origins
and environmental samples (9.2%). Strain 88A or the precipitated rhamnolipids
decreased Pythium severity in hydroponic lettuce by approximately 60% and increased
fresh weight of lettuce plants by 68%, which was not significantly different from the
treatment without Pythium. Although this bacterial species is frequently associated with
immunocompromised patients, the purified rhamnolipids may be applied in the control of
Pythium in hydroponic lettuce.

O tomate é o segundo vegetal mais consumido no mundo, mas em algumas regiões produtoras
de o país ainda tem uma natureza nômade. Um dos motivos para a migração das lavouras é a
importância das doenças causadas por patógenos habitantes do solo. A fim de determinar os
fatores que regem a importância desta doença, determinamos o padrão de perdas e custo da
produção de tomate em Carmópolis. Em todas as áreas de produção de tomate a murcha de
plantas foi identificada e a etiologia foi Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. O
custo de produção do tomate foi acima do relatado em outras regiões e embora os produtos
adotados visassem a nutrição das plantas e o controle de pragas e doenças, não garantiram
redução de perdas de frutos de tomate de até 30% ao longo da cadeira de produção e
comercialização do tomate. A perda de frutos foi associada principalmente a deficiência de
boro e cálcio. Embora menor no campo, a podridão mole se tornou a perda mais importante
ao longo da cadeia de comercialização do tomate, atingindo seu máximo na gôndola do
supermercado. Além disso, uma correlação significativa foi encontrada entre a deficiência de
cálcio e a incidência de podridão mole. Além disso, de todas as perdas qualitativas, a
deficiência de cálcio e a podridão mole foram as únicas com brix acima de 4,5. Portanto, a
fim de reduzir o custo de produção do tomate e tornar a produção sustentável de tomate de
mesa, propomos uma revisão crítica sobre o uso de produtos fitossanitários e fertilizantes para
redução de perdas, o que por sua vez irá contribuir para reduzir as perdas por doenças
causadas por patógenos necreotróficos como Pectobacterium sp.

Em decorrência da grande importância econômica e social do milho, torna-se relevante o
estudo do desempenho de suas sementes na presença do patógeno Exserohilum turcicum,
prevalente na maioria das regiões produtoras dessa cultura. Diante da escassez de informações
mais pontuais sobre as relações entre esse patógeno e sementes de milho no Brasil e diante da
importância crescente deste patossistema, a proposta nesta pesquisa foi a avaliação da
diversidade genética do patógeno, seus efeitos no desempenho de sementes contaminadas e
desenvolvimento de um protocolo de detecção molecular do fungo em sementes de milho.
Sementes de um híbrido suscetível de milho foram inoculadas para obtenção de quatro níveis
de inóculo (N24, N48, N72 e N96) com dois isolados de E. turcicum. Os efeitos do patógeno
no desempenho das sementes foram avaliados por meio de teste de germinação, sanidade e
vigor. A presença de isolados de E. turcicum em sementes de milho foi prejudicial ao
desenvolvimento das sementes inoculadas com este patógeno havendo variações entre os
fatores utilizados para este tipo de avaliação. A altura de plantas oriundas de sementes
inoculadas com ambos isolados de E. turcicum não foi afetada ao contrário do vigor e
germinação principalmente no tratamento de maior nível de inóculo. Utilizando-se a técnica
molecular de PCR convencional, foi possível detectar a presença do fungo, em todos os níveis
de inóculo, nas sementes de milho inoculadas, utilizando um primer desenvolvido para
quantificação do mesmo patógeno em folhas de milho. O par de primers utilizado é específico
para E. turcicum e é capaz de detectar o patógeno em concentrações de até 0.0000147ng/μL.
Nas análises utilizando a técnica de PCR em tempo real, pode-se quantificar o DNA genômico
presente nas sementes de milho inoculadas com níveis de incidência mínima de 0,5%.

Em decorrência da grande importância econômica e social do milho, torna-se relevante o estudo do desempenho de suas sementes na presença do patógeno Exserohilum turcicum, prevalente na maioria das regiões produtoras dessa cultura. Diante da escassez de informações mais pontuais sobre as relações entre esse patógeno e sementes de milho no Brasil e diante da importância crescente deste patossistema, a proposta nesta pesquisa foi a avaliação da diversidade genética do patógeno, seus efeitos no desempenho de sementes contaminadas e
desenvolvimento de um protocolo de detecção molecular do fungo em sementes de milho.
Sementes de um híbrido suscetível de milho foram inoculadas para obtenção de quatro níveis de inóculo (N24, N48, N72 e N96) com dois isolados de E. turcicum. Os efeitos do patógeno no desempenho das sementes foram avaliados por meio de teste de germinação, sanidade e vigor. A presença de isolados de E. turcicum em sementes de milho foi prejudicial ao desenvolvimento das sementes inoculadas com este patógeno havendo variações entre os fatores utilizados para este tipo de avaliação. A altura de plantas oriundas de sementes
inoculadas com ambos isolados de E. turcicum não foi afetada ao contrário do vigor e germinação principalmente no tratamento de maior potencial de inóculo. Utilizando-se a técnica molecular de PCR convencional, foi possível detectar a presença do fungo, em todos os potenciais de inóculo, nas sementes de milho inoculadas, utilizando um primer desenvolvido para quantificação do mesmo patógeno em folhas de milho. O par de primers utilizado é específico para E. turcicum e é capaz de detectar o patógeno em concentrações de até 0.0000147ng/μL. Nas análises utilizando a técnica de PCR em tempo real, pode-se quantificar o DNA genômico presente nas sementes de milho inoculadas com níveis de incidência mínima de 0,5%.

In this work, we studied the effects of a microbial fermentation product (MFP) on the protection of Glycine max against Phakopsora packyrhizi. Here, we hipothetize MFP is a biotic elicitor, more specifically a microbe-associated molecular patterns (MAMP), with the ability to increase soybean basal defenses prior to pathogen infection, making it less susceptible to the following attack. First, we define what MAMPs are and discuss how they are recognized by plants. MAMP elicitor recognition happens through pattern recognition receptors (PRR), which are either receptor kinases or receptor-like proteins. We also showcase MAMP diversity, classifying them by their nature. Secondly, we studied what transcriptional changes MFP causes in Glycine max Williams 82. During RT-qPCR, defense-related genes (PR1, PR2, IPER, PAL, CHS) were induced with MFP application and further elevated with P. pachyrhizi exposure. The time with the most expressive gene induction was 12 hours after treatment, so RNAseq was performed in this specific sample time to evaluate more thoroughly what processes may be involved in MFP-activated defense against P. packyrhizi. Several plant pathways associated with pathogens defenses were induced including plant-pathogen interactions, MAPK signaling pathways, phenylpropanoid biosynthesis, glutathione metabolism, flavonoid metabolism and isoflavonoid metabolism. In field conditions, MFP also induced soybean defense-related responses, with phenol content being statistically higher in MFP-treated plants, but variability in gene induction resulted in no yield or ASR severity statistical difference for MFP-treated versus untreated plants. Given the variability under field conditions, in the last part we performed a meta-analysis to summarize the effects of MFP in ASR severity and soybean yield. A total of 24 entries were used and separate random-effects meta-analysis for severity and yield were performed on the log-transformed ratios (  and  for severity and yield, respectively). The estimates were used to obtain control efficacy ( ) and yield response ( ).  was 21.1088 (95% CI: 33.1688 to 6.8818), while  was 0.0798 (95% CI: 3.8004 to 13.0206). P values for  and  were 0.0051 and 0.0002, respectively. A mixed effects meta-analysis was then performed to determine the effects of type of treatment (alone vs. combined with systemic fungicide), disease pressure (low, medium, and high), number of applications (low, medium, and high) and timing of the first application (early vs. late) on MFP treatment. All moderators except disease pressure for severity significantly affected  and . In general MFP had better performance when applied by itself (  for alone was 34.249 compared to 4.725 for mixed.  for alone was 14.717 compared to 4.019 for mixed) and when applied earlier during the crop season (  were 8.340 and 8.296 and  were 24.799 and 8.561 for early and late, respectively). MFP has been shown to trigger plant defenses in soybean and may potentially be used in a disease management system, together with other strategies, to ensure a sustainable agriculture. We hope our results can help in planning future trials and in the decision making of MFP application in field conditions.

O Brasil é considerado o quarto maior produtor de banana, entretanto sua produtividade é considerada baixa, principalmente devido a problemas fitossanitários. Dentre as doenças que podem afetar os bananais, as de etiologia viral apresentam grande importância por não possuírem controle curativo. A estria da bananeira, é uma virose que pode causar perdas de ate 90% na produção dos bananais. Essa doença é causada por várias espécies de vírus pertencentes ao gênero Badnavirus. A variabilidade encontrada dentro do gênero Badnavirus e a capacidade de integrar seu genoma, ou parte dele, no genoma da planta formam um entrave para seu teste de diagnose. Nesse trabalho objetivou-se detectar as espécies de Badnavirus que ocorrem em diferentes regiões do Brasil e selecionar um método de diagnose que possa ser utilizado na rotina de laboratórios oficiais envolvidos na certificação de sementes e mudas. Foram analisadas 35 amostras de bananeira de diferentes localidades, primeiramente foi realizada a PCR utilizando-se primers degenerados. As amostras positivas foram submetidas à técnica de rolling circle amplification (RCA) e RT-PCR para a confirmação da presença da forma epissomal dos vírus. Os 21 isolados diagnosticamos como positivos, foram novamente submetidos à amplificação de fragmentos genômicos com 540pb, localizados no gene da RT/RNaseH, para sequenciamento e análise, visando à identificação das espécies. As técnicas RCA e RT-PCR foram eficientes para a detecção da forma epissomal dos vírus. O Comitê internacional de taxonomia de vírus (ICTV-International Committe on Taxonomy of Virus) considera espécies distintas dentro do gênero de Badnavirus, aquelas com uma similaridade menor que 80% na sequência de nucleotídeos do gene que codifica a RT/RNaseH. Os fragmentos genômicos de 540 pb dos 21 isolados sequenciados mostraram uma identidade de nucleotídeos que variou entre 65% a 100% entre si, e de 22% a 99% com os isolados do GenBank pertencentes às diferentes espécies já descritas, que foram empregadas para comparação. Com base nessas identidades, sete dos isolados foram classificados como Banana streak UC virus (BSUCV), sete como Banana streak UD virus (BSUDV), três como Banana streak uganda G virus (BSUGV), dois isolado como Banana streak obinoI'Ewai vírus (BSOLV) e um como como Banana streak Mysore vírus (BSMyV). O isolado MG-PHIA não apresentou similaridade de nucleotídeo a nível espécie com nenhum dos isolados sequenciados ou com espécies de Badnavirus disponíveis no GenBank, entretanto apresentou identidade de 99% com o acesso AY189414 referente a uma sequencia endógena de Badnavirus em banana. Além de evidenciar a grande variabilidade desse gênero, neste estudo mostra-se a presença de espécies ainda não detectadas anteriormente no país, indicando a necessidade de continuar a explorar essa importante virose em território brasileiro.

A busca por métodos alternativos para controlar a ferrugem do cafeeiro com menor impacto
ambiental ainda é um dos maiores desafios para os pesquisadores. Assim, o objetivo do presente
trabalho foi avaliar a eficiência dos óleos essenciais de Melaleuca alternifolia e Eremanthus
erythropappus e óleo comercial de Azadirachta indica em diferentes doses no controle da
ferrugem do cafeeiro. Para isso, dois experimentos foram conduzidos, um in vitro, e outro “in
vivo”, em mudas, conduzido, em casa de vegetação. No experimento “in vitro” avaliou-se o
efeito dos tratamentos na germinação de urediniósporos de Hemileia vastatrix. O ensaio de
germinação foi instalado em delineamento inteiramente casualizado com quatro repetições. A
análise de variância foi em esquema fatorial 3 x 5 + 1, sendo três óleos essenciais (nim,
melaleuca e candeia) e cinco doses (0,0, 0,25, 0,50, 1,0 e 2,0%), e um tratamento adicional com
fungicida. No segundo experimento foi avaliado a eficiência dos três óleos na dose de 0,25%
isoladamente e em mistura com o fungicida. O delineamento experimental foi de blocos ao
acaso com oito tratamentos e quatro repetições. As avaliações da doença foram realizadas
semanalmente. A severidade foi realizada com escala diagramática. As variáveis foram
analisadas estatisticamente, aplicando-se o teste de Scott-Knott a 5% de significância. No
experimento 1, todos os tratamentos foram eficientes na inibição da germinação dos
urediniósporos, com inibição de mais de 90,0%, exceto a testemunha. No experimento in vivo,
observou menor incidência e severidade quando utilizada as doses de óleos em mistura ao
fungicida. A menor incidência ocorreu com aplicação de E. erythropappus + Azoxystrobina +
Cyproconazole (92,3%) e M. alternifólia + Azoxystrobina + Cyproconazole (90,7%) em
relação a testemunha. Para severidade, o controle foi de 924,98% quando aplicado A. indica +
Azoxystrobina + Cyproconazole e 92,45% para M. alternifólia + Azoxystrobina +
Cyproconazole. Não houve diferença estatística para peso seco da parte aérea, teor de clorofila
e altura. Os óleos estudados apresentam potencial para o controle da ferrugem do cafeeiro. No
entanto, são necessários estudos bioquímicos para melhor compreensão dos efeitos de seus
componentes no patógeno.

