Protocolo de congelamento de semem de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) em utracongelador (-80°C).
Criopreservação, protocolo de congelamento, reprodução, conservação, qualidade espermática
A tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) é um peixe tropical de água doce, originário da África, e uma das
espécies mais importantes cultivadas como recurso alimentar no mundo. É a espécie exótica mais produzida no Brasil. Este estudo terá como objetivo avaliar a técnica de congelamento com ultracongelador (-80°C) para o sêmen de O. niloticus e validar este método como eficiente em situações em que o nitrogênio líquido não esteja disponível. Para verificar a viabilidade do sêmen congelado em ultrafreezer será realizada avaliação da qualidade do sêmen descongelado com 1 μL de sêmen para 4 μL de solução de NaHCO 3, colocados em lâmina e lamínula e avaliados pelo CASA (sistema automático para análise de espermatozoides por computador). As imagens obtidas serão analisadas pelo software Sperm Class Analyzer (SCA) para análise da motilidade. A duração da motilidade será determinada pelo período que os espermatozoides levam até parar completamente o movimento progressivo dos espermatozoides. Para avaliar a porcentagem de espermatozoides viáveis, será feita preparação de eosina-nigrosina de acordo com o método descrito por Björndahl et al. e um total de 300 espermatozoides serão contados em cada lâmina com aumento de 1000x. E será avaliado se é possível utilizar o sêmen descongelado para fertilização de ovócitos das fêmeas com alta taxa de eclosão e alta taxa de sobrevivência. Avaliando dessa forma se o protocolo contribui para a expansão da fertilização, aumento da prole em diferentes regiões geográficas e épocas do ano e para o melhoramento genético. Espera-se identificar se o protocolo de congelamento de sêmen em ultrafreezer é viável e identificar se o sêmen descongelado será efetivo na fertilização dos ovócitos das fêmeas.