Banca de DEFESA: JÉSSICA APARECIDA BARBOSA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JÉSSICA APARECIDA BARBOSA
DATA: 25/05/2023
HORA: 13:30
LOCAL: Online
TÍTULO:

BRACHYSPIRA-ASSOCIATED COLITIS AND SALMONELLOSIS IN PIGS: NOVEL APPROACHES AND HOST-PATHOGEN INTERACTIONS

PALAVRAS-CHAVES:

Doenças entéricas, Saúde intestinal, Células B, Microbioma, Suínos.

PÁGINAS: 139
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Zootecnia
SUBÁREA: Produção Animal
ESPECIALIDADE: Manejo de Animais
RESUMO:

Esta tese teve como objetivos verificar a associação da microbiota intestinal antes dos sinais clínicos de disenteria suína (DS) no desfecho da doença; investigar a resposta das células B a Brachyspira spp. e Salmonella enterica sorovar Typhimurium; bem como avaliar a utilidade da calprotectina fecal (FC) como um biomarcador de inflamação intestinal em suínos experimentalmente inoculados com B. hyodysenteriae e S. Typhimurium. No primeiro experimento, 60 amostras fecais foram coletadas de 15 suínos um dia após o contato com suínos inoculados via intragástrica com B. hyodysenteriae (d0); 2 dias (d-2SD) e 1 dia (d-1SD) antes de se observar diarreia muco-hemorrágica, e no dia em que os animais desenvolveram diarreia muco-hemorrágica (MHD). Os perfis da microbiota fecal foram gerados com base na amplificação e sequenciamento do gene universal cpn60. Para o índice de diversidade alpha, apenas um aumento no índice Chao1 em d-1SD e MHD em comparação com amostras d0 foi observado ao nível de gênero. A análise diferencial de abundância revelou que variantes de sequência única (ASV) foram modulados nos dias anteriores à observação de diarreia, onde um aumento de Alistipes dispar and Parabacteroides gordonii foi detectado em MHD.  Em resumo, existe alteração na microbiota fecal nos dias anteriores ao desenvolvimento da DS clínica. No segundo ensaio, células B suínas foram co-incubadas por 8 horas com inóculo controle negativo (n=6), E. coli LPS (n=6), B. hyodysenteriae (n=6), B. hampsonii (cepas virulentas e avirulentas, n = 3 em cada), B. pilosicoli (n=6), B. pilosicoli inativada (n=3), e S. Typhimurium (n =6). A mortalidade de células B foi avaliada usando a coloração Azul de Tripan, e a de expressão de genes relacionados à ativação de células B foram avaliados através de RT-PCR. Após o período de exposição, apenas S. Typhimurium e LPS induziram aumento na mortalidade de células B. B. pilosicoli reduziu a expressão gênica de CD19, syk, lyn e TNF-α, quando comparado ao grupo controle negativo. Nossos achados sugerem B. pilosicoli não provoca uma resposta imediata de células B independentes de células T, nem desencadeia mecanismos de apresentação de antígenos. Por outro lado, todas as outras bactérias são capazes de ativar diferentes genes dentro da via de sinalização de células B. No terceiro experimento, amostras fecais de suínos com colite foram coletadas de animais inoculados experimentalmente com B. hyodysenteriae ou de controles com inoculação simulada (n = 18). Amostras fecais de suínos com enterite foram coletadas de animais inoculados com S. Typhimurium ou de controles com inoculação simulada (n = 14). Para ambos os grupos, as amostras fecais foram classificadas como: 0 = normal; 1 = fezes pastosas; 2 = fezes aquosas; 3 = diarreia mucoide; e 4 = diarreia sanguinolenta. Os níveis de CF foram analisados usando ELISA sanduíche, ensaio imunoturbidimétrico e um teste de fita rápido. A concentração de CF foi maior em amostras de colite com escore fecal 4 em comparação com ≤ 4 escores fecais usando ELISA, e em fezes com escores 3 e 4 do que ≤ 1 usando imunoturbidimetria. Independentemente do ensaio utilizado, não foram encontradas diferenças nos níveis de FC entre os escores fecais para amostras de enterite. Esses dados iniciais sugerem que a FC só atinge níveis detectáveis após colite, mas não enterite, indicando seu potencial papel como biomarcador na colite infecciosa em suínos e possível suporte em intervenções terapêuticas mais criteriosas.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - VINICIUS DE SOUZA CANTARELLI (Membro)
Externo à Instituição - MATHEUS DE OLIVEIRA COSTA - UofS (Membro)
Interno - LUCIANA DE PAULA NAVES (Suplente)
Externo à Instituição - JOHN CLARE SAMUEL HARDING - UofS (Membro)
Externo à Instituição - INÊS ANDRETTA - UFRGS (Suplente)
Externo à Instituição - CESAR AUGUSTO POSPISSIL GARBOSSA - USP (Membro)
Interno - BRUNO ALEXANDER NUNES SILVA - UFMG (Membro)