O oídio é uma das mais severas doenças da abobrinha podendo causar redução de até 50% na
produtividade. A busca por produtos e moléculas de baixo custo, com eficiência no controle do
oídio e inócuos ao homem e ao ambiente tem tido um elevado crescimento. O objetivo do
presente estudo foi avaliar a eficiência de produtos formulados à base de bicarbonato de
potássio (Carbos®), da mistura do óleo essencial de melaleuca + extrato de alho (Melalho®) e
de terpenos (Botanix Terpex®) no controle de oídio da abobrinha. Os ensaios foram conduzidos
em casa de vegetação, onde foram utilizadas sementes de abobrinha cv. Caserta a qual apresenta
suscetibilidade ao oídio. A inoculação das plantas ocorreu naturalmente mantendo plantas de
abobrinha com alta severidade de oídio no interior da casa-de-vegetação. Os produtos foram
pulverizados semanalmente nas plantas e os seus efeitos comparados com plantas controle e
com um fungicida recomendado. Neste estudo foram realizados quatro experimentos, sendo
nos dois primeiros avaliadas diversas concentrações dos produtos Carbos (0,0; 0,2; 0,5; 0,8 e
1,1% v/v), Botanix Terpex (0,0; 0,1; 0,4; 0,7 e 1,0%, v/v/) e Melalho (0,0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%);
no terceiro experimento foram avaliadas as concentrações mais efetivas com base nos dois
ensaios anteriores (Carbos = 0,0; 0,3 e 1,0% v/v), Botanix Terpex (0,0; 0,2 e 1,0%, v/v/) e
Melalho (0,0; 0,5 e 1,0%), também sendo considerados os problemas de fitotoxicidade; e no
quarto experimento foram avaliados os efeitos das misturas dos produtos alternativos [(0,2%
de Botanix Terpex® + 0,5% de Melalho); (0,2% de Botanix Terpex® + 0,3% de Carbos®); (0,5%
de Melalho + 0,3% de Carbos) e (0,2% de Botanix Terpex® + 0,5% de Melalho + 0,3% de
Carbos). A severidade da doença foi avaliada semanalmente, com base na porcentagem de
tecido foliar coberto pelo patógeno. Os dados de severidade, considerando apenas as folhas
doentes, foram utilizados para calcular a área abaixo da curva de progresso da doença
(AACPD/FL). Nos dois primeiros experimentos foi verificada que a redução da AACPD/FL
foi inversamente proporcional à concentração dos produtos alternativos pulverizados, tendo
sido selecionadas as concentrações indicadas acima, para cada produto, para o terceiro
experimento, bem como as misturas para o quarto experimento. No terceiro experimento, os
produtos Melalho (0,5% e 1,0%) e Botanix Terpex (1,0%) foram os que apresentaram a menor
AACPD/FL, diferindo estatisticamente do fungicida. No experimento desenvolvido com
misturas de produtos foi verificado que, quando comparadas as misturas desses produtos, tanto
com o controle, quanto com o fungicida, todas as misturas reduziram significativamente a
severidade da doença em relação a ambos os tratamentos. Todas as misturas foram
estatisticamente semelhantes quanto à redução da severidade da doença avaliada por meio da
AACPD/FL. As misturas dos produtos Botanix Terpex® + Melalho® + Carbos®, Botanix
Terpex® + Melalho e Melalho® + Carbos® reduziram a severidade da doença em 94,9%, 94,9%
e 94,3%, respectivamente, enquanto o fungicida reduziu a doença em 74,5%. Foram observados
problemas de fitotoxicidade para o Melalho® nas concentrações de 1,5% e 2%, e para o Carbos®
na concentração de 0,8% e 1,0%.

A

O cultivo de pitaia pode ser uma fonte de diversificação da atividade agrícola. Suas espécies são promissoras, pois agregam rusticidade de cultivo e beleza dos frutos  aliadas a uma composição rica em compostos funcionais, trazendo benefícios a  quem as consome. Fungos podem afetar os frutos e a parte vegetativa de pitaia  comprometendo a produção e reduzindo o valor comercial. Visando contribuir com  informações sobre doenças fúngicas que acometem a cultura, este trabalho  objetivou: i. identificar os fungos associados ao sintoma de podridão tanto nos frutos  quanto em cladódios por meio de avaliação dos marcadores morfológicos e análise  de filogenia molecular; ii. avaliar a patogenicidade dos fungos em frutos e cladódios; iii. documentar a sintomatologia que os diversos fungos causam, para dar suporte na diagnose em campo e na clínica fitopatológica. Um total de 24 isolados foi obtido do  sul de Minas Gerais, Santa Catarina e Distrito Federal, os quais foram identificados  por marcadores morfológicos como pertencentes aos gêneros Bipolaris (n=4), Alternaria (n=6), Colletotrichum (n=4) e Fusarium (n=10). Isolados representativos de  cada gênero foram identificados por filogenia molecular em nível de espécie e  submetidos aos testes de patogenicidade em frutos e cladódios pelo método de  injeção de suspensão de conídios. Todos os isolados testados foram patogênicos  com diferenças nos sintomas entre as espécies inoculadas. Frutos e cladódios  apresentaram esporulação enegrecida característica quando inoculados com Bipolaris cactivora, manchas enegrecidas longitudinais em frutos e podridão com esporulação em cladódios (Alternaria alternata), podridão aquosa com esporulação 7 alaranjada em frutos e colonização interna do tecido em cladódios (Colletrotrichum  siamense), podridão aquosa de coloração marrom em cladódios e em frutos, se  diferenciando na produção de esporodóquio (Fusarium proliferatum) e hifas  espiraladas (F. sterilihyphosum). Fusarium oxysporum não causou lesão quando  inoculado em cladódios, mas em frutos causou lesão seca com presença de  esporodóquio. Para completar os postulados de Koch, os patógenos foram  reisolados. Os resultados gerados contribuem para a correta identificação dos patógenos e subsidiam um manejo eficaz das doenças, visando garantir a sustentabilidade da cultura e sua viabilidade econômica.

A família Cryphonectriaceae acomoda gêneros fúngicos que podem causar cancro em  espécies da família Myrtaceae e Melastomataceae no mundo. O gênero Chrysoporthe  abrange, até o momento, nove espécies relatadas em países de clima tropical, nos continentes  da África, América e Ásia, incidindo em espécies da família Myrtaceae e Melastomataceae.  No Brasil, ocorrem as espécies Chrysoporthe cubensis, C. doradensis e C. puriensis. Estas  espécies fúngicas foram detectadas em espécies florestais de valor econômico, como  Eucalyptus sp. e espécies nativas, como Tibouchina sp. Descobertas recentes tem revelado  novas espécies dentro da família Cryphonectriaceae a nível de gênero e espécies causando  cancro em Myrtales. Os sintomas da doença do cancro podem ocasionar lesões no câmbio da  planta que reduzem o seu crescimento, levando à ruptura dos tecidos de troncos e galhos  culminando em sua morte. O presente trabalho foi dividido em dois artigos, o primeiro teve  como objetivo estudar a filogenia e morfologia de um novo gênero da família  Cryphonectriaceae, nomeado como Aurantiocollum sp. e o segundo teve como objetivo  descrever o primeiro relato do fungo C. puriensis em T. mutabilis. Os isolados do novo  gênero, Aurantiocollum, foram obtidos de híbridos de Eucalyptus grandis x Eucalyptus  urophylla, coletados em Tocantins/Brasil, apresentando sintomas de cancro no lenho e sinais  de corpos de frutificação na casca da árvore. O fungo foi caracterizado baseado em sua morfologia e em sequencias das regiões ITS (Internal Transcribed Spacer), β-tubulina e LSU  (Large Subunit of rDNA). Os isolados apresentaram sinais e sintomas característicos da  família Cryphonectriaceae. As análises filogenéticas demonstraram que estes isolados  encontrados em eucalipto, obtiveram separação de outros gêneros já descritos em  Cryphonectriaceae, com alto valor de suporte para os métodos de máxima verossimilhança,  máxima parcimônia e inferência bayesiana. O segundo artigo desenvolvido descreveu o  primeiro relato do fungo C. puriensis em T. mutabilis, conhecido popularmente como manacá  da serra. Os isolados foram coletados no Parque da Serra do Mar em São Luiz do Paraitinga  (SP) com sinais de corpos de frutificação na casca da árvore. Os isolados dos fungos  provenientes de T. mutabilis foram identificados com base na caracterização morfológica e  análise filogenética através dos métodos de Inferência Bayesiana e Máxima Parcimônia das  regiões ITS e β-tubulina. A morfologia dos isolados foi similar ao descrito para C. puriensis. As árvores filogenéticas apresentaram topologias similares e alto suporte para as regiões ITS e β-tubulina. Os isolados inoculados causaram cancro em sete clones de eucalipto e mudas de T.  mutabilis e T. granulosa, demonstrando que o fungo é patogênico para esses hospedeiros. Os  resultados demonstram a importância de coletas com maior abrangência em indivíduos da  ordem Myrtales a fim de estudar a diversidade genética de fungos da família  Cryphonectriaceae e a necessidade de incluir estes patógenos em programas de seleção de  clones de eucalipto resistentes a Aurantiocollum eucalypti e C. puriensis.

A eficiência do soro de leite no controle de fitonematoides já é conhecida. No entanto, pouco
se sabe sobre a composição e toxicidade dos compostos orgânicos voláteis (COVs) emitidos
pelo soro de leite contra estes patógenos. Assim, objetivou-se estudar o efeito in vitro dos COVs
produzidos pelo soro de leite contra juvenis de segundo estádio (J2) de Meloidogyne incognita;
caracterizar por meio da cromatografia gasosa acoplada à espectometria de massa (CG-MS) os
COVs emitidos pelo soro de leite; determinar a concentração letal média (CL50) das moléculas
majoritárias; avaliar o efeito destas moléculas na infectividade e reprodução de M. incognita e
avaliar o efeito das moléculas sobre eclosão de J2 de M. incognita. Nos testes in vitro o soro de
leite causou significativa (P < 0.05) imobilidade dos J2 em todas as quantidades testadas.
Quatro compostos identificados por GC-MS nas emissões do soro de leite apresentaram valores
de CL50 inferiores ao nematicida comercial Carbofuran, sendo eles: ácido acetico (142,95),
ácido octanoico (134,30), ácido isovalérico (236,08), e octanoato de etila (226,10). Além disso,
os compostos octanoato de etila e ácido acético na concentração de 1000 μg/mL causaram
reduções acima de 84 % na eclosão de J2, comparado à testemunha. A aplicação, como
fumigantes, em solo infestado com ovos de M. incognita, dos compostos ácido acético, ácido
octanóico e octanoato de etila, na dosagem de 1000 μg/L, reduziu em 96 % na reprodução do
nematoide. O soro de leite além de possuir efeito nematicida no solo infestado com M. incognita
emite COVs tóxicos a esses patógenos. Quatro das moléculas emitidas pelo soro de leite
também possuem potencial nematicida.

O biocarvão é um material obtido por pirólise de resíduos e quando aplicado ao solo tem sido relatado com potencial em melhorar as propriedades físicas, químicas e biológicas do solo, como a maior capacidade de retenção de água, aumento da CTC e comunidade microbiana, adsorção de compostos tóxicos, absorção de nutrientes e posteriores liberações para as plantas, indução de resistência contra patógenos, dentre outros. Diversas espécies de Bacillus são utilizadas para o controle biológico de doenças de plantas e na promoção de crescimento de plantas. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito sinérgico entre biocarvão e a mistura de Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis aplicados no substrato de cultivo na promoção de crescimento de plantas de tomate e na inibição de F. oxyporum f.sp. lycopersici raça 3. Os experimentos foram conduzidos na Embrapa Meio Ambiente, no Laboratório de Microbiologia Ambiental ―Raquel Ghini‖ e no Campo Experimental, localizada no município de Jaguariúna - São Paulo. Bacillus subtilis (FMCH002) e de Bacillus licheniformis (FMCH001) foram provenientes do produto comercial Quartzo® produzido pela Chr. Hansen (Valinhos, SP) e distribuído pela FMC Química do Brasil Ltda., o Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici raça 3 isolado 359 foi fornecido pela Sakata Seed Sudámerica e em todos os estudos foram utilizadas sementes da cultivar Santa Clara VF5600 e as mudas produzidas em bandejas de poliestireno expandido de 200 células. ara os ensaios de promo o de crescimento, tanto em rizotron, como em vasos de L e de mL, foi realizada mistura de biocarv o nas concentra es de , , , e v v e as plantas tratadas ou não com a mistura de Bacillus na concentração de 3 g/L do produto comercial. O efeito dos extratos de biocarvão e das suspensões de Bacillus spp. sobre inibição da germinação de microconídios de Fusarium foi avaliado sobre lâminas. Para a avaliação do efeito do biocarvão sobre a inibição do crescimento micelial, o pó fino de biocarvão foi adicionado ao meio de cultura BDA nas concentrações 0%, 5%, 10%, 15% e 20% (v/v), em seguida esterilizados e transferido um disco para o centro das placas. De uma forma geral, o biocarvão, com ou sem a aplicação da mistura de B. subtilis e B. licheniformis estimulou o crescimento das plantas. O desprendimento de CO2, o pH, a condutividade elétrica e a capacidade de retenção de água do solo foram diretamente proporcionais à concentração de biocarvão incorporada ao solo. A germinação de microconídios foi inibida tanto pelo aumento da concentração de extrato aquoso de biocarvão, como pela mistura de Bacillus subtilis e B. licheniformis. O aumento da concentração de biocarvão no meio de cultura estimulou o crescimento micelial de F. oysporum f. sp. lycopersici.

O fungo S. maydis (Berkeley) Sutton [Sin. Diplodia maydis (Berkeley) Saccardo] é um importante patógeno necrotrófico que causa tanto podridão de colmo quanto a podridão de espiga no milho. Similarmente, F. graminearum também é um patógeno importante do milho, causando a podridão de espiga orelha e de colmo de Gibberella (GER e GSR), mas também é um patógeno importante do trigo causando a doença conhecida como giberela (FHB). Essas doenças causam perdas econômicas significativas, não apenas devido à redução no rendimento de grãos, mas também podem reduzir o valor dos grãos colhidos devido à contaminação com micotoxinas. A presente tese investigou esses dois importantes patógenos, Stenocarpella maydis e Fusarium graminearum sendo estruturada em uma série de três estudos. No primeiro estudo, o objetivo principal foi estudar o processo infeccioso por S. maydis em colmos de milho utilizando diferentes técnicas de microscopia. Plantas de dois híbridos de milho, 30F53 e DKB 390 foram cultivadas em casa de vegetação e inoculadas com uma suspensão de conídios do patógeno na concentração de 5 x 105 conídios / mL na fase de crescimento V6. Após a inoculação, amostras de colmo foram coletadas às 0, 12, 18, 24, 36, 48, 72 e 96 horas após a inoculação e aos 14 e 21 dias após a inoculação, preparadas seguindo metodologia padrão e, em seguida, visualizadas em microscópio laser confocal e microscópio eletrônico de varredura. As imagens geradas permitiram visualizar a colonização dos caules pelo fungo, o que contribui para futuros estudos de interação com patógenos. O segundo estudo teve como objetivo avaliar os efeitos dos óleos essenciais extraídos de Cinnamomum zeylanicum, Copaifera langsdorffii, Origanum vulgare, Cymbopogon martinii e Melaleuca alternifolia nas doses de 0,25, 0,50, 0,75 e 1,00% no crescimento micelial de S. maydis in vitro. Além disso, os melhores óleos e concentrações foram utilizados no tratamento de sementes de milho para determinar seus possíveis efeitos na saúde e fisiologia das sementes. Verificou-se que os óleos de C. zeylanicum e O. vulgare foram capazes de inibir o crescimento micelial fúngico em concentrações superiores a 0,5% em níveis semelhantes ao tratamento padrão com fungicida. O óleo de O. vulgare apresentou melhor desempenho na redução da incidência de S. maydis nas sementes inoculadas em comparação com C. zeylanicum e no tratamento com fungicida. O óleo de C. zeylanicum a 0,75% apresentou taxas de germinação de sementes de 92,4% superiores às do controle não tratado e do controle tratado com fungicida. Em contraste, o óleo de O. vulgare nas duas concentrações testadas apresentou efeitos na fisiologia das sementes de milho. Por fim, o terceiro estudo desta dissertação teve como objetivo investigar o papel dos genes de ‘mating-type’ na patogenicidade de F. graminearum em trigo. Para tal, foram utilizados mutantes knockout (KOs), cada um dos MAT1, MAT1-1-1 e MAT1-2-1 no isolado padrão de F. graminearum (PH-1). Como esperado, todos os KOs perderam sua capacidade de produzir ascósporos. No entanto, quando o MAT1-1-1 KO foi pareado com o MAT1-2-1 KO, formaram peritécios férteis. A maioria dos mutantes (mas não todos) dos genes de especificidade individual resultou em reduções na agressividade e, na maioria dos casos, na produção de DON. Não houve redução consistente da agressividade nos mutantes da MAT. Em resumo, os três trabalhos desta tese fornecem novos conhecimentos para entender o ciclo de vida e também manejar esses importantes patógenos no Brasil e no mundo. 

O gênero Chrysoporthe, pertencente à família Cryphonectriaceae (filo Ascomycota), 3 é comumente associado a doença do cancro em eucalipto em regiões tropicais e 4 subtropicais. Anterior ao desenvolvimento de diversos estudos, o cancro era associado 5 apenas a Chrysoporthe cubensis em plantas de Eucalyptus spp. Gryzenhout et al. (2004) 6 estudaram sequências de DNA da região ITS e beta-tubulina que comprovaram as 7 diferenças filogenéticas entre gêneros, principalmente usando a região beta-tubulina 8 (GRYZENHOUT et al., 2004). 9 Atualmente o cancro pode ser associado a nove espécies de Chrysoporthe e vários 10 hospedeiros, incluindo plantações de eucalipto e plantas nativas em florestas e 11 arborização urbana. Entre as espécies descritas estão C. cubensis (GRYZENHOUT et 12 al., 2004; RODAS et al., 2005;), C. doradensis, C. inopina e C. hodgesiana ocorrendo 13 em países da América Central e do Sul (GRYZENHOUT et al., 2005; GRYZENHOUT 14 et al., 2009). Já o C. doradensis foi relatado ocorrendo no Sudeste Asiático, assim como 15 no em regiões do Leste da África, Austrália, China e Havaí (NAKABONGE et al., 16 2006; VAN DER MERWE et al., 2010). Em Zâmbia foram identificadas as espécies C. 17 zambiensis, C. syzygiicola (CHUNGU et al., 2010), enquanto que no sul da África a 18 espécies C. austroafricana foi relatada como agente causal do cancro (GRYZENHOUT 19 et al., 2009). No Brasil, recentemente uma nova espécie foi identificada e descrita 20 afetando apenas plantas de Tibouchina spp., denominada C. puriensis (OLIVEIRA, 21 2018). No território brasileiro, apenas três espécies de Chrysoporthe foram relatadas, até 22 o momento, sendo essas C. cubensis (HODGES, 1980; BARRETO et al., 2006; 23 SOARES et al., 2018; OLIVEIRA, 2018), C. doradensis (SOARES et al., 2018) e C. 24 puriensis (OLIVEIRA, 2018). 25 Os principais hospedeiros deste fungo são pertencentes às famílias botânicas 26 Melastomataceae e Myrtaceae, como Eucalyptus spp., Tibouchina spp., Miconia spp., 27 Syzygium spp., entre outras (GRYZENHOUT et al., 2006). E o processo infeccioso 28 provoca nas plantas rachaduras ao longo da casca, cancro basal, lesão profunda 29 margeada por calos, em galhos leva a morte progressiva de ramos, folhas e brotos, 30 denominado “dieback” e anelamento em plantios jovens. Além disso ocorre à redução 31 na resistência desses tecidos doentes, a planta se torna mais susceptível ao vento, 32 podendo quebrar nos locais de infecção (SEIXAS et al., 2004; GRYZENHOUT et al., 33 2006; NAKOBONGE et al., 2006; WILCKEN et al., 2008). Devido as alterações que o 2 34 fungo causa, principalmente, no tronco da planta ocorre perda no valor comercial da 35 madeira de plantios comerciais, porém em plantios jovens ocorre a perda do plantio, 36 devido ao anelamento das árvores provocar sua morte. 37 Contudo, a identificação correta e precisa de espécies de Chrysoporthe auxilia 38 no emprego de métodos de controle bem como no melhoramento de espécies de 39 interesse comercial. A técnica mais eficiente de identificação para essas espécies é por 40 meio de comparações das sequências de DNA (GRYZENHOUT et al., 2004; VAN 41 DER MERWE et al., 2013), pois a diferença morfológica entre espécies de 42 Chrysoporthe são muito sutis, sendo muitas vezes difícil de distinguir os gêneros da 43 própria família Cryphonectriaceae (GRYZENHOUT; WINGFIELD, 2009). Assim, o 44 sequenciamento de DNA, principalmente das regiões gênicas de beta-tubulina e do 45 espaçador interno transcrito (ITS) (CHUNGU et al., 2010; CHEN et al., 2013; CHEN et 46 al., 2016; SOARES et al., 2018), vem sendo bastante utilizado na identificação de 47 espécies já existentes e também na descrição de novas espécies do gênero 48 Chrysoporthe. 49 No Brasil, ainda se conhece pouco sobre a distribuição geográfica, hospedeiros 50 nativos e de florestas plantadas, patogenicidade e a diversidade de espécies de 51 Chrysoporthe. Novos estudos são necessários para se conhecer as espécies deste fungo 52 descritas e ajudar a identificar as espécies ainda não descritas presentes no território 53 brasileiro, bem como seus hospedeiros. Também é necessário investigar a presença de 54 uma ou mais espécies deste gênero em um único hospedeiro, buscando saber se o 55 cancro é causado por apenas uma espécie ou por um complexo de espécies de 56 Chrysoporthe. A realização desses estudos pode contribuir para ampliar o conhecimento 57 sobre a diversidade genética de Chrysoporthe, plantas nativas que podem servir como 58 fonte de inóculo em áreas próximas a plantios comerciais, potencial patogênico dessas 59 espécies a Eucalyptus, apontando variedades resistentes e suscetíveis, e então contribuir 60 para programas de melhoramento genético de eucaliptos.

As doenças de plantas constituem obstáculos à produção global de alimentos, exigindo estratégias de controle aos agentes causais. Dentre as estratégias usadas estão os pesticidas químicos. No entanto, o uso excessivo dessas moléculas tóxicas na agricultura causam sérios problemas ambientais. Daí a necessidade de estratégias alternativas e sustentáveis para o manejo de doenças de plantas, como por exemplo, o uso de compostos naturais e agentes biológicos. Neste trabalho, estudou-se a atividade de 12 análogos de chalconas contra o nematoide das galhas Meloidogyne incognita. Três deles mostraram forte ação nematicida e nematostática conta juvenis de segundo estádio de M. incognita. A chalcona (1E,4E)-1,5-di(4-nitrofenil)-2-butilpenta-1,4-dien-3-ona (composto 6) apresentou maior atividade nematicida do que o nematicida comercial Carbofuran, e quando aplicada em tomateiros infestados, reduziu no número de galhas e ovos do nematoides em 51% e 68%, respectivamente. Em estudo in silico, esta chalcona atua, presumivelmente, inibindo a enzima citocromo P450, que é importante na oxidação de diversas substâncias na fisiologia do nematoide. Ainda neste trabalho, estudou-se a sequência genômica completa da estirpe Bacillus velezensis UFLA258, que é um agente de controle biológico de patógenos vegetais, desde a sua obtenção, seguida da montagem e anotação. Adicionalmente, usando uma abordagem genomica comparativa, realizaram-se avaliações in silico com todos os genomas completos de B. velezensis disponíveis no banco de dados, mais os genomas das espécies próximas Bacillus amyloliquefaciens e Bacillus siamensis. Assim, o genoma de B. velezensis UFLA258 consiste em um único cromossomo de 3,95 Mbp de comprimento, com um teor médio de GC de 46,69%. Contém 3.949 genes codificadores de proteína e 27 genes de RNA. Análises baseadas na identidade média dos nucleotídieos (ANI), hibridização DNA-DNA (dDDH) e filogenia com sequências completas do gene rpoB confirmaram-se que 19 cepas depositadas no banco de dados como B. amyloliquefaciens eram de fato B. velezensis. Embora essas espécies sejam filogeneticamente próximas, as análises combinadas de várias características genômicas, como presença de genes biossintéticos codificadores de metabólitos secundários, arranjos CRISPr/Cas, ANI, dDDH, e outras informações sobre as cepas, incluindo fonte de isolamento, permitiram sua classificação inequívoca como estas três espécies. Esta análise genômica amplia o conhecimento sobre as espécies aparentadas, B. velezensis, B. amyloliquefaciens e B. siamensis, com ênfase no status taxonômico.

Meloidogyne paranaensis é uma das principais espécies de nematoide que parasitam o
cafeeiro, sendo o controle genético utilizado como a principal forma de manejo. O objetivo do
trabalho foi caracterizar a resistência do genótipo 16-6-1, derivado do germoplasma silvestre
Amphillo de Coffea arabica, à M. paranaensis. A penetração, estabelecimento do sítio de
alimentação, desenvolvimento e reprodução de M. paranaensis no genótipo resistente foi
comparado com a cultivar suscetível Catuaí Vermelho IAC 144. Houve penetração de juvenis
de segundo estádio (J2) em ambas as raízes, porém nas raízes de 16-6-1 isso aconteceu de
forma mais lenta e em menor número. A forte fluorescência azul observada no genótipo
resistente, mas não no suscetível, sugere que as respostas de resistência ocorreram aos 2 dias
após a inoculação (DAI). As respostas de defesa tardias envolveram a degradação da célula
gigante aos 14 DAI no genótipo resistente, enquanto o desenvolvimento de nematoides e
células gigantes progrediu normalmente na cultivar suscetível. Estes resultados sugerem que a
resistência do genótipo 16-6-1 está relacionada a respostas de defesa iniciais e tardias. A
caracterização metabólica do genótipo 16-6-1 também foi realizada através da técnica de
ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN de 1H). A principal diferença observada
foi a maior concentração de sacarose aos 8 e 14 DAI no genótipo 16-6-1, o que sugere que a
sacarose está envolvida na resistência desse genótipo a M. paranaensis. Dentre as estratégias
de manejo disponíveis para fitonematóides, o controle químico destaca-se como ferramenta
importante devido a sua boa eficiência. O fluopyram é um fungicida desenvolvido pela Bayer
Crop Science e atua contra fungos fitopatogênicos inibindo a enzima succinato desidrogenase.
Essa molécula também possui ação nematicida. Acredita-se que o mecanismo de ação desta
substância contra nematoides fitoparasitas seja o mesmo, porém há poucas evidências que
suportam esta informação. Neste estudo, o objetivo foi identificar in silico o alvo enzimático
do fluopyram em Meloidogyne spp. As estruturas do fluopyram foram desenhadas utilizando
o programa ChemSketch. Depois estas estruturas foram submetidas a buscas conformacionais
com o software Open3Dalign, e as conformações mais estáveis foram otimizadas utilizando o
Mopac. As conformações de menores energias foram submetidas a buscas farmacofóricas
com o software Lisica, utilizando o banco de dados do Ligand Expo, para selecionar ligantes
de proteínas depositadas no RCSB Protein Data Bank. A enzima 4L93 (proteína do choque
térmico 90 – HSP90) foi selecionada como possível alvo do fluopyram em Meloidogyne spp.
Em seguida, utilizando o programa Autodock Vina, foi realizado um estudo da interação entre
o fluopyram e as estruturas tridimensionais selecionadas da enzima HSP90: 2JJC, 2QG0,
2VCI, 4FCP, 4L93. Foi observado que as afinidades do fluopyram pelas enzimas eram
similares às afinidades dos inibidores desta enzima. Logo, os resultados indicam que o alvo
enzimático do fluopyram em Meloidogyne spp. é a enzima HSP90.

O Brasil é o maior produtor de café arábica do mundo e as doenças são umas das principais causas de perdas na produção dos cafeeiros. Na América Central e no México, a ferrugem (Hemileia vastatrix) causou perdas progressivas na produção de até 45% nas safras de 2011 a 2014, desencadeando em crise socioeconômica para esses países. Entretanto as principais cultivares plantadas nas lavouras pertencem a genótipos suscetíveis à ferrugem e à cercosporiose. Visando reduzir tanto o inóculo inicial como a taxa de progresso dessas doenças, os agricultores devem fazer o uso de manejo integrado de doenças. Dessa forma foram realizados três experimentos, um (1) em casa de vegetação e dois (2) no campo, com o intuito de verificar a epidemiologia e forma de controle, cultural e química para a ferrugem e cercosporiose do cafeeiro. No primeiro experimento, objetivou-se avaliar a interação de cinco doses de fósforo (0,1, 0,5, 1, 2 e 4 mmol L^-1) combinadas com cinco doses de boro (0,1, 0,5, 1, 2 e 4 mmol L^-1). Os dados da incidência e severidade foram integralizados em Área Abaixo da Curva de Progresso da Incidência e Severidade da Cercosporiose (AACPIC) e (AACPSC), foram avaliados o peso seco das amostras e o teor foliar dos nutrientes. Observou-se interação significativa entre o P e o B e as menores intensidades da doença foram encontradas nas doses 2,0 mmol L^-1 de P e 2,0 mmol L^-1 de B. O maior peso das plantas secas (5,7 g planta^-1) foi encontrado na menor dose de P (0,1 mmol L^-1), além disso, o suprimento de P e B influenciaram a quantidade de P, Cu, Fe, Ca e B foliar. No segundo experimento o objetivo do trabalho foi avaliar a severidade da cercosporiose em cafeeiro submetido a diferentes manejos de irrigação por gotejamento e adubação. A cultivar avaliada foi MGS Travessia. As avaliações da doença foram realizadas entre março de 2012 a junho de 2014. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com 12 tratamentos. Os tratamentos de irrigação foram: controle sem irrigação (SI), irrigação ao longo do ano (IT), suspensão da irrigação por 30 dias em julho (I30) e 70 dias entre julho a setembro (I70). Os tratamentos de fertilização foram: recomendação segunda a análise de solo (A), alta taxa de N e K mais P (B) e alta taxa de N e K sem o fósforo (C). A severidade da doença foi integrada em (AACPD). Houve diferença para AACPD nos anos avaliados, refletindo a característica bienal da lavoura cafeeira. Não houve interação significativa entre irrigação e fertilização. No entanto, quando os tratamentos de irrigação e fertilização foram analisados separadamente, a suspensão da irrigação por 70 dias entre julho e setembro de 2012 favoreceu a cercosporiose no mesmo ano em que as altas taxas de N e K aumentaram a produtividade. E no terceiro experimento, objetivou-se avaliar o efeito de misturas de fungicidas no manejo da resistência de fungos e verificar o fornecimento de manganês e zinco via Mancozeb. O ensaio foi implantado em duas áreas nos anos de 2017 e 2018 e foram avaliados 6 tratamentos. Foram realizadas cinco avaliações da ferrugem, cercosporiose e enfolhamento em cada ano de avaliação. Os dados foram integralizados em Área Abaixo da Curva de Progresso da Ferrugem (AACPF), cercosporiose (AACPC) e enfolhamento (AACPE). Os fungicidas controlaram as doenças e proporcionaram maior enfolhamento do cafeeiro. O fungicida Mancozeb + Azoxistrobina + Ciproconazol forneceram manganês e zinco foliar. As maiores produtividades ocorreram nos fungicidas Mancozeb + Azoxistrobina + Ciproconazol na dose 2,5 Kg ha^-1 e Piraclostrobina+Epoxiconazol na dose 1,5 L ha^-1 no ano 2018 e média dos anos 2017/18. 

A capacidade do Clonostachys rosea agir como agente de controle biológico de doenças e de pragas, bem como promover o crescimento de plantas, é amplamente conhecido. Entretanto, um dos maiores desafios para o desenvolvimento de produtos à base deste antagonista é a sua produção em massa. Atualmente a sua produção é realizada por meio de fermentação em estado sólido, consumindo muito espaço, tempo e intensa mão de obra. A utilização da fermentação em estado líquido visa sanar esse gargalo. O objetivo com este deste trabalho foi realizar a otimização de diferentes combinações entre variáveis que interferem no processo de fermentativo em meio submerso visando aumentar a concentração de conídios produzidos no meio de cultivo, das unidades formadoras de colônia (UFC), microescleródios e da biomassa fúngica seca. E ainda comprovar a eficácia dos propágulos de C. rosea produzidas via fermentação líquida no controle de algumas doenças e pragas de grande importância na agricultura nacional (Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotiorum e Bemisia tabaci). Inicialmente foi realizado um ensaio utilizando delineamento experimental de Plackett-Burman, estudando a interação entre seis variáveis do meio de cultivo, que são relação C:N, carbono total do meio, pH, inóculo inicial e as concentrações de Ca e Fe. Em seguida a otimização das condições de cultivo foi realizada com o Delineamento Central Composto Rotacional (DCCR), com três as fontes de nitrogênio (extrato de levedura, farelo de algodão e ureia) e variando o pH durante a fermentação. As duas primeiras etapas foram realizadas em Erlenmeyers de 250 mL com três defletores basais, nos quais foram adicionados 90 mL dos diferentes meios esterilizados e 10 mL de inóculo. A etapa final de fermentação foi realizada em biorreatores automatizados de bancada de 3 L (Eppendorf^®, BioFlo 115, Alemanha). A maior concentração média obtida de conídios via fermentação líquida foi de 7,87 x 10⁸ conídios mL^-1 com 120 horas de fermentação. Na fermentação sólida utilizando grãos de arroz, o valor médio máximo obtido após 30 dias de fermentação foi de 1,87 x 10⁹ g^-1. O agente de controle biológico conseguiu controlar de maneira significativa todas as doenças e pragas testadas. Não havendo diferença estatística entre as formas de produção dos propágulos de C. rosea testados.

O gênero Bacillus, por possuir uma diversidade de mecanismos de ação, é amplamente utilizado como agente de biocontrole de doenças de plantas. O presente trabalho objetivou avaliar a eficiência de Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis na promoção de crescimento e no controle da murcha de Fusarium causada por Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL) raça 3. Para avaliar a promoção de crescimento, mudas de tomate (CV Santa Clara^®) foram transplantadas para rizotrons (100 cm x 17,5 cm). Um produto comercial à base de B. subtilis e B. licheniformis (Quartzo^®) foi aplicado nas concentrações de 1x10¹⁰, 1x10⁹, 1x10⁸ UFC mL^-1, além de células dos isolados de B. subtilis e de B. licheniformis (1x10⁸ UFC mL^-1), isoladamente. O ensaio foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado com cinco repetições, no qual foram avaliados: altura da planta, diâmetro da base da haste, massa fresca e seca da parte aérea e da raiz, volume e comprimento da raiz e clorofila. Para o controle da murcha de Fusarium, mudas de tomate com 20 dias foram transplantadas para vasos com substrato infestado com FOL (2x10⁵ conídios g^-1 substrato). Os estudos foram divididos em duas partes, na primeira, o controle foi avaliada a mistura de B. subtilis e de B. licheniformis (1x10¹⁰ UFC mL^-1) e no segundo, os Bacillus aplicados separadamente (1x10⁸ UFC mL^-1). Os experimentos foram instalados em blocos casualizados e repetidos por duas vezes. A altura das plantas, o diâmetro das hastes, massa fresca e seca da parte aérea e das raízes, e os sintomas internos e externos da doença foram avaliados. Além disso, também foram avaliadas as atividades das enzimas peroxidase (POX) e polifenoloxidase (PPO) e proteínas totais em ensaios conduzidos em bandejas com concentrações crescentes da mistura de B. subtilis e de B. licheniformis. Os Bacillus, aplicados em mistura ou isoladamente, promoveram o crescimento das plantas, especialmente o das raízes.  A mistura B. subtilis e de B. licheniformis (Quartzo^®) não controlou a murcha de Fusarium. Os isolados de B. subtilis e de B. licheniformis aplicados separadamente também não controlaram a doença, mas reduziram os sintomas nas plantas tratadas, permitindo maior desenvolvimento das plantas. Na coleta das folhas realizada 24 h após a inoculação do patógeno e a aplicação da mistura de B. subtilis e de B. licheniformis na concentração 1x10¹⁰ UFC mL^-1 foi observada maior atividade para PPO e para a concentração de 1 x 10⁸ UFC mL^-1 maior atividade da POX. A mistura de B. subtilis e de B. licheniformis apresentaram efeito positivo na promoção de crescimento de plantas de tomate, podendo aumentar a produtividade das lavouras.

Sendo considerada um dos principais insumos agrícolas é de fundamental importância a escolha de uma semente de qualidade fisiológica e sanitária. A quantificação do potencial de inóculo de agentes fitopatogênicos nas sementes pode permitir estimar um padrão de desenvolvimento de doença no campo. Objetivou-se neste estudo avaliar o grau de variação entre sementes individuais dentro de um mesmo lote e entre lotes comerciais com base na qualidade sanitária, representada pelo potencial de inóculo de Drechslera oryzae e Phomopsis sojae em sementes de arroz e soja. Os lotes de sementes foram selecionados baseados na porcentagem de ocorrência dos fungos de interesse, verificados por meio de Blotter test. A intensidade de colonização dos fungos na superfície das sementes foi realizada utilizando Blotter test com a adição de Manitol a -1,2 MPa e -1,0 para soja, dando origem a uma escala de notas onde se estabeleceu: 1 sem a presença do patógeno,2 até 10% de cobertura fúngica, 3 para sementes com cobertura entre 10% e 50% e nota 4, para sementes com cobertura fungica acima de 50%. Após o período de avaliação as sementes foram selecionadas e colocadas para secar em ambiente natural por 48 horas. Decorrido esse tempo foram submetidas a analises de germinação padrão, envelhecimento acelerado, condutividade elétrica, emergência em substrato e avaliação da transmissão. 

O vírus do amarelo do broto da soja (Soybean yellow shoot virus-SoyYSV) tem alto potencial de causar danos severos às lavouras, representando uma ameaça à produção de soja no Brasil. Recentemente, o SoyYSV foi sequenciado e os análises moleculares indicaram que se trata de uma nova espécie pertencente à famila Potyviridae. O SoyYSV possui uma ampla gama de hospedeiras e causa lesões locais induzidas em folhas de Carica papaya e Chenopodium quinoa. Objetivou-se nesse estudo avaliar os efeitos das proteínas P1, HCPro, CP e Vpg do SoyYSVem uma hospedeira alternativa Carica papaya , para o entendimento dos mecanismos moleculares que envolvem os processos de infecção viral é importante conhecer a localização subcelular das proteínas virais na célula hospedeira e a sua possível atividade de supressão de silencimento gênico. Para atender a essas demandas, os genes que codificam algumas proteínas virais do SoyYSV denominadas P1, HCPro, CP e Vpg, foram clonadas no plasmídeo “entry clone” do sistema Gateway (PDONR221). Após a clonagem, foi subclonado no vetor de expressão pSITE fusionado à proteína fluorescente GFP e expressadas via Agrobacterium tumefasciens em plantas de Carica papaia. Após a análise das plantas infiltradas, acoplada a observações de microscopia de epiflorescência, proteínas Vpg e CP se localizaram nas nervuras de folhas jovens das plantas agroinfiltradas. Teste de RT-PCR evidenciaram atividade sistêmica das proteínas P1, HCPro, CP e Vpg,. Tais resultados contribuiram para a melhor compreensão dos mecanismos e funções das proteínas do SoyYSV no processo de infecção em diferentes tipos de hospedeiros. Por outra parte, no segundo experimento um dos problemas encontrados em campos de mamoeiro é a presença de viroses, representando o principal grupo de doenças da cultura, ocasionando grandes perdas, sendo o Papaya ringspot virus (PRSV-P) ocupando lugar de destaque, Dentre as estratégias de manejo mais empregadas para seu controle e diminuir a incidência, a construção de plantas transgênicas resistentes ao PRSV-P e a proteção cruzada com estirpes fracas do vírus são consideradas promissoras, porém são dependentes do grau de similaridade entre os isolados de cada região .Desse modo, objetivou-se nesse trabalho fazer a caracterização molecular da P1 de isolados do PRSP-P coletados em mamoeiros de diferentes regiões do Brasil. Foram coletados alguns isolados em diferentes regiões do Brasil, que foram inoculados e mantidos em plantas de mamoeiro, sob condições de casa de vegetação, para extração do RNA total e realização da RT-PCR, empregando primers específicos para a região gênica P1. Os amplicons obtidos foram sequenciados e analisados com os programas CLUSTALW, MEGA blast, MEGA5 e RDP3 e comparados entre si e com outras sequencias de PRSV disponíveis no Genbank .

O Brasil ocupa a posição de maior produtor, consumidor e exportador de sementes forrageiras, porém encontra dificuldades na comercialização com outros países devido às barreiras fitossanitárias. De acordo com a literatura há poucas informações sobre a qualidade sanitária de sementes forrageiras produzidas e comercializadas no Brasil. Portanto, o objetivo foi avaliar os efeitos dos dois isolados de Bipolaris sp., na germinação e vigor das sementes de B. brizantha cv. Marandu e a transmissão e o desempenho das sementes infectadas por esses patógenos em função do potencial de inóculo e temperatura de cultivo. Dois isolados de Bipolaris, LAPS808 e LAPS809, coletados de regiões distintas no Brasil foram caracterizados através de morfologia e por técnicas moleculares com finalidade de confirmação e inoculados em sementes de B. brizantha em diferentes potenciais de inóculo. Pelos resultados observouse diferenças significativas de comportamento entre os dois isolados, sendo a temperatura, a condutividade elétrica e nível de potencial de inóculo dos fungos os fatores que mais influenciaram no desempenho das sementes, avaliado pelas variáveis, vigor (IVE), peso, taxa de germinação e incidência. Pelos resultados obtidos, foi possível identificar os isolados fúngicos e verificar diferenças de agressividade entre eles, além de demonstrar a transmissão e efeitos danosos destas interações a partir de sementes. 

O Brasil é o maior produtor de café arábica do mundo e as doenças são umas das principais causas de perdas na produção dos cafeeiros. Na América Central e no México, a ferrugem (Hemileia vastatrix) causou perdas progressivas na produção de até 45% nas safras de 2011 a 2014, desencadeando em crise socioeconômica para esses países. Entretanto as principais cultivares plantadas nas lavouras pertencem a genótipos suscetíveis à ferrugem e à cercosporiose. Visando reduzir tanto o inóculo inicial como a taxa de progresso dessas doenças, os agricultores devem fazer o uso de manejo integrado de doenças. Dessa forma foram realizados três experimentos, um (1) em casa de vegetação e dois (2) no campo, com o intuito de verificar a epidemiologia e forma de controle, cultural e química para a ferrugem e cercosporiose do cafeeiro. No primeiro experimento, objetivou-se avaliar a interação de cinco doses de fósforo (0,1, 0,5, 1, 2 e 4 mmol L^-1) combinadas com cinco doses de boro (0,1, 0,5, 1, 2 e 4 mmol L^-1). Os dados da incidência e severidade foram integralizados em Área Abaixo da Curva de Progresso da Incidência e Severidade da Cercosporiose (AACPIC) e (AACPSC), foram avaliados o peso seco das amostras e o teor foliar dos nutrientes. Observou-se interação significativa entre o P e o B e as menores intensidades da doença foram encontradas nas doses 2,0 mmol L^-1 de P e 2,0 mmol L^-1 de B. O maior peso das plantas secas (5,7 g planta^-1) foi encontrado na menor dose de P (0,1 mmol L^-1), além disso, o suprimento de P e B influenciaram a quantidade de P, Cu, Fe, Ca e B foliar. No segundo experimento o objetivo do trabalho foi avaliar a severidade da cercosporiose em cafeeiro submetido a diferentes manejos de irrigação por gotejamento e adubação. A cultivar avaliada foi MGS Travessia. As avaliações da doença foram realizadas entre março de 2012 a junho de 2014. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com 12 tratamentos. Os tratamentos de irrigação foram: controle sem irrigação (SI), irrigação ao longo do ano (IT), suspensão da irrigação por 30 dias em julho (I30) e 70 dias entre julho a setembro (I70). Os tratamentos de fertilização foram: recomendação segunda a análise de solo (A), alta taxa de N e K mais P (B) e alta taxa de N e K sem o fósforo (C). A severidade da doença foi integrada em (AACPD). Houve diferença para AACPD nos anos avaliados, refletindo a característica bienal da lavoura cafeeira. Não houve interação significativa entre irrigação e fertilização. No entanto, quando os tratamentos de irrigação e fertilização foram analisados separadamente, a suspensão da irrigação por 70 dias entre julho e setembro de 2012 favoreceu a cercosporiose no mesmo ano em que as altas taxas de N e K aumentaram a produtividade. E no terceiro experimento, objetivou-se avaliar o efeito de misturas de fungicidas no manejo da resistência de fungos e verificar o fornecimento de manganês e zinco via Mancozeb. O ensaio foi implantado em duas áreas nos anos de 2017 e 2018 e foram avaliados 6 tratamentos. Foram realizadas cinco avaliações da ferrugem, cercosporiose e enfolhamento em cada ano de avaliação. Os dados foram integralizados em Área Abaixo da Curva de Progresso da Ferrugem (AACPF), cercosporiose (AACPC) e enfolhamento (AACPE). Os fungicidas controlaram as doenças e proporcionaram maior enfolhamento do cafeeiro. O fungicida Mancozeb + Azoxistrobina + Ciproconazol forneceram manganês e zinco foliar. As maiores produtividades ocorreram nos fungicidas Mancozeb + Azoxistrobina + Ciproconazol na dose 2,5 Kg ha^-1 e Piraclostrobina+Epoxiconazol na dose 1,5 L ha^-1 no ano 2018 e média dos anos 2017/18. 

O café é uma das culturas que mais se destacam no Brasil, em âmbito social e econômico. Vários são os entraves à produção cafeeira, destacando-se as doenças. A mancha de Phoma, cujo agente etiológico é o fungo Phoma tarda, causa consideráveis perdas em lavouras cafeeiras de elevadas altitudes. Os prejuízos podem ocasionar redução na produtividade de até 43%, devido à queda de folhas, seca de ramos e mumificação de frutos. A busca por produtos eficazes no controle da doença, em substituição aos fungicidas, e que apresentem baixo impacto ao meio  mbiente, vem crescendo gradativamente. Diante disso, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de nutrientes foliares associados ao etilfosfonato de cobre e fungicidas no manejo da mancha de phoma do cafeeiro.
Foram realizados 2 experimentos, um em campo e outro em casa de vegetação. Em condições de campo, o  delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados (DBC) com 4 blocos, 8 tratamentos associados à nutrição foliar (presença e ausência) constituindo assim um esquema fatorial 8x2. Os tratamentos foram: T1 (testemunha); T2 (etilfosfonato de cobre- EFCu); T3 (fosetil-Al- FAl); T4 (boscalida- BOS); T5 (iprodiona- IPRO); T6 (EFCu + FAl); T7 (EFCu + BOS); T8 (EFCu + IPRO). Foram avaliados a porcentagem de chumbinhos mumificados, incidência da doença, produtividade e aspectos físicos dos grãos. Para os chumbinhos mumificados, todos os tratamentos diferiram da testemunha, sendo que EFCu + FAl, EFCu + BOS e EFCu + IPRO promoveram controle de 67, 75 e 77% respectivamente. A incidência da doença foi inferior em todos os tratamentos
associados a nutrição, com exceção do EFCu + FAl. Todos os tratamentos sem associação com nutrição promoveram o controle da doença. Em relação à produtividade, os tratamentos BOS, EFCu + FAl, EFCu + BOS e EFCu + IPRO diferiram da testemunha, promovendo um incremento de 6, 13, 12 e 8 sacos/ha, respectivamente. Dados para os aspectos físicos dos grãos ainda estão sob análise. O experimento em casa de vegetação foi conduzido em delineamento de blocos casualizados (DBC), com 4 repetições e quatro plantas por parcela. Os tratamentos foram: T1 (testemunha); T2 (etilfosfonato de cobre- EFCu); T3 (boscalida- BOS); T4 (EFCu + BOS), escolhidos por apresentarem melhores resultados de controle da mancha de phoma em condições de campo. Foram avaliados a atividade enzimática da fenilalanina amôniliase (PAL), peroxidase (POX), polifenol
oxidase (PPO), o teor de compostos fenólicos e lignina, o teor de clorofila a e b, bem como a altura de plantas. Os dados ainda se encontram sob análise.

A mancha aureolada, causada por Pseudomonas syringae pv. garcae (Psg), é a principal
doença de etiologia bacteriana do cafeeiro (Coffea arábica L.) no Brasil. Além desta
bacteriose, ocorrem a mancha bacteriana (P. syringae pv. tabaci - Psta), o crestamento
bacteriano (P. cichorii - Pc) e a mancha escura (Burkholderia andropogonis - Ba). O
diagnóstico dessas doenças é problemático, pois é baseado em sintomas e testes
bioquímicos que não são suficientes para a identificação dos patógenos aos níveis de
espécie e patovar. Além disso, não existem ainda descritos na literatura primers
específicos para a detecção de Psg. Sendo assim, os objetivos com este trabalho foram o
desenvolvimento de primers específicos para detecção de Psg e de primers para
detecção simultânea de Psg, Psta e Pc. Para isso, primers foram desenvolvidos baseados
no alinhamento de sequências do gene rpoD, que codifica para a síntese da RNA
polimerase. A especificidade dos pares de primers PsgRpod F1/PsgRpod R2 e PsgRpod
F1/ PgtcRpod R1 foi testada com os DNAs de Psg, Psta, Pc, além de isolados
representativos de outros gêneros e espécie. Os primers PsgRpod F1/PsgRpod R2 foram
específicos para Psg e amplificaram uma única banda de 287 pb. Os primers PsgRpod
F1/ PgtcRpod R1 amplificaram fragmentos de tamanhos diferentes para Psg, Pc e Psta,
possibilitando a detecção das três bactérias simultaneamente. A sensibilidade da reação
de PCR para os primers PsgRpod F1/PsgRpod R2 foi de 100 pg. Ambos os pares de
primers foram eficientes na detecção de Psg, Pc e Psta em mudas de cafeeiro inoculadas
e amostras de folhas coletadas no campo. Os primers desenvolvidos nesse estudo
possibilitarão a correta identificação e diferenciação dessas bactérias causadoras de
manchas foliares em cafeeiro e poderão ser utilizados em análises de rotina na diagnose
destas bacterioses, além de facilitar o monitoramento e o estudo epidemiológico dessas
doenças bacterianas nas regiões produtoras de café.

O vírus do amarelo do broto da soja (Soybean yellow shoot virus-SoyYSV) tem altopotencial de causar danos severos às lavouras, representando uma ameaça à produção desoja no Brasil. Recentemente, o SoyYSV foi sequenciado e os analises molecularesindicaram que se trata de uma nova espécie pertencente à famila Potyviridae. Assim sendo, para o entendimento dos mecanismos moleculares que envolvem os processos de infecção viral é importante conhecer a localização subcelular das proteínas virais na célula hospedeira e seu possível mecanismo de silencimento gênico de RNA. Para atender a essas demandas, os genes que codificam as proteínas virais do SoyYSV denominadas P1, HCPro, P3, PIPO, 6K1, NIa, NIb e CP, foram clonadas no plasmídeo “entry clone” do sistema Gateway (PDONR221). Após a clonagem, foi subclonado no vetor de expressão pSITE fusionado à proteína fluorescente GFP e expressadas via Agrobacterium tumefasciens em duas linhagens de plantas transgênicas de Nicotiana benthamiana que expressam a proteína fluorescente RFP, sendo que uma delas expressa no núcleo e a outra no reticulo endoplasmático. A análise das plantas infiltradas, acoplada a observações de microscopia confocal, mostrou que as proteínas P1, P3, Nia e Nib se localizaram no núcleo e no citoplasma; a proteína PIPO se localizou exclusivamente no citoplasma, enquanto que a HCPro acumulou-se no núcleo e a proteína CP na periferia nuclear e citoplasma. Este estudo de localização das proteínas do SoyYSV em planta hospedeira, mostrou ser uma ferramenta importante no auxílio da caracterização e função das proteínas. No caso do experimento, o objetivo do trabalho foi investigar a capacidade de supressão de algumas proteínas dos vírus: Soybean yellow shoot virus (SoyYSV), Turnip mosaic vírus (TUMV), Chinese yan necrotic mosaic vírus (CYNMV), Blackberry virus Y (BIVY) e Arepa palm necrotic ringspot virus (APNRV), todos pertencentes à familia Potyviridae. Para isso, as proteínas P1, HCPro e VPg desses vírus foram inseridas em plantas de Nicotiana benthamiana e observadas ao microscópio de epifluorescência.de atividade de silenciamento, nós utilizamos um clone infeccioso do Plum pox virus (PPV) inserindo as proteínas P1, HCPro e VPg do Soybean yellow shoot virus (SoyYSV) que poderiam cumprir essa função e relatadas como possíveis supressores de silenciamento de RNA (RSS) na familia Potyviridae. As construções foram testadas no contexto viral e através de expressão transiente em plantas de Nicotiana benthamiana via Agrobacterium tumefasciens. As imagens foram obtivas mediante microscopia de epifluorescência e as quantificações de fluorescência mediante fluorometria. Foram também feitas quantificações de fluorescência por fluorometria. Os resultados obtidos nesse trabalho não evidenciaram atividade de supressão de silenciamento de RNA (RSS) das proteínas testadas. Novos estudos visando conhecer o papel que desempenham as proteínas virais do SoyYSV quando estas estão associadas a outras proteínas do próprio vírus ou quando interagem com proteínas do hospedeiro, poderão complementar esse estudo.

O objetivo deste trabalho foi investigar quais espécies do complexo Fusarium solani – FSSC
estão associadas a cucurbitáceas no Brasil e quais delas causam podridão do colo, raízes e do
fruto, e relatar a ocorrência de espécies do complexo Fusarium chlamydosporum – FCSC e
Fusarium incarnatum-equiseti – FIESC, causando podridão em frutos de abóbora. Uma coleção
de 71 isolados (FSSC = 66, FCSC = 3, FIESC = 2) foi obtida dos estados de MG, RN, CE, MA,
PI, GO e RR. Isolados monospóricos do FSSC e FCSC foram submetidos a análises de filogenia
molecular das regiões gênicas EF-1α + RPB2 e os isolados do FIESC a análises de EF-1α +
LSU + RPB2 + CAM. Foram realizados ainda testes de homotalismo e determinação dos mating
types por PCR, cruzamentos em laboratório para indução da fase sexuada, e avaliação de
marcadores morfológicos. Isolados representativos foram utilizados em testes de patogenicidade
em plantas e frutos e na avaliação da transmissão de sementes a plantas. De acordo com a
análise filogenética de máxima parcimônia os isolados do FSSC agruparam em seis espécies
distintas dentro do clado 3: F. petroliphilum (FSSC 1), F. keratoplasticum (FSSC 2), F.
falciforme (FSSC 3+4), F. solani f. sp. cucurbitae (FSSC 10) e Neocosmospora suttoniana
(FSSC 20) representando espécies heterotálicas e ainda F. pseudensiforme (FSSC 33), uma
espécie homotálica. Na análise combinada para o FCSC, os isolados agruparam com as
linhagens FCSC 1 (n=2) e FCSC 2 (n=1). Para o FIESC, um isolado agrupou com F. lacertarum
e outro com nenhuma das 36 linhagens conhecidas do FIESC, sendo preliminarmente
denominada como FIESC 37. No teste de homotalismo, nenhum dos 66 isolados do FSSC
produziu peritécios espontaneamente. Foi possível induzir pela primeira vez a reprodução
sexuada de N. suttoniana em laboratório, utilizando isolados de cucurbitáceas e Passiflora.
Todas as espécies foram patogênicas a plantas de abóbora, sendo F. solani f. sp. cucurbitae a
espécie mais virulenta, provocando a morte das plantas de 5 a 10 dias após a emergência. Já os
isolados do FCSC e FIESC causaram sintomas de amarelecimento e redução do porte e sistema
radicular nas mudas de abóbora. Nos frutos, as maiores lesões foram causadas pelas espécies F.
solani f. sp. cucurbitae e N. suttoniana. A transmissão de semente a plântulas foi confirmada
para as seis espécies sendo que F. solani f. sp. cucurbitae foi a espécie que mais afetou as
sementes, reduzindo em até 82% a germinação e de 35% no vigor. Este é o primeiro relato das
espécies F. petroliphilum, F. keratoplasticum, F. solani f. sp. cucurbitae e F. pseudensiforme
em associação com cucurbitáceas no Brasil, e de F. keratoplasticum e F. pseudensiforme em
cucurbitáceas no mundo. Também é o primeiro relato da linhagem FCSC 2, de F. lacertarum e
linhagem FIESC 37 causando podridão de frutos em abóbora. Fusarium solani f. sp. cucurbitae
(FSSC 10) é elevado ao nível de espécie, Fusarium cucurbitae sp. nov.

RESUMO

As bactérias pectinolíticas causadoras de podridões moles são responsáveis por grandes
perdas econômicas no cultivo de uma variada gama de plantas hospedeiras, tanto no
campo como na comercialização, principalmente em regiões de clima quente e úmido.
Assim, o presente trabalho teve como objetivo identificar diferentes isolados de
bactérias causadoras de podridões moles em hortaliças, fruteira e algumas espécies
ornamentais por meio de testes bioquímicos, fisiológicos, moleculares e
sequenciamento da região 16S rDNA. Os ensaios foram realizados no Laboratório de
Fitopatologia da Embrapa Amazônia Oriental e no Laboratório de Bacteriologia de
Plantas do Departamento de Fitopatologia, da Universidade Federal de Lavras
(DFP/UFLA) entre os anos de 2017 e 2018. Foram obtidos 38 isolados de bactérias em
provenientes dos municípios dos Estados do Pará e Minas Gerais. As provas
bioquímicas e fisiológicas realizadas foram: Gram, catalase, oxidase, degradação de
Pectato, isca de biológica em tubérculo de batata e pimentão, anaerobiose, crescimento
a 37°C em meio NA, crescimento em meio YDC e sensibilidade à eritromicina. Na
técnica de reação em cadeia da polimerase foram utilizados os oligonucleotídeos
1491f/L1RA/L1RG para diferenciar Pectobacterium carotovorum de Dickeya
chrysanthemi, Br1f/L1RA/L1RG específicos para Pectobacterium carotovorum subsp.
brasiliensis e algumas estirpes de P. carotovorum subsp. carotovorum, ERWFOR e
CHRREV para identificação da espécie Dickeya chrysanthemi. E para o Nested-PCR
para detectar P. carotovorum subsp. carotovorum, utilizou-se o par de primer
EXPCCR/EXPCCF e INPCCR/INPCCF na primeira e segunda reação,
respectivamente. Para o sequenciamento da região 16S rDNA foram utilizados os
primers 27F e 1492R. No geral, os métodos bioquímicos e moleculares não foram
eficientes para a identificação dos isolados. Enquanto, o sequenciamento da região 16S
rDNA foi possível identificar os isolados causadores de podridões moles em nível de
gênero.

A nutrição correta e equilibrada das plantas deve constituir sempre a primeira linha de defesa
contra os patógenos. Os micronutrientes são capazes de mediar na ativação de produtos de
defesa da planta quando disponíveis em quantidades adequadas no tecido vegetal. Diferentes
fontes desses micronutrientes e de elementos não essenciais, porém, benéficos estão sendo
avaliadas no mundo para verificar o seu efeito em reduzir a intensidade de doenças. Este
trabalho teve como objetivo avaliar a efetividade da aplicação de micronutrientes e elementos
não essenciais na forma iônica, sulfatada e/ou nanoparticulada fornecidos às plantas via
solução nutritiva ou pulverizados diretamente na parte aérea em dois patossistemas, ferrugem
do cafeeiro e síndrome da morte súbita da soja. Os resultados desta pesquisa foram divididos
em três artigos. O primeiro objetivou estudar o efeito do boro, manganês e zinco na redução
da ferrugem do cafeeiro em mudas cultivadas em solução nutritiva. Foi verificada redução da
severidade da doença ao usar os três micronutrientes, entretanto, a maior redução de 75% foi
observada ao aplicar zinco. A maior produção de lignina e fenóis totais solúveis FTS foi
associada à aplicação de manganês. No segundo artigo o objetivo foi comparar o potencial de
nanopartículas de micronutrientes e elementos não essenciais diretamente no fungo Fusarium
virguiliforme e na síndrome da morte súbita, doença causada por esse patógeno. In vitro, foi
verificada redução na biomassa seca de F. virguiliforme quando exposto à presença de boro,
zinco e manganês. In planta, foi observado redução da podridão radicular associada à
síndrome quando aplicado 500 mg L -1 de nanopartículas de cobre em 4 de 4 experimentos,
com zinco em 3 de 4, com boro em 2 de 3 e com prata em 2 de 2. No terceiro artigo, foi
realizada a seleção das nanoparticulas promissóras na redução da ferrugem do cafeeiro e na
germinação de esporos de Hemileia vastatrix a partir da avaliação inicial de 10 nanomateriais.
Também foi comparado o efeito de diferentes fontes boro, zinco, manganês e cobre. Em
mudas de cafeeiro expostas a nanopartículas prata e zinco na concentração de 500 mg L -1 foi
observada redução da área abaixo da curva de progresso da ferrugem em 93 e 75%,
respectivamente. Finalmente, às formas nanoparticuladas de boro, zinco, manganês e cobre
reduziram significativamente a ferrugem comparado com seus respectivas formas iônicas.
Dessa forma foi constatado o potencial da adequada nutrição no manejo de doenças de
plantas.

Objetivou-se com o presente trabalho avaliar os efeitos de diferentes produtos a base de
cobre, no controle da ferrugem do cafeeiro em diferentes épocas de inoculação. O
experimento foi conduzido em casa de vegetação no Departamento de Fitopatologia da
Universidade Federal de Lavras, em mudas de cafeeiro cultivar Mundo Novo 379/19,
suscetível ao patógeno. Foram utilizados 8 produtos mais a testemunha, 5 produtos a
base de cobre, 1 fungicida sistêmico dos grupos estrobilurina e triazol, usado de forma
isolada e em combinação com outro de cobre e Cercosporina, em 5 períodos diferentes
de inoculação da ferrugem do cafeeiro. O esquema utilizando foi fatorial 9 x 5,
totalizando 45 tratamentos e quatro repetições, compostas por três mudas. O
delineamento experimento foi em blocos casualizados. Na avaliação da ferrugem,
observou-se interação significativa entre Produto e Tempo de inoculação para a área
abaixo da curva de progresso da incidência (AACPDI), severidade (AACPDS). Para
incidência, com exceção da Cercosporina nos tempos 14 e 21DAAP e Cu+ EDTA no
tempo 14DAAP todos diferiram da testemunha. A Cercosporina apresentou melhor
resultado no tempo 0 DAAP, com 100% de eficiência. Para severidade, todos os
produtos apresentaram bons resultados em relação à testemunha. Os melhores
resultados foram dos produtos Etilfosfonato de Cobre e Hidróxido de Cobre com
eficiência de maior de 98%, para ambos. Para as Variáveis fisiológicas não houve
interação significativa.

Fungicidas inibidores da quinona oxidade (QoI) e inibidores da succinato desidrogenase (SDHIs) não têm sido eficazes no manejo da brusone do trigo no Brasil, causado por Pyricularia graminis-tritici (Pygt). Os primeiros relatos de resistência de Pygt à QoI e SDHIs no Brasil foram em 2015 e 2017, respectivamente. A resistência de Pygt à QoI está ligada à mutação pontual G143A no gene do citocromo b (cytb), e a resistência à SDHIs, associada a mutações em sítios dos genes sdhB, sdhC e ou sdhD. Não se conhece o efeito de mutações em cytb e sdh na adaptabilidade de Pygt. Foram avaliados os componentes de adaptabilidade e habilidade competitiva entre isolados Pygt sensíveis (S) e resistentes (R) à QoI e SDHIs. Foram analisados crescimento micelial, produção de conídios in vitro e in vivo, período latente e agressividade como parâmetros de adaptabilidade. A habilidade competitiva de isolados R e S à QoI e SDHIs foi avaliada em folhas e espigas de trigo, misturas R:S de 100R:0S, 80R:20S, 50R:50S, 20R:80S, 0R:100S e 0:0. Teor fotossintético e de clorofila a, b e total foram determinados para folhas de trigo 0, 3 e 7 dias após a inoculação (dpi) dos isolados S e R à QoI e SDHIs. Detectou-se diferenças significativas entre os parâmetros de adaptabilidade dos isolados S e R à QoI e SDHIs (p<0,05), no qual o isolado R à QoI e SDHIs apresentou maior desempenho in vitro e in vivo, quando comparado ao isolado S. Houve maior produção de conídios in vivo em folhas inoculadas com 80R:20S, e maior agressividade em folhas para 100R:0S e 80R:20S, e em espiga, 100R:0S. A maior porcentagem de germinação conidial nas folhas ocorreu para as misturas 100R:0S e 80R:20S quando em QoI, e para SDHI, 80R:20S e 50R:50S. Folhas sintomáticas 7 dpi dos isolados R à QoI e SDHIs apresentaram menores teores de fotossíntese e  clorofila a, b e total comparado ao S. A principal contribuição deste estudo foi evidenciar que o isolado resistente a QoI e SDHIs não apresentou custo adaptativo comparado com isolado sensível sob as condições testadas. 

O Banana streak virus (BSV) é um dos principais vírus que afetam a bananeira no Brasil. Os
sintomas da doença são variáveis apresentando desde estrias cloróticas no limbo foliar até
desenvolvimento anormal dos cachos e morte a partir do ponto de crescimento. Devido à
heterogeneidade genômica dos isolados de BSV e ao fato dele ter a propriedade de se incorporar
no genoma da bananeira, a utilização de técnicas sorológicas e moleculares, para sua detecção,
nem sempre apresenta a eficiência desejada, sendo de grande importância analisar a
variabilidade de isolados deste vírus no Brasil, para que medidas de prevenção e diagnose sejam
bem estabelecidas para no país. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi analisar os
genomas de isolados coletados em diferentes regiões produtoras do país, com base no seu perfil
de restrição enzimática e na sequência da região RT /RNase H. O DNA total das plantas foi
extraído a partir do tecido foliar e amplificado por RCA, usando o Illustra TempliPhi 100
Amplification Kit. A região do genoma a ser analisada, contendo 540 Kb foi amplificada por
PCR a partir dos produtos do RCA, purificada e enviada para sequenciamento. De acordo, com
o teste de diagnose das oitenta e nove amostras, três amostras foram negativas para PCR e RCA,
13 foram positivas somente na PCR e as setenta e três amostras foram positiva na PCR e RCA,
dessas trinta e cinco foram sequenciadas. Com base nos critérios de classificação de
Badnavirus, a análise das sequências obtidas revelaram a presença de 5 espécies, já descritas, de
Badnavirus no Brasil e quatro outros isolados pertencentes a uma espécie que apresentou
identidades de nucleotídeos abaixo de 80% com todas as espécies já descritas e disponíveis no
GenBank, sugerindo que ela deve ser uma nova espécie. A clivagem enzimática dos produtos do
RCA foi feita empregando as seguintes enzimas: EcoRI, KpnI, PstI, SacI, XbaI, XhoI e
apresentando padrões diferentes ao da literatura. A análise de recombinação da região
RT/RNaseH (ORF3), mostrou que os isolados ES-TERRA1 e MG-BRPL1 são recombinantes
entre PR-CAT1, sendo o evento entre os nucleotídeos 8 e 55 da proteína transcriptase reversa. A
análise e a rede filogenética suporta a evidência que ES-TERRA-1 e MG-BRPL1 são
recombinantes e que o isolado PR-CAT1 é uma sequência parental. Além disso, a análise de
rede filogenética mostrou, eventos reticulados de nós para as espécies de BSV indicando
diversos padrões evolutivos, e sua possível divergência de ancestrais de Badnavirus similares. O
processo evolutivo das espécies de BSV, pode ajudar no entendimento da variabilidade
populacional do vírus.

RESUMO

As bactérias pectinolíticas causadoras de podridões moles são responsáveis por grandes
perdas econômicas no cultivo de uma variada gama de plantas hospedeiras, tanto no
campo como na comercialização, principalmente em regiões de clima quente e úmido.
Assim, o presente trabalho teve como objetivo identificar diferentes isolados de
bactérias causadoras de podridões moles em hortaliças, fruteira e algumas espécies
ornamentais por meio de testes bioquímicos, fisiológicos, moleculares e
sequenciamento da região 16S rDNA. Os ensaios foram realizados no Laboratório de
Fitopatologia da Embrapa Amazônia Oriental e no Laboratório de Bacteriologia de
Plantas do Departamento de Fitopatologia, da Universidade Federal de Lavras
(DFP/UFLA) entre os anos de 2017 e 2018. Foram obtidos 38 isolados de bactérias em
provenientes dos municípios dos Estados do Pará e Minas Gerais. As provas
bioquímicas e fisiológicas realizadas foram: Gram, catalase, oxidase, degradação de
Pectato, isca de biológica em tubérculo de batata e pimentão, anaerobiose, crescimento
a 37°C em meio NA, crescimento em meio YDC e sensibilidade à eritromicina. Na
técnica de reação em cadeia da polimerase foram utilizados os oligonucleotídeos
1491f/L1RA/L1RG para diferenciar Pectobacterium carotovorum de Dickeya
chrysanthemi, Br1f/L1RA/L1RG específicos para Pectobacterium carotovorum subsp.
brasiliensis e algumas estirpes de P. carotovorum subsp. carotovorum, ERWFOR e
CHRREV para identificação da espécie Dickeya chrysanthemi. E para o Nested-PCR
para detectar P. carotovorum subsp. carotovorum, utilizou-se o par de primer
EXPCCR/EXPCCF e INPCCR/INPCCF na primeira e segunda reação,
respectivamente. Para o sequenciamento da região 16S rDNA foram utilizados os
primers 27F e 1492R. No geral, os métodos bioquímicos e moleculares não foram
eficientes para a identificação dos isolados. Enquanto, o sequenciamento da região 16S
rDNA foi possível identificar os isolados causadores de podridões moles em nível de
gênero.

A ferrugem é a principal doença do cafeeiro, podendo gerar perdas significativas na
produção, caso medidas de controle não sejam adotadas. Na literatura são citadas perdas
entre 30 e 50% na produção do cafeeiro o que gera divergência, fato este de corrobora
para a realização do presente estudo. Porém, essas estimativas de perdas geralmente são
empíricas e foram avaliadas em experimentos sem repetições. Em culturas perenes
como o café, poucos estudos tem surgido, e são escassos relativos a perdas de produção
devido a doenças foliares. Diante do exposto, o trabalho tem como objetivo quantificar
as perdas de produtividade do cafeeiro devido à ferrugem. Os experimentos foram
conduzidos em dois locais. No campus da Universidade Federal de Lavras, e na
Fazenda Limeira, ambas as localizações situadas no município de Lavras–MG. Foram
conduzidos em quatro safras consecutivas entre os anos de 2014 a 2018. As lavouras
selecionadas de café (Coffea arabica L.) com idade entre 5 e 8 anos, cultivar catuaí
suscetível à ferrugem, no espaçamento de 3,8 m entre linhas e 0,6 m entre plantas. O
experimento foi conduzido segundo as recomendações para a cultura, realizado o
controle de plantas daninhas e pragas conforme nível de controle. O manejo da
fertilidade do solo e da nutrição foi executado com base nos resultados da análise
química do solo, aplicando-se corretivos e fertilizantes quando necessário. Todos os
experimentos foram em delineamento em bloco casualizados com quatro repetições,
variado o número de tratamentos. Cada tratamento foi constituído de dez plantas por
parcelas, sendo seis plantas centrais consideradas úteis para as avaliações. Os
tratamentos utilizados foram formulações de fungicidas, isolados ou em associação. As
avaliações de incidência, severidade e enfolhamento ocorreram mensalmente de acordo
com escalas diagramáticas propostas por Cunha et al. (2001) e Boldini (2001),
respectivamente. Após as avaliações, os dados foram integrados em área abaixo da
curva de progresso da ferrugem (AACPI) e ou do enfolhamento (AACPE) segundo
Shaner e Finney (1977). A colheita das parcelas ocorreu entre os meses de maio a julho
de acordo com o ano safra. Para a análise estatística, as variáveis AACPI, AACPE
foram submetidas ao teste de normalidade. Após isso, foram realizadas análise de
regressão para obter o modelo ajustado. O software utilizado para a modelagem foi o
“R” versão 3.4.3. Para estimar as perdas causadas pela ferrugem, foi utilizado o modelo
exponencial negativo. Segundo este modelo, na ausência de doença o cafeeiro produz
48 sacas de 60 kg ha-1

, e à medida que vai aumentando o progresso da doença à
produtividade é inversamente proporcional, chegando à zero produtividade do cafeeiro
quando a incidência da doença vai aumentando. Os resultados apontam que as perdas de
produtividade no cafeeiro pode ser quantificado com o modelo exponencial negativo.
Nosso trabalho contribui de forma significativa, fornecendo uma modelagem que pode
ser usada em culturas perenes para estimar perdas de produtividade. Permitindo, que
uma vez estimada as perdas, as perdas econômicas podem ser deduzidas, fazendo o
agricultor a tomar medidas de manejo adequadas.

Bakanae is a disease that occurs in rice and is caused by members of  Fusarium fujikuroi species complex (FFSC). Several species of this complex are known mycotoxin producers, mainly of fumonisins (FBs). In lack of information about the situation of FFSC on rice in Brazil, we studied species  diversity of FFSC, the presence of essential genes of the fumonisin  metabolic pathway, the ability of production of fumonisins, and the natural  occurrence of mycotoxins on rice. We obtained xxx isolates of the FFSC  from rice grains and one hundred strains were sequenced for three genes  (TEF, TUB, CAL). The phylogenetic tree of combined sequences showed  that the most common species were Fusarium fujikuroi, F. proliferatum and 160 F. verticillioides, but also F. anthophilum, F. pseudocircinatum and F.  sterilihyphosum were found, as well as two new lineages Fusarium sp. 1 and Fusarium sp. 2. A subset of 61 strains were analysed for the presence of the  genes FUM1, FUM8 and FUM14 and the ability of production of fumonisins  in vitro. Almost all strains were positive for the genes. Fusarium fujikuroi,  F. proliferatum and F. verticillioides can produce FB1, FB2 and FB3,  whereas F. pseudocircinatum, Fusarium sp. 1 and Fusarium sp. 2 produced  only FB1. Fusarium anthophilum and F. sterilihyphosum do not produce  FBs. The natural occurrence of mycotoxins was analyzed for 93 rice grain  samples and the fumonisins, moniliformin, beuvericin and enniatins  analysed were found, however, at very low concentrations. This is the first  report about of the association of several members of FFSC with rice grains  in Brazil and their ability to produce fumonisins. Considering the relevance  of rice in the feeding of the Brazilian population, our results contribute with  new knowledge for improving models for assessing the risk of mycotoxin  production on rice in Brazil. Once, this study indicates a potential health  threat of Brazilian rice.

A soja é uma cultura de extrema importância nacional. São vários os fatores que afetam a
produtividade, destacando-se as doenças. O controle mais utilizado é o químico. O uso de
produtos alternativos que possam aumentar a eficiência quando associados a fungicidas vem
sendo amplamente empregado. O fosfito de potássio representa um desses produtos com
resultados satisfatórios. Entretanto, não existem estudos relacionados aos efeitos da
associação entre fungicidas e fosfitos. O objetivo foi verificar o potencial do fosfito de
potássio associado a diferentes fungicidas, aplicados na parte aérea de plantas de soja, no
controle de doenças em campo e casa de vegetação para elucidar o modo de ação em
diferentes partes da planta. O primeiro estudo foi realizado para verificar a possível
translocação de fosfito de potássio associado a fungicida por meio da avaliação da severidade
em diferentes trifólios da planta, análise de fósforo e modelagem teórica para averiguar a
interação entre as moléculas do fungicida e fosfito. Avaliou-se também, a atividade sistêmica
de enzimas de defesa em diferentes trifólios com a aplicação de fosfito e fungicida. Por
ultimo, avaliou-se em campo, a eficiência de fosfito de potássio associado a diferentes
fungicidas no controle da ferrugem asiática da soja. Nos ensaios em casa de vegetação, o
fosfito de potássio associado ao fungicida pode promover redução da severidade do oídio em
folhas inferiores. Análises de fósforo mostraram que o fosfito é capaz de translocar para todas
as partes da planta e ocorre um aumento na concentração quando associado ao fungicida. Na
modelagem, pôde-se inferir que as moléculas do fosfito com o fungicida são capazes de
interagir uma com a outra, e seria um atributo vantajoso para carrear o fungicida
descendentemente. Nos ensaios bioquímicos, pode-se comprovar a ação sistêmica de todos os
tratamentos utilizados para todas as enzimas avaliadas, mas somente os tratamentos fosfito de
potássio e fosfito + fungicida apresentaram maior porcentagem de controle nas folhas
baixeiras. Em campo, houve diferença estatística entre todos os tratamentos, porém o
fungicida Fox e associações apresentaram as melhores porcentagens de controle, acima de
99% e as melhores resultados para produtividade.

NÃO INFORMADO

Não informado

Serratia is a genus of Gram-negative bacteria, widespread in nature, important in agricultural, medical and industrial scenarios. Isolates from this taxon exhibits very diverse biological functions such as plant-associated (endophytes, plant growth-promoters, rhizobacteria, phytopathogens), insect-associated (endosymbionts, entomopathogens), fungus-associated (symbiosis) and human pathogens. These different lifestyles are determined by the genetic information that each strain carries. The current DNA sequencing technologies provide us data to investigate this variation through genomic studies. Therefore, the aim of this thesis was to study the Serratia genus using genomic analysis. The biological control agent Serratia marcescens strain N4-5 was sequenced, the nucleotide sequences were assembled into the whole genome and annotated. The N4-5 genome comprises a singular chromosome of 5,074,473 bp, with 59.7% GC content and a naturally occurring plasmid. Both sequences were deposited in GenBank database under the accession numbers CP031315 and CP031316. From this newly sequenced genome, in silico comparisons of all other Serratia complete genomes available in GenBank was performed. Firstly, a taxonomy review of the Serratia genus was conducted based on multi-criteria, namely dDDH, ANI, 16S identity, phylogenetic trees of seven housekeeping genes individually and concatenated (MLSA), as well as phylogenomic tree with whole genomes. These analysis uncovered two misidentifications, supported a recent proposal of a novel Serratia species, confirmed the taxonomic placement of most strains and revealed that many Serratia genomes that are publicly deposited in GenBank are named incorrectly. These organisms were correctly renamed and the two genomes erroneously identified as Serratia were excluded from the analyses. From these ascertained genomes, an updated pan-, core- and accessory-genome was constructed. Analysis revealed an open pan-genome and 546 core genes. Descriptions of Serratia spp. genetic organization and presence of secretion systems, secondary metabolites biosynthetic gene clusters, chitinase genes and CRISPR arrays revealed no correlation between genome relatedness and these traits. Analysis of these genomic features evidence they are not related with the phenotypes/lifestyles exhibited by Serratia spp. strains. Beyond the new information provided on the plant-beneficial strain S. marcescens N4-5, altogether these results provide better understanding of Serratia at the genus level.

As doenças de etiologia bacteriana estão entre os principais fatores que afetam a
produtividade da cultura do tomateiro, dentre elas, a mancha (Xanthomonas vesicatoria, X.
euvesicatoria, X. gardneri e X. perforans) e a murcha (Ralstonia solanacearum) bacteriana. O
controle dessas bacterioses é dificultado em condições ambientais ideais para o
desenvolvimento das doenças, através de aplicação de produtos a base de cobre e utilização de
variedades resistentes, essas na maioria das vezes, quebrada pelo patógeno. Diante disso, o
controle biológico torna-se uma alternativa promissora capaz de reduzir a severidade das
doenças. Assim, os objetivos com este trabalho foram avaliar isolados de bactérias endofíticas
no controle in vitro e in vivo, contra as espécies do complexo de Xanthomonas vesicatoria e
Ralstonia solanacearum, em tomateiro. Cinco isolados bacterianos endofíticos selecionados,
foram testados para a mancha bacteriana. No teste in vitro os isolados UFLA 285, 22 e 07
apresentaram halo de inibição para as espécies de Xanthomonas associadas à mancha
bacteriana. Nos ensaios de casa de vegetação, os isolados analisados tiveram comportamento
frente a cada espécie do complexo Xanthomonas. Para X. euvesicatoria, os isolados
apresentaram redução da severidade em 85,76% e 85%. Para a X. gardneri, quatro
tratamentos foram mais eficazes, com percentuais de controle correspondentes a 73,10%,
68,55%, 65,13% e 64,97%. Para a espécie X. perforans, o isolado mais eficaz foi o UFLA 45,
com 62,65% de redução da severidade. Para X. vesicatoria, os isolados reduzira a severidade
em 82,13%, 65,39% e 63,29%. Para a murcha bacteriana selecionaram-se quinze isolados
endofíticos. Quanto ao teste de antagonismo, oito isolados foram capazes de inibir o
crescimento in vitro de Rs. Desses isolados, UFLA –22, 285, 50, 51, 40 e 47 foram os mais
eficazes, apresentando halos de inibição. Para o experimento em casa de vegetação,
avaliaram-se dois métodos de inoculação: imersão das raízes de mudas de tomate da cultivar
‘Santa Clara’ e inoculação via irrigação do solo. O método de imersão foi mais severo, no
entanto, os isolados conseguiram controlaram a doença em 66,66% e 65,52%, diferindo
estatisticamente do tratamento controle (100% de doença). Para o método de irrigação, o
isolado UFLA 06 foi o mais eficaz, controlando 65,02% da doença em relação ao controle
Dessa forma, conclui-se que as bactérias endofíticas possuem potencial para o biocontrole
sobre o complexo de espécies pertencentes ao gênero Xanthomonas causadoras da mancha
bacteriana e sobre a murcha bacteriana, tanto nos testes in vitro como nos ensaios em casa de
vegetação.

As doenças de etiologia bacteriana estão entre os principais fatores que afetam a produtividade da cultura do tomateiro. A mancha e a pinta bacteriana, tem destacado nos últimos anos, causando perdas de 60% e 70%, respectivamente, quando ocorrem em condições favoráveis ao seu desenvolvimento. O controle de bacterioses além de ser extremamente difícil, requer a adoção de medidas preventivas, como a aquisição de sementes e mudas sadias, eliminação de plantas voluntárias da área de plantio, cultivares resistentes e produtos químicos a base de cobre, os quais, muitas vezes são pouco eficazes no controle das doenças. Dessa forma, o controle biológico mediado por bactérias endofíticas, pode ser uma alternativa de manejo eficiente para reduzir o uso excessivo de agrotóxicos e fertilizantes químicos no cultivo do tomateiro. Assim, objetivou-se com esse trabalho, avaliar o potencial de biocontrole de bactérias endofíticas, contra a pinta e a mancha bacteriana do tomateiro, visando elucidar alguns mecanismos de ação envolvidos no controle das duas doenças, além de verificar o potencial de promoção de crescimento por elas promovido, em plantas de tomateiro. Foram selecionados 15 bactérias endofíticas para realização dos testes de controle biológico das doenças supramencionadas e para os testes de promoção de crescimento. Os resultados obtidos mostraram que o isolado Ufla - 22 foi o mais eficaz para controle da mancha bacteriana e o isolado Ufla – 285, o mais eficaz no controle da pinta bacteriana, reduzindo em 45% e 56% a severidade da doença, respectivamente. Foi possível observar também que esses isolados apresentaram efeito indutor de resistência, pois induziram o aumento da transcrição do gene SOD e proporcionaram incrementos na atividade de enzimas de defesa em plantas de tomate. Além disso, 15 isolados testados, observou-se que alguns foram bons promotores de crescimento de plantas de tomateiro e melhoraram substancialmente a qualidade fisiológica de sementes de tomate. Dessa forma, pode-se sugerir que o uso de bactérias endofíticas no manejo da cultura do tomateiro pode ser promissor quando se busca uma agricultura sustentável e ecologicamente correta.

A utilização de biomassas carbonizadas (biocarvão) como um meio de melhorar as características físicas e químicas dos solos foram amplamente estudadas nos últimos vinte anos. No entanto, os efeitos do biocarvão (BC) sobre a microbiota do solo e seus impactos sobre as doenças de plantas, especialmente as de solo, não receberam a atenção devida e ainda são poucos compreendidos. O presente trabalho avaliou os impactos do fino de carvão (FC) sobre a atividade microbiana do solo e como agentes de promoção de crescimento de plantas e indução de supressividade a Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici raça 3 (fol), em tomateiro, evidenciando a possibilidade da indução de respostas de defesa em plantas. No campo, foi realizada a incorporação de FC (0-20 cm) nas concentrações de 0, 10, 20, 30, 40 e 50 ton ha-1 seguido do plantado milho; após a colheita o solo foi amostrado e avaliado quanto a sua atividade microbiana (liberação de CO2, C e N microbiano, FDA, fosfatase e urease). Adicionalmente a este solo, foi coletado outro na Embrapa Meio Ambiente, o qual foi misturado com FC nas concentrações de 0, 1, 2, 3, 4 e 5% (v/v), sendo os solos infestados com fol (1x106 conídios mL-1) e realizado o transplante de uma muda de tomateiro por vaso. O progresso da doença foi avaliado com uma escala diagramática e ao final foram determinadas as massas secas e frescas dos sistemas radiculares e aéreos, diâmetro do caule, número de folhas e altura das plantas. Para o ensaio de promoção de crescimento, foi realizada mistura de FC nas concentrações de 0, 2,5, 5, 7,5, 10, 12,5 e 15% (v/v), e transplantado uma muda de tomateiro por vaso, sendo o desenvolvimento das plantas acompanhado semanalmente. Trinta dias após o transplantio, foi realizada a coleta de quatro folíolos e avaliada a produção de enzimas relacionadas a defesa vegetal (peroxidase, polifenoloxidase, fenilalanina amônia-liase e proteínas totais). A aplicação de FC na concentração de 20 ton ha-1 aumentou a atividade microbiana do solo. FC nas concentrações de 20, 30, 40 e 50 ton ha-1 apresentaram efeitos diretos na redução do escurecimento vascular causado por fol, sendo a indução de resistência sistêmica a mais provável hipótese, devido aos significativos aumentos na atividade da enzima polifenoloxidase. FC na concentração de 5% em solo infestado por fol promoveram ganhos em biomassa radicular, enquanto a partir de 2% em biomassa aérea. Já em solos livres de fitopatógenos promovem o ganho de biomassa aérea e radicular a partir da concentração de 7,5%. O aumento da concentração de FC reduziu a severidade da murcha de Fusarium em tomateiro.

Compostos orgânicos voláteis (COVs) emitidos por órgãos vegetais podem indicar novos nematicidas. Ainda não foram avaliadas as toxicidades a fitonematoides de emissões voláteis das plantas estudadas neste trabalho. Para isso, inicialmente, 20 plantas foram estudadas individualmente, aterrando um microtubo em areia esterilizada colocada em frasco SupelcoTM. Ao redor do microtubo, foram espalhadas quantidades diferentes de seus macerados. O frasco foi vedado para formação da câmara de gás. Três dias após, J2 de M. incognita foram injetados nos microtubos por uma seringa. Foram avaliadas a imobilidade dos J2 após 24 horas de exposição aos gases e mortalidade 48 horas após. As espécies de plantas que apresentaram maior toxicidade aos J2 foram selecionadas para estudos posteriores. Desta forma, as menores quantidades dos macerados das espécies Passiflora edulis, Nasturtium officinale e Cymbopogon nardus emitiram COVs que causaram altas imobilidades de J2. No entanto, apenas os COVs emitidos por C. nardus e Dysphania ambrosioides causaram mortalidades de M. incognita. A água destilada exposta aos COVs emitidos por C. nardus, D. ambrosioides e N. officinale por 3 dias causaram imobilidades significativas em J2, porém, somente os COVs emitidos por N. officinale causaram mortalidade significativa, quando comparados ao controle. Após a exposição dos J2 aos COVs emitidos pelas 4 espécies vegetais que mais destacaram-se, foi realizada a inoculação em tomateiros. Ocorreram redução no número de galhas e ovos após 45 dias da inoculação. Também foi observado redução no número de galhas e ovos em tomateiros, através do processo de biofumigação, utilizando-se os macerados das 4 espécies vegetais incorporados ao substrato inoculado com ovos de M. incognita. A análise por cromatografia gasosa revelou a presença de 85 moléculas emitidas por macerados das 4 espécies de plantas estudadas, sendo feita a seleção de 5 delas para testes de toxicidades, individualmente, a M. incognita. Somente 1-Octanol, identificada na emissão gasosa de N. officinale, apresentou atividade nematicida.
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Nas regiões tropicais e subtropicais onde o milho é produzido têm se perdas quantitativas e qualitativas dos grãos associados ao fungo Fusarium verticillioides (Fv). Dentre as estratégias de manejo, o controle químico é a mais utilizada. Entretanto, estudos mostram vários produtos registrados para o controle do fungo não apresentando nenhum efeito na incidência do patógeno e redução de fumonisinas. O uso de agentes de bioncontrole (BCAs) pode amenizar ou reduzir este problema, atuando com diferentes mecanismos de ação ainda pouco estudados. O objetivo deste trabalho foi avaliar o impacto de diferentes tratamentos foliares na diversidade de fungos e bactérias do filoplano e seu potencial no controle de Fv em milho. A coleção microbiana foi obtida a partir de amostras do filoplano (folhas e espiga) de plantas de milho inoculadas com Fv e tratadas anteriormente em dois estágios fenológicos distintos (V9 e R1) com um fungicida - Azoxystrobin + Ciproconazole (Az), um agente de biocontrole - Bacillus subtilis (Bs) BIOUFLA2 e os tratamentos controle (agua e meio de cultura bacteriano YPD). Verificou-se que quando são feitas duas aplicações de Bs, a porcentagem de bactérias e fungos antagônicos nativos do filoplano contra Fv aumentou em 25 e 27,3% respectivamente. Entretanto, as duas aplicações do fungicida em diferentes estádios fenológicos no milho reduziu as comunidades de antagonistas (11,6 e 9%). Dos testes conduzidos no campo, foram selecionados e preservados 100 fungos e 140 bactérias. Sob condições controladas (in vitro) foi avaliada a incidência e severidade de Fv em grãos de milho canjica, inoculadas com os possíveis antagonistas sete dias antes do patógeno e simultaneamente. Trinta e quatro bactérias e treze fungos foram selecionados por terem atividade inibitória contra Fv, a maioria oriunda do tratamento exclusivo com Bs. Estes isolados foram avaliados para conhecer os mecanismos de ação envolvidos no biocontrole. A produção de antibióticos pelo método de confrontação direta contra patógeno e o índice de sobreposição do nicho (NOI) foram conduzidos para selecionar os melhores antagonistas no ensaio. Para visualização da interação em microscopia de varredura foram usados discos de 5 mm oriundos da zona de inibição entre os antagonistas e o patógeno, estes foram fixados em Karnovsky até processamento padrão para microscopia eletrônica de varredura. Foram obtidas e identificadas duas bactérias, (Bacillus amyloliquefaciens B45,2) e (Burkholderia gladioli B100) como produtoras de antibióticos e três fungos (Phomopsis sp F42, Epiococcum sp. F46 e Trichoderma sp F8) com evidencia de micoparasitismo e produção de metabolitos contra Fv. Deste isolados, F8, F46 e B100 competiram pelo espaço e os nutrientes no milho contra Fv. Os resultados comprovam o uso potencial de Bs no manejo integrado de Fv em campo, atuando na seleção, conservação e proliferação dos microrganismos antagônicos nativos da filosfera de milho. Assim, deve-se investigar o potencial destes isolados em campo, no tratamento de sementes ou em aplicações foliares no manejo de grãos ardidos. 

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